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    響應(yīng)面優(yōu)化紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒澄清工藝研究

    2020-10-09 07:13:04呂長鑫巴俊文紀(jì)秀鳳王新明王妍惠張新宇周文萱王維民
    關(guān)鍵詞:皂土果酒水浴

    呂長鑫,巴俊文,紀(jì)秀鳳,王新明,王妍惠,張新宇,周文萱,王維民

    (1.渤海大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院,遼寧省食品安全重點(diǎn)實驗室,生鮮農(nóng)產(chǎn)品貯藏加工及安全控制技術(shù)國家地方聯(lián)合工程研究中心,遼寧 錦州121013;2.大連 中超食品有限公司,遼寧 大連116400)

    0 引言

    紅樹莓為薔薇科懸鉤子屬木本植物,別名覆盆子、托盤和馬林果等,在我國東北地區(qū)多有種植[1].紅樹莓果實柔嫩多汁,酸甜可口,含有大量花色苷和黃酮等活性物質(zhì),具有提高肌體免疫力和預(yù)防心腦血管疾病等功效,食用價值較高,被世界糧農(nóng)組織譽(yù)為第三代“黃金水果”[2-3].藍(lán)莓為杜鵑花科越橘屬多年生灌木小漿果果樹[4].藍(lán)莓果實中含有豐富的營養(yǎng)成分,具有保護(hù)視力和抗癌等功能,享有“水果皇后”之稱譽(yù),且被推薦為五大健康水果之一[5-6].

    紅樹莓和藍(lán)莓均富含多種營養(yǎng)物質(zhì),但均不耐貯藏,將二者復(fù)合制成果酒,克服了單一果酒色香味欠佳和營養(yǎng)不足等缺陷,使其更加美味可口,更具營養(yǎng)保健價值.果酒在釀制過程中由于一些生物性或非生物性等因素,易產(chǎn)生絮狀物質(zhì)而生成沉淀,影響果酒品質(zhì)[7].果酒澄清度是衡量酒體品質(zhì)的重要因素[8],因此,本實驗對紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒澄清工藝進(jìn)行研究.

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    紅樹莓:錦州義縣;藍(lán)莓:錦州南山果園;明膠、殼聚糖、皂土、硅藻土:武漢祥達(dá)食品添加劑有限公司;檸檬酸:河南萬邦實業(yè)有限公司;白砂糖:南寧糖業(yè)股份有限責(zé)任公司;果膠酶、纖維素酶:南寧龐博生物工程有限公司;亞硫酸氫鈉:河北鵬宇生物科技有限公司;酵母:安琪酵母股份有限公司.

    1.2 儀器與設(shè)備

    BCD-212冰箱:博西華家用電器有限公司;UV-2700紫外分光光度計:日本島津公司;MIR-254-PC低溫恒溫培養(yǎng)箱:松下健康醫(yī)療器械株式會社;Centrifuge5804R冷凍離心機(jī):德國艾本德儀器有限公司.

    1.3 試驗方法

    1.3.1 紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒制作工藝流程發(fā)酵→澄清→陳釀→灌裝→密封→殺菌→冷卻→成品.

    1.3.2 操作要點(diǎn)

    分別將解凍后的紅樹莓和藍(lán)莓打漿后,按果膠酶與纖維素酶9:1的質(zhì)量比各添加0.1%的果膠酶和纖維素酶復(fù)合酶,在45 ℃條件下酶解2 h后過濾取汁,添加100 mg/L亞硫酸氫鈉,利用碳酸氫鈉調(diào)節(jié)果汁pH至3.8,再添加200 g/L白沙糖.配置2%蔗糖水溶液,稱取酵母,酵母與蔗糖水質(zhì)量比為1:10,在40 ℃條件下活化25 min.將調(diào)整好的果汁加入活化后酵母菌液中,在28 ℃發(fā)酵7 d后倒罐,20 ℃后發(fā)酵10 d.

    1.3.3 不同澄清方式對復(fù)合果酒透光率影響

    1.3.3.1 自然澄清法

    取六支具塞試管,每支試管中放20 mL果酒,分別室溫放置5、10、15、20、25和30 d后離心12 min,轉(zhuǎn)速為4000 r/min.取3 mL離心后上清液于比色皿中,在波長800 nm下測定透光率.

    1.3.3.2 冷凍澄清法

    取20 mL果酒于七個容器中,在-15 ℃條件下分別凍藏2、4、6、8、10、12和14 d后取出,4000 r/min離心12 min,取3 mL上清液于比色皿中,800 nm下測定透光率.

    1.3.3.3 澄清劑澄清法

    分別配置殼聚糖溶液、明膠溶液、皂土懸浮液和硅藻土懸浮液,備用[9].取20 mL果酒于具塞試管中,依次加入0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 mL配置好的殼聚糖溶液、明膠溶液、皂土懸浮液和硅藻土懸浮液做澄清劑,50 ℃下處理1 h后室溫靜置72 h,在4000 r/min下離心12 min,取3 mL離心后上清液于比色皿中,在波長為800 nm下測透光率,遴選出兩種澄清效果最好的澄清劑進(jìn)行復(fù)合.

    1.3.4 復(fù)合澄清劑澄清單因素試驗

    1.3.4.1 復(fù)合澄清劑配比的選擇

    取20 mL果酒至具塞試管中,復(fù)合澄清劑總添加量為1.4 mL,殼聚糖與皂土按體積比為2:5、3:4、4:3、5:2、6:1加入,在50 ℃下處理50 min后靜置72 h,在4000 r/min條件下離心12 min,取3 mL上清液于比色皿中,在波長為800 nm下測定透光率.

    1.3.4.2 澄清溫度的選擇

    取酒樣20 mL至試管中,殼聚糖與皂土體積比為4:3,分別在40、45、50、55、60 ℃下保溫50 min后靜置72 h,4000 r/min條件下離心12 min,取3 mL離心后上清液于比色皿中,在波長為800 nm下測定透光率.

    1.3.4.3 澄清時間的選擇

    取酒樣20 mL至試管中,殼聚糖與皂土體積比為4:3,水浴溫度為50 ℃,水浴時間分別水浴30、40、50、60、70 min,澄清結(jié)束后室溫靜置72 h,在4000 r/min條件下離心12 min,測定其透光率.

    1.3.5 響應(yīng)面優(yōu)化試驗

    在單因素試驗基礎(chǔ)上進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化試驗,以透光率為響應(yīng)值,進(jìn)行試驗設(shè)計,水平因素表見表1.

    表1 響應(yīng)面試驗因素水平表

    2 結(jié)果與分析

    2.1 自然澄清對復(fù)合果酒透光率的影響

    圖1為自然澄清對果酒透光率的影響.由圖可知,在自然澄清0~20 d期間果酒透光率上升較為明顯,超過20 d果酒透光率趨于平穩(wěn).因此自然澄清20 d效果最佳.

    2.2 冷凍澄清對復(fù)合果酒透光率的影響

    由圖2可知,冷凍后果酒透光率較自然澄清有所提高.冷凍時間在0~6 d期間果酒透光率上升較為明顯;超過6 d時,透光率略有下降后趨于平穩(wěn).因此冷凍時間6 d對復(fù)合果酒澄清效果最佳.

    2.3 澄清劑澄清對復(fù)合果酒透光率的影響

    圖3為四種澄清劑對果酒透光率的影響,由圖可以看出,在澄清劑添加量不斷增加的過程中,四種澄清劑透光率均先增高后降低,這說明殼聚糖、皂土、硅藻土以及明膠濃度過高會破壞與果酒形成的穩(wěn)定體系,導(dǎo)致紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒透光率下降.在四種澄清劑中皂土澄清效果最好,其次為殼聚糖,硅藻土澄清效果最差,因此研究殼聚糖與皂土復(fù)合澄清劑對果酒透光率的影響.

    2.4 復(fù)合澄清劑澄清單因素試驗結(jié)果分析

    2.4.1 復(fù)合澄清劑配比對果酒澄清效果影響分析

    由殼聚糖和皂土復(fù)配澄清劑對果酒進(jìn)行澄清作用研究結(jié)果可知,透光率均可達(dá)86%以上,澄清效果顯著.從圖4可以看出,透光率隨著復(fù)配澄清劑比例不斷增加呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢.當(dāng)殼聚糖與皂土體積比為4:3時紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒透光率達(dá)到89.5%,此時透光率最高;繼續(xù)增大復(fù)配澄清劑比例,透光率呈下降趨勢.紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒中含有帶負(fù)電荷的分子,而在酸性條件下,殼聚糖在果酒中會形成帶有正電荷的分子,此時果酒中帶有正負(fù)電荷的微粒相互吸引,使紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒中果膠和單寧等顆粒物質(zhì)絮凝并產(chǎn)生沉淀[10],從而增大果酒透光率;殼聚糖與皂土所形成的電荷恰好相反,因此對二者進(jìn)行復(fù)合與單一澄清劑相比優(yōu)勢明顯[11].過量殼聚糖所形成的膠體系統(tǒng)反而會造成紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒混濁,導(dǎo)致其透光率下降.

    2.4.2 澄清溫度對果酒澄清效果影響分析

    由圖5可知,果酒透光率隨著澄清溫度的不斷增大呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢.澄清溫度在低于50 ℃期間透光率呈上升趨勢明顯;當(dāng)溫度達(dá)到50 ℃時透光率達(dá)到88.9%,此時澄清效果最佳;而當(dāng)溫度在50~60 ℃期間,透光率呈急速下降趨勢.表明適宜得溫度使殼聚糖與皂土吸附正負(fù)電荷效果更加顯著,二者共同作用吸附紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒中帶電的顆粒物質(zhì),使紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒產(chǎn)生沉淀從而提高紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒澄清度[12].若澄清溫度過高會分解紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒中部分活性物質(zhì),從而導(dǎo)致果酒透光率下降[13].

    2.4.3 澄清時間對果酒澄清效果影響分析

    從圖6可以看出,果酒透光率隨著澄清時間延長呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢.澄清時間在40~50 min期間,透光率具有明顯上升趨勢;當(dāng)澄清時間為50 min時透光率可達(dá)89.3%;繼續(xù)增加澄清時間,紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒澄清度逐漸下降,說明適當(dāng)澄清時間會使紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒中正負(fù)電荷之間更好作用使紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒產(chǎn)生絮凝并沉淀.澄清時間過長會使其粘度過大,影響果酒品質(zhì)和澄清度[14-15].

    2.5 響應(yīng)面優(yōu)化復(fù)合澄清劑澄清試驗

    2.5.1 模型建立及顯著性分析

    以透光率為響應(yīng)值,在單因素試驗基礎(chǔ)上,以A(復(fù)合澄清劑比例)、B(澄清溫度)和C(澄清時間)為考察因素進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化試驗,試驗結(jié)果見表2.

    表2 響應(yīng)面試驗設(shè)計及結(jié)果

    為檢驗各因素對復(fù)合果酒透光率的影響程度和回歸方程的有效性,對以上試驗結(jié)果進(jìn)行方差分析,由表3可以看出,模型p<0.0001,失擬相p=0.1631>0.05,說明以以上3因素為考察因素的模型極顯著,失擬相不顯著,方程擬合度較好.由F值可以看出,水浴溫度、水浴時間和復(fù)合澄清劑比例對紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒透光率的影響順序依次為:水浴溫度<水浴時間<復(fù)合澄清劑比例.模型中復(fù)合澄清劑配比和澄清時間(AC)對紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒透光率無顯著影響,復(fù)合澄清劑配比和澄清溫度(AB)對果酒透光率影響顯著,而因素A、B、C、BC、A2、B2、C2均對果酒透光率具有極顯著影響.對表2試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸擬合,得到紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒透光率(Y)對復(fù)合澄清劑比例(A)、水浴溫度(B)及水浴時間(C)的二次多項回歸模型為:Y=91.60+0.52A-0.30B+0.45C-0.26AB+0.080AC-0.60BC-0.65A2-0.84B2-0.59C2. 變異系數(shù)CV=0.23%,CV值越小,表明試驗有良好精確度和可信性.總決定系數(shù)R2=0.9776,校正系數(shù)R2Adj=0.9487,可以良好地反映出紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒透光率與以上3個因素之間關(guān)系.

    表3 方差分析表

    2.5.2 響應(yīng)面各因素間交互作用分析

    圖7依次展示了AB、AC和BC三組交互作用與紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒透光率構(gòu)成的等高線圖及3D圖.圖7a為因素AB交互作用的等高線圖,圖7b為因素AB交互作用的3D圖,由兩圖可以看出等高線圖呈橢圓形,且3D圖較陡峭,說明AB交互作用對紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒透光率影響顯著[16-17];圖7c中AC交互作用的等高線圖橢圓不明顯,且結(jié)合表3可知AC交互作用不顯著,因此不做解釋;圖7e為因素BC交互作用的等高線圖,圖7f為因素BC交互作用的3D圖,由圖可以看出BC交互作用等高線圖呈橢圓形,3D較陡峭,說明因素BC間交互作用對紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒透光率產(chǎn)生極顯著影響.

    2.5.3 驗證試驗

    由Design Expert軟件分析可以預(yù)測出最佳優(yōu)化條件為:復(fù)合澄清劑配比9:5,澄清溫度47.48 ℃,澄清時間56.75 min,紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒透光率預(yù)測值為91.97%.實際測得的紅樹莓-藍(lán)莓復(fù)合果酒透光率為92.36%,與預(yù)測值的相對誤差為0.42%,所建模型準(zhǔn)確可靠.

    3 結(jié)論

    本文通過對自然、澄清劑和冷凍三種澄清法比較,結(jié)果表明澄清劑澄清效果最好,且針對殼聚糖和皂土進(jìn)行復(fù)合澄清劑進(jìn)行研究,在單因素基礎(chǔ)上且通過響應(yīng)面優(yōu)化得到最佳澄清工藝條件:澄清溫度47 ℃、澄清時間57 min、復(fù)合澄清劑配比9:5,果酒透光率預(yù)測值為91.97%,按此條件進(jìn)行3次平行實驗,所得復(fù)合果酒平均透光率為92.36%,響應(yīng)面模型與實際值擬合良好,在實際生產(chǎn)中具有一定應(yīng)用價值.

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