氣動(dòng)管道傳輸系統(tǒng)對(duì)凝血及血小板功能指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果的影響

張麗敏,歐 珠,李 虓,孫越紅,王 丹,王 平,趙 暉,康熙雄,張國(guó)軍△

(1.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100070；2.北京市免疫試劑臨床工程技術(shù)研究中心，北京 100070；3.首都醫(yī)科大學(xué)，北京 100069)

在醫(yī)療機(jī)構(gòu)中，現(xiàn)代氣動(dòng)管道傳輸系統(tǒng)(PTS)可以快速、高效地將血液標(biāo)本傳輸?shù)綄?shí)驗(yàn)室，加快了標(biāo)本處理時(shí)間和周轉(zhuǎn)時(shí)間[1-2]。然而，傳輸過(guò)程中各種物理因素，如空氣壓力、加速度、減速、徑向重力和震蕩等都會(huì)導(dǎo)致標(biāo)本中的細(xì)胞損傷或活化，從而影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性[1-3]。因此，當(dāng)使用PTS進(jìn)行標(biāo)本傳輸時(shí)，應(yīng)評(píng)估其對(duì)各實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果的影響。根據(jù)分析前階段的質(zhì)量要求，凝血及血小板功能是最需要驗(yàn)證的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。PTS對(duì)凝血指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果的影響在不同研究中得出的結(jié)果不同[3,4-7]。例如,部分研究允許使用PTS傳輸標(biāo)本進(jìn)行血小板活性檢測(cè)[1,5]，而另有研究表明PTS傳輸標(biāo)本會(huì)引起血小板參數(shù)的顯著變化，建議人工傳輸標(biāo)本[6-8]。有研究發(fā)現(xiàn)，常規(guī)凝血指標(biāo)，如活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)和凝血酶原時(shí)間(PT)在大多數(shù)標(biāo)本中檢測(cè)結(jié)果不受PTS傳輸?shù)挠绊慬5]，而有研究報(bào)道了在PTS傳輸下，APTT、PT明顯縮短[1]。可見(jiàn)目前PTS對(duì)凝血及血小板功能指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果的影響結(jié)論并不一致。首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院近期啟用了PTS進(jìn)行標(biāo)本的傳輸，為了觀察PTS傳輸對(duì)凝血及血小板功能指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果的影響，做好標(biāo)本分析前質(zhì)量控制，本研究進(jìn)行了如下探討。

1 資料與方法

1.1一般資料 隨機(jī)選取于首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院就診，需進(jìn)行凝血及血小板功能指標(biāo)檢測(cè)的患者80例作為研究對(duì)象，其中進(jìn)行凝血功能指標(biāo)檢測(cè)的有45例，進(jìn)行血小板功能指標(biāo)檢測(cè)的有35例。所有研究對(duì)象空腹安靜狀態(tài)下同時(shí)抽取兩管枸櫞酸鈉抗凝的靜脈血4 mL，其中1管由人工傳輸至實(shí)驗(yàn)室(人工傳輸組)，另1管經(jīng)PTS傳輸至實(shí)驗(yàn)室(PTS傳輸組)。

1.2儀器與試劑 瑞仕格醫(yī)療公司生產(chǎn)的PTS，其主要由傳輸管道、站點(diǎn)、傳輸瓶、空氣壓縮機(jī)、轉(zhuǎn)換器和控制軟件等組成；傳輸速度為5～8 m/s，傳輸距離為800 m。北京泰利康信科技有限公司生產(chǎn)的全自動(dòng)血小板聚集分析儀及配套誘導(dǎo)劑：150 μmol/L的二磷酸腺苷(ADP),5 mg/mL的花生四烯酸(AA)及100 μg/mL的膠原(COL)。西班牙沃芬公司生產(chǎn)的ACL TOP 700全自動(dòng)凝血分析儀及其配套試劑。日本積水醫(yī)療株式會(huì)社生產(chǎn)的D-二聚體(D-D)和纖維蛋白降解產(chǎn)物(FDP)檢測(cè)試劑。

1.3方法

1.3.1凝血功能指標(biāo)檢測(cè) 標(biāo)本經(jīng)3 000 r/min離心15 min，得到乏血小板血漿(PPP)，采用凝固法進(jìn)行PT、APTT、纖維蛋白原(FIB)及凝血酶時(shí)間(TT)檢測(cè)；采用膠乳免疫比濁法檢測(cè)D-D和FDP。兩組標(biāo)本同時(shí)上機(jī)檢測(cè)，并在2 h內(nèi)完成。各指標(biāo)參考區(qū)間：PT為9.4～12.5 s；APTT為25.1～36.5 s；FIB為2～4 g/L；TT為11.0～17.8 s；D-D為0.0～1.5 g/L；FDP為0～5 g/L。

1.3.2血小板功能指標(biāo)檢測(cè) 標(biāo)本以875 r/min離心10 min，得到富血小板血漿(PRP),加入比色杯中；標(biāo)本以3 000 r/min再次離心10 min得到PPP，加入另一支比色杯中。采用光學(xué)比濁法檢測(cè)血小板功能指標(biāo)，包括AA、ADP和COL誘導(dǎo)的血小板聚集率(PAG)，即PAG-AA、PAG-ADP和PAG-COL。兩組標(biāo)本同時(shí)上機(jī)檢測(cè)，并在4 h內(nèi)完成。

1.3.3觀察指標(biāo) (1)比較兩組凝血功能指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果；(2)比較兩組血小板功能指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果；(3)比較不同抗血小板療效患者血小板功能指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果，阿司匹林療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：PAG-AA≥20%為阿司匹林治療無(wú)效，PAG-AA<20%為阿司匹林治療有效[9]；氯吡格雷療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：PAG-ADP≥50%為氯吡格雷治療無(wú)效，PAG-ADP<50%為氯吡格雷治療有效[10]。

2 結(jié) 果

2.1兩組凝血功能指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較 PTS傳輸組PT、APTT均低于人工傳輸組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。FIB、TT、D-D和FDP在兩組間比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組凝血功能指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較

2.2兩組血小板功能指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較 進(jìn)行血小板功能指標(biāo)檢測(cè)的35對(duì)標(biāo)本中，30對(duì)標(biāo)本進(jìn)行了PAG-AA檢測(cè),33對(duì)標(biāo)本進(jìn)行了PAG-ADP檢測(cè)，18對(duì)標(biāo)本進(jìn)行了PAG-COL檢測(cè)。PTS傳輸組PAG-AA高于人工傳輸組，PAG-ADP、PAG-COL均低于人工傳輸組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 兩組血小板功能指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較

2.3兩組不同療效患者血小板功能指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較 根據(jù)PAG-AA檢測(cè)結(jié)果，阿司匹林治療有效21例，阿司匹林治療無(wú)效9例；根據(jù)PAG-ADP檢測(cè)結(jié)果，氯吡格雷治療有效18例，氯吡格雷治療無(wú)效15例。阿司匹林治療有效患者中，兩組PAG-AA比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；阿司匹林治療無(wú)效患者中，人工傳輸組PAG-AA高于PTS傳輸組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。氯吡格雷治療有效及治療無(wú)效患者中，人工傳輸組PAG-ADP均高于PTS傳輸組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 兩組不同療效患者血小板功能指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較

3 討 論

PTS傳輸過(guò)程中加減速及劇烈的震蕩是否會(huì)提前激活血小板或凝血因子，啟動(dòng)凝血途徑，從而影響凝血及血小板功能是臨床關(guān)注的熱點(diǎn)問(wèn)題。目前，關(guān)于PTS傳輸對(duì)標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果影響的研究較多，但由于各醫(yī)療機(jī)構(gòu)采用的傳輸系統(tǒng)、傳輸距離、傳輸速度、傳輸瓶種類及減震措施等不同，導(dǎo)致各研究結(jié)果也不盡相同。因此，各醫(yī)療機(jī)構(gòu)間的研究結(jié)果不能互相借鑒，而應(yīng)該結(jié)合自身實(shí)際情況進(jìn)行臨床研究驗(yàn)證。本研究結(jié)果顯示，血液標(biāo)本采用PTS以5～8 m/s的速度傳輸800 m后，PT和APTT縮短，而FIB、TT、D-D和FDP無(wú)明顯變化，但因兩組PT和APTT的檢測(cè)結(jié)果均在參考區(qū)間范圍內(nèi)，故兩組間的差異并無(wú)臨床意義，這與既往SANDRA等[1]的研究結(jié)果一致，其認(rèn)為PTS傳輸后APTT雖然縮短，但差異僅限于有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而無(wú)臨床意義，同時(shí)可認(rèn)為PTS傳輸導(dǎo)致的檢測(cè)結(jié)果差異仍在方法學(xué)批內(nèi)檢測(cè)的變異范圍之內(nèi)。所以，綜合既往研究結(jié)果，本研究中雖然PT、APTT經(jīng)PTS傳輸后的檢測(cè)結(jié)果與人工傳輸?shù)慕Y(jié)果存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但此種差異并不具有臨床意義，因此PTS可應(yīng)用于凝血功能檢測(cè)標(biāo)本的傳輸。值得指出的是，此結(jié)論僅針對(duì)首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院的PTS及相應(yīng)參數(shù)，是否適用于其他傳輸距離和傳輸速度還需要更多研究驗(yàn)證。傳輸速度作為PTS的一個(gè)重要參數(shù)，有研究表明不同的傳輸速度導(dǎo)致的溶血程度不同[3]，此外，不同傳輸速度下標(biāo)本震蕩的劇烈程度也會(huì)導(dǎo)致血小板或凝血因子的機(jī)械激活程度產(chǎn)生差異，因此，降低傳輸速度可能會(huì)降低PTS對(duì)標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果的影響，但同時(shí)會(huì)延長(zhǎng)傳輸時(shí)間，一定程度上抵消PTS在縮短周轉(zhuǎn)時(shí)間方面的優(yōu)勢(shì)，因此本研究并未設(shè)置更低速度的傳輸模式。

本研究中，PTS傳輸組PAG-AA高于人工傳輸組，PAG-ADP、PAG-COL低于人工傳輸組。目前，關(guān)于PTS對(duì)血小板功能檢測(cè)結(jié)果影響的相關(guān)研究較多，但得出的結(jié)論并不一致[11-13]，考慮可能與以下因素相關(guān)：(1)與采用的檢測(cè)儀器及方法學(xué)不同有關(guān)，如光學(xué)比濁法、血栓彈力圖及流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)血小板功能的實(shí)驗(yàn)原理、標(biāo)本類型及操作步驟等均不同；(2)不同的研究采用了不同品牌的PTS，其傳輸速度、距離及加減速的差異都可能對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成不同程度的影響。POLETAEVA等[13]以10例健康志愿者為研究對(duì)象，觀察PTS對(duì)血小板功能檢測(cè)結(jié)果的影響，結(jié)果顯示，不同的誘導(dǎo)劑條件下PAG有不同的變化趨勢(shì)，如PTS傳輸后，COL誘導(dǎo)的PAG升高，腎上腺素誘導(dǎo)的PAG下降，而ADP誘導(dǎo)的PAG無(wú)明顯變化。另有研究觀察了不同肝素劑量下PTS傳輸對(duì)APTT及抗Xa因子檢測(cè)結(jié)果的影響，結(jié)果顯示，PTS傳輸對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響與藥物劑量有關(guān)，并提示患者處于不同生理、病理狀態(tài)下的血液標(biāo)本對(duì)PTS傳輸?shù)拿舾行圆煌琜14]。基于此，本研究分析了PTS對(duì)不同抗血小板療效患者血小板功能檢測(cè)結(jié)果的影響，結(jié)果顯示阿司匹林治療有效患者中，兩組PAG-AA比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；阿司匹林治療無(wú)效患者中，人工傳輸組PAG-AA高于PTS傳輸組(P<0.05)。分析其原因可能為阿司匹林治療無(wú)效患者殘存的有聚集功能的血小板數(shù)量較多，在PTS傳輸過(guò)程中由于震蕩而提前激活了部分血小板，導(dǎo)致血小板的大量消耗，而最終檢測(cè)時(shí)血小板聚集功能下降；而阿司匹林治療有效患者本身殘存的有聚集功能的血小板數(shù)量少，震蕩導(dǎo)致的血小板提前激活作用不明顯。與PAG-AA不同，在氯吡格雷治療有效和無(wú)效患者中，人工傳輸組PAG-ADP均高于PTS傳輸組(P<0.05)，這是由于氯吡格雷治療有效與無(wú)效患者的PAG-ADP均較高，有活性的血小板數(shù)量更多，PTS傳輸時(shí)震蕩導(dǎo)致的血小板提前激活作用更明顯。由此可見(jiàn)，PTS傳輸對(duì)血小板功能檢測(cè)結(jié)果有一定影響，且與藥物抗血小板療效有一定關(guān)系，因此建議對(duì)血小板功能檢測(cè)標(biāo)本采用人工傳輸?shù)姆绞?，禁止采用PTS進(jìn)行傳輸。

4 結(jié) 論

綜上所述，PTS適用于凝血功能檢測(cè)標(biāo)本的傳輸，但不適用于血小板功能檢測(cè)標(biāo)本的傳輸；PTS對(duì)血小板功能檢測(cè)結(jié)果的影響可能與抗血小板藥物的療效有關(guān)。