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    高效液相色譜法測定新疆彩棉中游離棉酚含量

    2020-09-28 08:23:36潔,李洋,姚軍*
    化學(xué)與生物工程 2020年9期
    關(guān)鍵詞:棉酚棕色游離

    袁 潔,李 洋,姚 軍*

    (1.新疆醫(yī)科大學(xué) 厚博學(xué)院,新疆 克拉瑪依 834000; 2.新疆醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院,新疆 烏魯木齊 830011)

    天然彩色棉是一種在棉花吐絮時(shí)纖維就具有天然色彩的新型紡織原料[1],主要包括棕色和綠色兩種品系。新疆天然彩色棉產(chǎn)量占我國彩棉總量的95%,占世界彩棉總量的60%左右,已成為我國乃至世界重要的天然彩色棉生產(chǎn)加工與供應(yīng)基地。用彩棉制成的紡織品不需化學(xué)染料染色,因而不含甲醛、偶氮染料等有害物質(zhì),并具有防靜電、止騷癢的功能,是名副其實(shí)的“綠色產(chǎn)品”,具有廣闊的發(fā)展前景。

    棉酚是一種黃色多酚羥基雙萘醛類化合物,主要存在于錦葵科植物棉花的根皮和成熟種子內(nèi),可分為游離棉酚和結(jié)合棉酚[2-3]。游離棉酚因結(jié)構(gòu)中含有活性的醛基和羥基而具有毒性,而結(jié)合棉酚因棉酚與蛋白質(zhì)結(jié)合,毒性較小。長期攝食游離棉酚會(huì)引起機(jī)體低血鉀[4],損害心、肝、腎等實(shí)質(zhì)性器官[5-6],同時(shí)游離棉酚還能抑制精子發(fā)生和活動(dòng)[7]。目前對游離棉酚的檢測研究大多集中在棉籽仁[8]、棉籽油[9]和棉粕[10]等方面,對棉花中游離棉酚的檢測未見報(bào)道。棉花作為紡織工業(yè)的主要原料,與人體肌膚直接接觸,其質(zhì)量安全問題不容忽視,如果棉花中游離棉酚含量較高,可能會(huì)對消費(fèi)者的健康造成潛在的危害。因此,作者建立高效液相色譜法測定新疆彩棉中游離棉酚的含量,并進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證,旨在為制定棉花纖維質(zhì)量安全檢測標(biāo)準(zhǔn)提供理論依據(jù)。

    1 實(shí)驗(yàn)

    1.1 材料、試劑與儀器

    5種棕色彩棉(編號(hào)分別為1#、2#、3#、4#、5#)、4種綠色彩棉(編號(hào)分別為6#、7#、8#、9#)、3種普通白棉(編號(hào)分別為10#、11#、12#),中國彩棉集團(tuán)股份有限公司。

    棉酚對照品(純度>98%),陜西慈緣生物科技有限公司;甲醇(色譜純)、乙醇(分析純)、磷酸(分析純),國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

    Agilent 1260型高效液相色譜儀,美國Agilent公司;FA1004型電子分析天平,上海恒平科學(xué)儀器有限公司;KQ2200B型臺(tái)式數(shù)控超聲波清洗器,昆山超聲儀器有限公司。

    1.2 棉酚對照溶液的制備

    精密稱取棉酚對照品10.50 mg,置于25 mL棕色容量瓶中,加入1%醋酸的乙醇溶液定容至刻度,得濃度為420 μg·mL-1的棉酚對照溶液。

    1.3 供試溶液的制備

    稱取1 g已剪碎的棉花樣品于研缽中,加入1%醋酸的乙醇溶液20 mL,研磨10 min后倒入錐形瓶,超聲10 min,抽濾,將濾液定容至20 mL棕色容量瓶中,經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過濾,即得供試溶液。

    1.4 色譜條件

    Agilent SB-C18色譜柱 (4.6 mm×250 mm,5 μm),流動(dòng)相為甲醇-2%磷酸水溶液(85∶15,體積比),流速為1 mL·min-1,檢測波長為235 nm,柱溫為20 ℃,進(jìn)樣量為10 μL。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 溶劑的確定

    棉酚因結(jié)構(gòu)中含有醛基、酚羥基等官能團(tuán),化學(xué)性質(zhì)較活潑,易被氧化劑氧化而變質(zhì)。研究發(fā)現(xiàn),游離棉酚在酸性條件下較為穩(wěn)定,因此在乙醇中加入醋酸以提高游離棉酚的穩(wěn)定性。

    2.2 專屬性

    取濃度為16.8 μg·mL-1的棉酚對照溶液和供試溶液按色譜條件進(jìn)樣測定,結(jié)果如圖1所示。

    圖1 棉酚對照溶液(a)和供試溶液(b)的HPLC圖譜Fig.1 HPLC spectra of gossypol reference solution(a) and test solution(b)

    由圖1可知,棉酚對照溶液和供試溶液中棉酚保留時(shí)間一致,均為16.3 min,其它成分無干擾。

    2.3 方法學(xué)驗(yàn)證

    2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性關(guān)系

    精密量取5 mL 420 μg·mL-1棉酚對照溶液于25 mL棕色容量瓶中,加入1%醋酸的乙醇溶液定容至刻度,經(jīng)逐級(jí)稀釋得濃度分別為0.134 μg·mL-1、0.672 μg·mL-1、3.36 μg·mL-1、16.8 μg·mL-1、84.0 μg·mL-1的系列棉酚對照溶液,按色譜條件進(jìn)樣測定。以棉酚濃度(x)為橫坐標(biāo)、色譜峰面積(y)為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,擬合得回歸方程為y=68.68x-11.419(R=0.9993)。表明棉酚濃度在0.134~84.0 μg·mL-1范圍與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

    2.3.2 精密度

    取3.36 μg·mL-1棉酚對照溶液,按色譜條件進(jìn)樣測定,連續(xù)測定6次。測得棉酚峰面積的RSD為1.59%,表明該方法精密度良好。

    2.3.3 穩(wěn)定性

    取1#棕色彩棉樣品,按1.3方法制備供試溶液,在室溫下分別放置0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h,按色譜條件進(jìn)樣測定。測得棉酚峰面積的RSD為2.81%,表明供試溶液中棉酚含量在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

    2.3.4 重復(fù)性

    取1#棕色彩棉樣品6份,按1.3方法制備供試溶液,按色譜條件分別進(jìn)樣測定。測得棉酚峰面積的RSD值為2.21%。表明該方法重復(fù)性良好。

    2.3.5 加標(biāo)回收率

    稱取0.5 g 1#棕色彩棉樣品9份,3份為一組,在每組樣品中分別加入濃度為3.36 μg·mL-1的棉酚對照溶液2 mL、3 mL、4 mL,作為棉酚低、中、高加標(biāo)樣品組,按1.3方法制備供試溶液,按色譜條件分別進(jìn)樣測定,結(jié)果如表1所示。

    由表1可知,棉酚加標(biāo)回收率在92.3%~106.1%之間,RSD在1.60%~5.52%之間。表明該方法準(zhǔn)確度較高。

    2.4 實(shí)際樣品測定

    精密稱取新疆5種棕色彩棉、4種綠色彩棉及3種白棉樣品,按1.3方法制備供試溶液,按色譜條件分別進(jìn)樣測定,結(jié)果如表2所示。

    表2 不同棉花中游離棉酚含量/(mg·kg-1,n=2)

    由表2可知,5種棕色彩棉和4種綠色彩棉中游離棉酚含量在7.9~39.7 mg·kg-1范圍內(nèi),普通白棉中游離棉酚含量在32.7~84.5 mg·kg-1范圍內(nèi),低于國標(biāo)中棉籽油中棉酚的限量(0.02%)。表明棉花中的游離棉酚不會(huì)危害消費(fèi)者的健康。

    3 結(jié)論

    采用高效液相色譜法測定新疆彩棉中游離棉酚的含量。采用Agilent SB-C18色譜柱 (4.6 mm×250 mm,5 μm),流動(dòng)相為甲醇-2%磷酸水溶液(85∶15,體積比),流速為1 mL·min-1,檢測波長為235 nm,柱溫為20 ℃,進(jìn)樣量為10 μL。結(jié)果表明,棉酚濃度在0.134~84.0 μg·mL-1范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系(R=0.9993),加標(biāo)回收率為92.3%~106.1%。9種新疆彩棉中游離棉酚含量為7.9~39.7 mg·kg-1,較白棉中游離棉酚含量低。該方法操作簡便,準(zhǔn)確度和精密度均符合要求,適用于新疆彩棉中游離棉酚含量的測定。

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