5種高檢出農(nóng)藥在柑橘中殘留的氣相色譜分析方法研究

韋菲 吳常智 龍秋均 銀霞潔

摘要?[目的]了解毒死蜱、丙溴磷、三唑磷、聯(lián)苯菊酯和氯氟氰菊酯5種高檢出農(nóng)藥在融水苗族自治縣柑橘類水果中殘留情況及其檢測(cè)方法的建立。[方法]以柑橘和糯米柚果皮、果肉的勻漿基質(zhì)為樣品，采用氣相色譜法（GC）進(jìn)行分析。[結(jié)果]5種高檢出農(nóng)藥在0.02～0.50 mg/kg時(shí)線性良好，其平均回收率為90%～111%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）均小于6%，5種農(nóng)藥的最低檢出限為0.005～0.008 mg/kg。[結(jié)論]該方法具有高精確度和準(zhǔn)確度，可滿足融水苗族自治縣柑橘類水果農(nóng)藥殘留檢測(cè)的要求。

關(guān)鍵詞?柑橘;糯米柚;氣相色譜法;農(nóng)藥殘留

中圖分類號(hào)?TS?207.5+3文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼?A

文章編號(hào)?0517-6611（2020）17-0210-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2020.17.054

開(kāi)放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）：

Study on Analytical Method of Five High Frequency Detection Pesticides in Citrus Fruit with Gas Chromatography

WEI Fei1， WU Chang?zhi2， LONG Qiu?jun3 et al

（1.Agricultural Technology Extension Center of Rongshui Miao Autonomous County， Rongshui， Guangxi 545300;2.Agricultural Products Quality Security Checking Center of Rongshui Miao Autonomous County， Rongshui， Guangxi 545300;3.Agricultural Technology Extension Station of Baiyun Township， Rongshui， Guangxi 545314）

Abstract?[Objective]To know the residues of chlorpyrifos， profenofos， triazophos， bifenthrin， cyhalothrin in citrus fruits and establish a method for determination of these five high frequency detection pesticides in Rongshui Miao Autonomous County.[Method]The homogenized matrix of peel and pulp of citrus and glutinous rice pomelo was used as a sample， and analyzed by gas chromatography （GC）.[Result]The five highly detected pesticides showed good linearity at 0.02-0.50 mg/kg， the average recovery range was 90%-111%， the relative standard deviation （RSD） was less than 6%， and the minimum detection limit of the five pesticides was 0.005-0.008 mg/kg.[Conclusion]The method has high precision and accuracy， and can meet the requirements of citrus fruit pesticide residue detection in Rongshui Miao Autonomous County.

Key words?Citrus;Glutinous rice pomelo;Gas chromatography;Pesticide residue

廣西是全國(guó)9個(gè)柑橘類水果的主產(chǎn)區(qū)之一，而融水苗族自治縣因其山區(qū)氣候特征比較明顯，適宜柑橘、柚子的種植。其中融水糯米柚為該縣特產(chǎn)、中國(guó)國(guó)家地理標(biāo)志產(chǎn)品，因其果肉呈米黃色，似蒸熟的糯米飯晶瑩剔透般色澤，柔嫩果汁量多清甜、有濃郁香氣而聞名。柑橘類水果在生產(chǎn)過(guò)程中需要使用多種化學(xué)農(nóng)藥防治病蟲(chóng)害。農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室（ 南寧） 在2017—2018年開(kāi)展的柑橘質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)隱患摸底排查與關(guān)鍵控制點(diǎn)評(píng)估中發(fā)現(xiàn)，廣西柑橘類水果在生產(chǎn)中使用率以及果實(shí)殘留量較高的5種有機(jī)磷農(nóng)藥為毒死蜱、丙溴磷、三唑磷、聯(lián)苯菊酯和氯氟氰菊酯[1]。關(guān)于毒死蜱、丙溴磷、三唑磷、聯(lián)苯菊酯和氯氟氰菊酯在水果中的農(nóng)藥殘留測(cè)定方法方面的相關(guān)文獻(xiàn)已有報(bào)道[2-9]。而關(guān)于采用氣相色譜法針對(duì)性地對(duì)毒死蜱、丙溴磷、三唑磷、聯(lián)苯菊酯和氯氟氰菊酯在柑橘類水果上殘留的檢測(cè)的相關(guān)文獻(xiàn)較少。因此，該研究采用氣相色譜法對(duì)毒死蜱、丙溴磷、三唑磷、聯(lián)苯菊酯和氯氟氰菊酯在柑橘、糯米柚中的殘留進(jìn)行檢測(cè)，為柑橘類水果農(nóng)藥殘留檢測(cè)提供有效方法，實(shí)現(xiàn)安全監(jiān)管，確保融水苗族自治縣廣大人民群眾的農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全。

1?材料與方法

1.1?儀器及設(shè)備

GC2010 Plus型氣相色譜儀（日本島津公司），配備電子捕獲檢測(cè)器（ECD）和火焰光度檢測(cè)器（FPD磷濾光片）;T18高速勻質(zhì)機(jī)（德國(guó)IKA公司）;氮吹儀（美國(guó)Organomation公司）;小型渦旋勻質(zhì)機(jī)（德國(guó)IKA公司）;電子天平，日本島津公司，0.001 g;固相萃取裝置，得泰儀器，QSE- 12。毛細(xì)管色譜柱，DB-17，30 m×0.25 mm×0.25 μm，Agilent（安捷倫）。

1.2?試材?乙腈、正己烷、丙酮，HPLC級(jí)，成都市科隆化學(xué)品有限公司;氯化鈉，分析純，西隴化工股份有限公司。標(biāo)準(zhǔn)品：毒死蜱、丙溴磷、三唑磷、聯(lián)苯菊酯、氯氟氰菊酯濃度均為100 μg/mL，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研檢測(cè)所。弗羅里矽柱，容量為0.5 g/6 mL，Agela（艾杰爾）。

1.3?試驗(yàn)方法

1.3.1?樣品制備。

按GB/T 885抽取新鮮的柑橘和糯米柚樣品，果皮和果肉分開(kāi)，經(jīng)縮分后，切碎并混勻，用食品料理機(jī)打成勻漿，置于放入分裝容器中，于-20～-16 ℃條件下保存，備用。

1.3.2?樣品提取和凈化。

樣品提取和凈化參照NY/T 761—2008[10]。提取：稱取25.0 g樣品，加入50 mL乙腈，高速勻質(zhì)器勻質(zhì)2 min后過(guò)濾，濾液轉(zhuǎn)至裝有6 g NaCl的具塞量筒中振搖1 min，靜置25 min后，吸取上層提取液10 mL，于70 ℃氮吹儀上吹至近干。

有機(jī)磷凈化：將吹至近干的樣品加入2 mL丙酮，然后用丙酮定容至5.0 mL，過(guò)45 μm有機(jī)濾膜后轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣瓶，待測(cè)。

有機(jī)氯和擬除蟲(chóng)菊酯類農(nóng)藥凈化：將吹至近干的樣品加入2 mL正己烷，取弗羅里硒柱，先后用5 mL正己烷+丙酮（9∶1，V/V）混合液、5 mL正己烷預(yù)淋洗活化固相萃取柱，收集洗脫液，用5 mL正己烷+丙酮（9∶1，V/V）混合液重復(fù)2次淋洗弗羅里硒柱。將收集的淋洗液置于50 ℃氮吹儀上吹至近干，正己烷定容至5.0 mL，混勻并裝瓶，待測(cè)。

1.4?色譜分析條件

1.4.1?有機(jī)磷色譜分析條件。FPD檢測(cè)器溫度250 ℃;柱溫：采用程序升溫，初始溫度150 ℃，保持2 min，以8 ℃/min升至250 ℃，保持12 min。進(jìn)樣口溫度220 ℃，載氣為N2，總流量33.3 mL/min，H2：62.5 mL/min，空氣：90.0 mL/min;吹掃流量3.0 mL/min;進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣。

1.4.2?有機(jī)氯和擬除蟲(chóng)菊酯類分析條件。ECD檢測(cè)器溫度：320 ℃;柱溫：采用程序升溫，初始溫度150 ℃，保持2 min，以6 ℃/min升至270 ℃，保持8 min。進(jìn)樣口溫度：200 ℃;進(jìn)樣方式：分流進(jìn)樣，分流比：10∶1;載氣：N2;尾吹氣流量：30.0 mL/min。

2?結(jié)果與分析

2.1?柑橘與糯米柚農(nóng)藥殘留種類檢出情況?從融水縣2018—2019年抽檢25批次柑橘和25批次糯米柚的農(nóng)藥殘留檢出情況（表1）可以看出，抽檢的25批次柑橘，柑橘果皮的農(nóng)藥殘留高于柑橘果肉;抽檢的25批次糯米柚，糯米柚果皮中農(nóng)藥殘留為20%，糯米柚果肉中未檢出。

從柑橘類和糯米柚農(nóng)藥殘留種類檢出率情況（圖1）可以看出，在抽檢的25批次柑橘中，柑橘果肉和果皮中共檢出農(nóng)藥殘留3種，其中丙溴磷的檢出率最高;丙溴磷在柑橘果肉殘留超標(biāo)，超標(biāo)率為4%;丙溴磷和三唑磷在柑橘果皮中均有超標(biāo)，超標(biāo)率分別為12%和4%。在抽檢的25批次糯米柚中，糯米柚果肉未檢出農(nóng)藥殘留;糯米柚果皮中共檢出3種農(nóng)藥殘留，其中氯氟氰菊酯和聯(lián)苯菊酯在糯米柚果皮中均有超標(biāo)，超標(biāo)率均為8%。

2.2?線性方程及檢出限

以濃度為0.02、0.05、0.10、0.20、0.50 mg/kg的標(biāo)準(zhǔn)溶液繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，采用外標(biāo)法定量，以3倍信噪比（S/N）計(jì)算檢出限。經(jīng)分析（表2），毒死蜱、三唑磷、丙溴磷、聯(lián)苯菊酯和氯氟氰菊酯的檢出限分別為0.008、0.006、0.005、0.006、0.005 mg/kg。在0.02～0.50 mg/kg范圍內(nèi)，毒死蜱、丙溴磷、三唑磷、聯(lián)苯菊酯和氯氟氰菊酯在柑橘或糯米柚基質(zhì)下無(wú)明顯的基質(zhì)效應(yīng)，5種農(nóng)藥的質(zhì)量濃度與峰面積存在顯著的正相關(guān)，有良好的線性關(guān)系。

2.3?回收率和精密度

稱取空白柑橘和糯米柚樣品25 g，分別加入濃度為0.05、0.10、0.20 mg/kg的5種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)混合溶液進(jìn)行加標(biāo)試驗(yàn)，按“1.3.2”的前處理?xiàng)l件進(jìn)行樣品制備，按“1.4”色譜條件進(jìn)樣分析，得低、中、高3個(gè)濃度點(diǎn)的加標(biāo)回收率，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3、4。

從表3可以看出，柑橘果肉和果皮中毒死蜱的平均回收率分別為90.33%～96.21%、

90.28%～110.12%，三唑磷的平均回收率分別為91.32%～105.45%、91.97%～95.65%，丙溴磷的平均回收率分別為90.60%～106.72%、90.22%～9328%。對(duì)同一質(zhì)量濃度的回收率試驗(yàn)進(jìn)行了4次重復(fù)，求得柑橘果肉和果皮樣品中的毒死蜱、三唑磷、丙溴磷農(nóng)藥殘留量的變異系數(shù)為1.97～5.11。

從表4可以看出，糯米柚果肉和果皮中毒死蜱的平均回收率分別為90.08%～93.15%、95.32%～110.26%，聯(lián)苯菊酯的平均回收率分別為90.65%～105.08%、96.85%～108.00%，氯氟氰菊酯的平均回收率分別為93.63%～110.24%、92.46%～97.35%。對(duì)同一質(zhì)量濃度的回收率試驗(yàn)進(jìn)行了4次重復(fù)，求得糯米柚果肉和果皮樣品中的毒死蜱、聯(lián)苯菊酯和氯氟氰菊酯農(nóng)藥殘留量的變異系數(shù)為1.90～5.58，符合農(nóng)藥殘留分析允許的公差范圍。表3和表4表明，試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確度和精密度均符合農(nóng)藥殘留分析的要求[11]。

3?結(jié)論

利用固相萃取方法，采用氣相色譜儀檢測(cè)分析柑橘和糯米柚中毒死蜱、三唑磷、丙溴磷、聯(lián)苯菊酯和氯氟氰菊酯5種高檢出農(nóng)藥的殘留。試驗(yàn)結(jié)果表明，毒死蜱、三唑磷、丙溴磷、聯(lián)苯菊酯和氯氟氰菊酯5種農(nóng)藥在0.02～0.50 mg/kg時(shí)線性關(guān)系良好，5種農(nóng)殘平均回收率均在90%～111%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均6%以下，樣品的加標(biāo)回收、精密度、線性等均滿足柑橘類農(nóng)藥殘留分析方法的要求。農(nóng)藥殘留大多集中于柑橘類果實(shí)的果皮，而融水苗族自治縣少數(shù)民族自古以來(lái)就有用皮作為香料或糯米柚皮作為食材，因此對(duì)柑橘類水果的監(jiān)管具有十分重要的意義。

參考文獻(xiàn)

[1] 吳靜娜，楊秀娟，韋璐陽(yáng)，等. 覆膜栽培方式下毒死蜱、丙溴磷和三唑磷在金桔和土壤中的消解動(dòng)態(tài)[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)， 2018，31（9）：1845-1850.

[2] 胡艷，劉健，向莉，等. 一種利用GC-FPD測(cè)定柑橘中的5種有機(jī)磷農(nóng)藥方法的建立[J]. 廣州化工，2018，46（12）：89-91.

[3] 林澤鵬，湯遜尤，潘燦盛，等. 氣相色譜法測(cè)定蔬菜水果及茶葉中毒死蜱的殘留量[J]. 理化檢驗(yàn)（化學(xué)分期），2019，55（3）：361-363.

[4] 夏潔貞.氣相色譜法測(cè)定水果中多種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析[J].食品安全導(dǎo)刊，2019（9）：70-71，73.

[5] 李恒，毛林夏，李昱賢，等.氣相色譜法測(cè)定水果中多種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留分析[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2019，47（3）：193-195.

[6] 張福金，劉建平，馮小慧，等.氣相色譜法檢測(cè)蔬菜和水果多組分農(nóng)藥殘留中若干問(wèn)題的研究[J].內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)科技，2006（3）：31-32.

[7] 郭愛(ài)華，李曄，李建紅，等.氣相色譜法測(cè)定水果中14種有機(jī)氯及擬除蟲(chóng)菊酯類農(nóng)藥殘留[J].中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué)，2017，17（1）：50-54.

[8] 閆君，趙波，丁輝，等.食品安全指數(shù)法評(píng)估蘭州市柑橘類水果農(nóng)藥殘留的風(fēng)險(xiǎn)[J].農(nóng)業(yè)科技與信息，2019（10）：66-68.

[9] 黃偉， 劉天潔， 廖青. 毛細(xì)管柱氣相色譜法同時(shí)測(cè)定蔬菜和水果中16種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量方法的建立與應(yīng)用[J]. 職業(yè)衛(wèi)生與傷病，2019，34（4）：224-229.

[10] 中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部. 蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲(chóng)菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測(cè)定：NY/T 761—2008[S]. 北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2008.

[11] 中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部. 農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則：NY/T 788—2004[S]. 北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2004.