論錫林郭勒盟野生哈拉海中黃酮的提取

王智慧 張紅梅 高鴻蒙

摘要：在我國(guó)內(nèi)蒙古錫林郭勒盟地區(qū)富有大量的野生狹葉蕁麻草，在當(dāng)?shù)孛耖g稱之為哈拉海（蒙語(yǔ)），此草富含人體黃酮類化合物。為了解錫林郭勒盟此草中黃酮化合物的最佳提取條件，所以本實(shí)驗(yàn)采用不同的料液比、乙醇濃度、溫度及時(shí)間四個(gè)因素對(duì)其進(jìn)行提取比較分析，以此來(lái)確定最佳提取條件。試驗(yàn)得出最佳提取條件：料液比1：30、乙醇濃度為百分之五十、溫度為六十度、試驗(yàn)時(shí)間為五小時(shí)，在這樣的條件下統(tǒng)計(jì)出提取率到達(dá)82.5%。

關(guān)鍵詞：錫林郭勒盟；哈拉海；蕁麻草；黃酮

哈拉海是蕁麻草的蒙語(yǔ)稱法，屬于蕁麻科，是一種一年或多年生長(zhǎng)的野生草本植物。在我國(guó)大概發(fā)現(xiàn)了十六例樣本，大多數(shù)是裂葉蕁麻、寬葉蕁麻等，廣泛分布在我國(guó)的西北地區(qū)、西南地區(qū)及少量的東北、華北地區(qū)，我國(guó)富有大量的蕁麻草資源。這種植物也是民間常用的藥材，被廣泛應(yīng)用，稱之為民族藥，是我國(guó)中醫(yī)藥的一種，源遠(yuǎn)流長(zhǎng)的中醫(yī)蕁麻藥早在古典書籍《本草綱目》中有所記載，此藥富含蛋白質(zhì)、黃酮等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，對(duì)肝腎功能、消化功能具有良好的治療效果。

我國(guó)在近些年一直對(duì)蕁麻草進(jìn)行研究，許多專業(yè)技術(shù)研究者通過對(duì)蕁麻草草根的研究發(fā)現(xiàn)，蕁麻草草根富含大量黃酮、有機(jī)酸、化合物及蛋白質(zhì)等。王亞麗等相關(guān)研究者對(duì)其研究發(fā)現(xiàn)狹葉蕁麻根、莖、葉的乙醇提取物和水提取物都有抗炎消痛的作用。本實(shí)驗(yàn)對(duì)錫林郭勒盟野生哈拉海中黃酮類化合物的提取進(jìn)行研究，能夠使當(dāng)?shù)氐馁Y源得以加工利用及合理開發(fā)，從而達(dá)到一定的經(jīng)濟(jì)效益，并為醫(yī)學(xué)研究提供科學(xué)依據(jù)，也為藥物的加工業(yè)發(fā)展提供依據(jù)。

1. 材料與方法

1.1 材料、試劑與儀器

材料：錫林郭勒盟野生哈拉海。這一材料所采集的地方為錫林浩特市的附近，整體先進(jìn)行清洗，洗干凈之后做烘干工作，然后將其進(jìn)行粉碎處理。

石油醚：AR級(jí)，深圳市南山區(qū)恒泰豐化工公司；無(wú)水乙醇、95%乙醇；AR級(jí)，天津致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司。

7230G紫外分光光度計(jì)：上海青華科技儀器有限公司；RE52-AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：上海亞榮生化儀器廠。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 哈拉海黃酮類化合物的提取工藝過程

過程大致可以分為八個(gè)部分：

① 首先需要稱取適量的哈拉海粉末，重量為10.00g。

② 接著需要進(jìn)行過濾，這也是非常重要的一個(gè)環(huán)節(jié)，采用的方式為醇回流過濾。

③ 過濾之后，開始做減壓工作，使其成為濃縮的狀態(tài)。

④ 為石油醚萃取。

⑤ 醇沉。

⑥ 需要再進(jìn)行一次減壓濃縮的工作內(nèi)容。

⑦ 定容。

⑧ 對(duì)吸光度進(jìn)行檢測(cè)和評(píng)定。

1.2.2 哈拉海黃酮類化合物提取的單因素試驗(yàn)

① 不同料液比試驗(yàn)

首先，需要選擇五個(gè)相同量度的三角瓶，都是500毫升，每個(gè)瓶?jī)?nèi)都加入相同量度的哈拉海粉末，為10.00g，其次，分別加入50%乙醇，加入乙醇的量度是不同的，分別是100mL、200mL、300mL、400mL、500mL，經(jīng)過五個(gè)小時(shí)之后，最后做檢測(cè)工作，對(duì)吸光度進(jìn)行評(píng)定。

② 不同乙醇濃度試驗(yàn)

首先，需要選擇五個(gè)相同量度的三角瓶，都是500毫升，每個(gè)瓶?jī)?nèi)都加入相同量度的哈拉海粉末，為10.00g，其次，分別加入300毫升乙醇，加入乙醇的濃度是不同的，分別是0、20%、40%、60%、80%，經(jīng)過五個(gè)小時(shí)之后，最后做檢測(cè)工作，對(duì)吸光度進(jìn)行評(píng)定。

③ 不同浸提溫度試驗(yàn)

首先，需要選擇六個(gè)相同量度的三角瓶，都是500毫升，每個(gè)瓶?jī)?nèi)都加入相同量度的哈拉海粉末，為10.00g，其次，分別加入300毫升乙醇，放在溫度不同的水浴中，分別是30、40、50、60、70、80攝氏度，經(jīng)過五個(gè)小時(shí)之后，最后做檢測(cè)工作，對(duì)吸光度進(jìn)行評(píng)定。

④ 不同浸提時(shí)間試驗(yàn)

首先，需要選擇六個(gè)相同量度的三角瓶，都是500毫升，每個(gè)瓶?jī)?nèi)都加入相同量度的哈拉海粉末，為10.00g，其次，分別加入300毫升乙醇，濃度為50%，放在溫度為五十?dāng)z氏度的水浴中，經(jīng)過的時(shí)間是不同的，分別是1、2、3、4、5、6小時(shí)，達(dá)到相應(yīng)的時(shí)間之后，最后做檢測(cè)工作，對(duì)吸光度進(jìn)行評(píng)定。

2. 結(jié)果與分析

2.1 不同料液比對(duì)提取的影響

料液比和黃酮類化合物含量之間出現(xiàn)了先上升后下降的狀況，在料液比1∶40的時(shí)候達(dá)到最高。超過此值則又下降。經(jīng)過考慮提取結(jié)果及能耗，研究最佳比值為1∶30。

2.2 不同乙醇濃度對(duì)提取的影響

乙醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)和黃酮類化合物吸光度變化達(dá)拋物線型變化，乙醇為50%的時(shí)候吸光度的數(shù)值達(dá)到最高。所以選取乙醇濃度50%的數(shù)值分?jǐn)?shù)為最佳。

2.3 不同浸提溫度對(duì)提取的影響

黃酮類化合物提取量隨著溫度的變化，也會(huì)有相應(yīng)的變化，溫度越高，提取量也會(huì)升高，但是在六十?dāng)z氏度以上時(shí)，開始呈現(xiàn)降低的趨勢(shì)。

2.4不同浸提時(shí)間對(duì)提取的影響

浸提時(shí)間與黃酮類化合物得率的狀態(tài)也是先上升后下降，當(dāng)時(shí)間超過六個(gè)小時(shí)后，呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)。

2.5正交試驗(yàn)確定最佳提取條件

在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上采用L9（34）正交試驗(yàn)表優(yōu)化提取條件。

3. 結(jié)論

通過試驗(yàn)得出結(jié)論：選用乙醇溶液來(lái)提取錫林郭勒盟野生哈拉海中黃酮類化合物的影響因素主要有料液比、乙醇濃度、提取溫度及時(shí)間。由正交試驗(yàn)確定提取工藝的最佳條件為A2B2C3D3，就是乙醇濃度50%、提取時(shí)間為五小時(shí)、溫度為六十度、料液比1：30，所測(cè)出的一級(jí)提取率為82.5%。

項(xiàng)目基金：

錫林郭勒職業(yè)學(xué)院“錫盟地區(qū)哈拉海營(yíng)養(yǎng)成分分析及其食用潛力開發(fā)初探”項(xiàng)目基金資助（YB-2019-02）

作者簡(jiǎn)介：

王智慧（1982-），女，內(nèi)蒙古通遼人，全日制碩士研究生，教師，主要從事食品及生物方面研究工作。