HPLC-MS/MS法同時測定水中聯(lián)苯肼酯和乙螨唑殘留量

魏杰 謝源 楊浪 黃玉貴 廖朝選

摘 要：為了快速而準確地測定水中聯(lián)苯肼酯和乙螨唑殘留量，以甲醇-0.1%甲酸水溶液（V/V=90︰10）為流動相，使用Eclipse Plus-C18柱和AJS-ESI離子源，建立了同時測定兩種農(nóng)藥的痕量分析方法。在聯(lián)苯肼酯（3.0～150.0μg/L）和乙螨唑（1.0～50.0μg/L）范圍內(nèi)，濃度與峰面積具有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)分別為0.9999、0.9997，檢出限分別為7.9×10-5、1.2×10-5mg/L，定量限為2.6×10-4、3.9×10-5 mg/L。通過加標回收試驗，方法的回收率分別為聯(lián)苯肼酯98.67%～103.33%、乙螨唑97.50%～104.40%。因此得出結(jié)論，該方法簡單、快速、準確，可有效分析水中聯(lián)苯肼酯和乙螨唑的含量。

關(guān)鍵詞：液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法? 聯(lián)苯肼酯? 乙螨唑? 殘留

聯(lián)苯肼酯（bifenazate）和乙螨唑（etoxazole）分別屬于聯(lián)苯肼類及2，4-二苯基噁唑衍生物類選擇性殺螨[1-2]，對螨類均有優(yōu)異的活性，常被混配或搭配輪換應(yīng)用于柑橘全爪螨等害螨的防治[3-4]。由于兩種農(nóng)藥在田間的大量應(yīng)用，經(jīng)雨水沖刷、土壤淋溶等進入水體，可能造成殘留風險。因此，建立同時測定兩種農(nóng)藥的檢測方法十分必要。當前，對于兩種農(nóng)藥的檢測分析，已有高效液相色譜法的相關(guān)研究報道[2，5]，但由于其在水中的殘留量較低，導(dǎo)致該方法無法滿足快速或痕量檢測的要求。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法是農(nóng)藥痕量分析的主要方法，張月等、王蒙岑等[1，6]分別使用相關(guān)方法對木瓜中聯(lián)苯肼酯和柑橘與土壤中乙螨唑的殘留量進行分析。針對聯(lián)苯肼酯和乙螨唑的同時分析，潘靜等[7]建立了40%聯(lián)苯肼酯·乙螨唑懸浮劑的高效液相色譜分析方法。但是，并未見到采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時分析兩種農(nóng)藥在水中殘留的相關(guān)報道。農(nóng)藥進入水體可能產(chǎn)生水生態(tài)暴露風險，該風險程度與殘留量有關(guān)。因此，本試驗以甲醇-0.1%甲酸水溶液（V/V=90︰10）為流動相所建立的快速、簡單、準確的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法可用于兩種農(nóng)藥在水中的殘留分析。

1 試驗部分

1.1 儀器與試材

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀：Agilent 1290-6470A，美國安捷倫科技有限公司;色譜柱：Eclipse Plus-C18 50×2.1mm，1.8?m;電子天平：XSE105DU，梅特勒-托利多儀器（中國）有限公司，0.0001g;離心機：LD5-10低速離心機。

聯(lián)苯肼酯標準品：質(zhì)量分數(shù)ω=97.5%，Dr.Ehrenstorfer;乙螨唑標準品：質(zhì)量分數(shù)ω=99%，Dr.Ehrenstorfer;甲醇：色譜純，默克股份有限公司;甲酸：HPLC級，天津市科密歐化學試劑有限公司;去離子水：經(jīng)美國Milli-Q純水機制備，電阻率為18.2MΩ/cm。

1.2 實驗方法

1.2.1 標準溶液的制備

稱取0.0103g聯(lián)苯肼酯標準品和0.0102g乙螨唑標準品置于稱量瓶中，用甲醇少量多次溶解后，將其分別定量轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中，定容至刻度線，搖勻后得到100.4mg/L（聯(lián)苯肼酯）和101.0mg/L（乙螨唑）的標準儲備液。然后，分別量取3.0mL聯(lián)苯肼酯標準儲備液和1.0mL乙螨唑標準儲備液置于100mL容量瓶中，用甲醇稀釋為聯(lián)苯肼酯和乙螨唑分別為3.0、1.0mg/L的混合標準儲備液。之后，吸取不同體積的混合標準儲備液，用甲醇依次制備聯(lián)苯肼酯濃度為3.0、6.0、15.0、30.0、75.0、150.0μg/L，乙螨唑濃度為1.0、2.0、5.0、10.0、25.0、50.0μg/L的混合標準溶液，待測。

1.2.2 加標樣液制備

以曝氣生態(tài)水為基質(zhì)，分別向其中添加混合標準溶液，制備得到聯(lián)苯肼酯（乙螨唑）濃度為3.0（1.0）、15.0（5.0）μg/L的加標樣液。取加標樣液10mL，以4000r/min離心5min后經(jīng)0.25μm濾膜過濾，待測。

1.2.3 儀器操作條件

1.2.3.1 HPLC操作條件

進樣體積：2μL;流速：0.3mL/min;柱溫：25℃;保留時間：聯(lián)苯肼酯0.56min、乙螨唑1.01min。

1.2.3.2 MSD操作條件

離子源：AJSESI源，正離子模式;離子源參數(shù)：干燥氣，N2;干燥氣溫度，250℃;干燥氣流速，5L/min;鞘氣：N2;鞘氣溫度：250℃;鞘氣流速：11L/min;霧化器壓力（Nebulizer）：45psi;噴嘴電壓：500V;毛細管電壓（Capillary）：3500V。監(jiān)測模式：MRM，MRM離子采集參數(shù)如表1所示。

1.3 樣品測定

在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定，且相鄰2次標樣溶液的峰面積相對變化<1.5%后對樣品進行測定。

2 結(jié)果與討論

2.1 方法選擇性

將空白基質(zhì)樣品、混合標準溶液（聯(lián)苯肼酯3.0μg/L、乙螨唑1.0μg/L）分別進行測定分析，在儀器最高靈敏度下空白樣品無可見干擾;聯(lián)苯肼酯和乙螨唑可實現(xiàn)同時監(jiān)測，標準樣品的保留時間分別為0.56、1.01min，通過提取特征離子后，無互相干擾現(xiàn)象。兩種農(nóng)藥的標準樣品色譜圖見圖1。

2.2 線性相關(guān)性與檢出限、定量限

將制備的系列標準溶液在設(shè)定的分析方法下進行測定，以聯(lián)苯肼酯或乙螨唑的質(zhì)量濃度為橫坐標（x），響應(yīng)的峰面積為縱坐標（y）進行線性擬合，得到聯(lián)苯肼酯和乙螨唑的標準曲線（見圖2）。結(jié)果表明，兩種農(nóng)藥在一定質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，即聯(lián)苯肼酯3.0～150.0μg/L、乙螨唑1.0～150.0μg/L具有良好的線性關(guān)系?；貧w方程為聯(lián)苯肼酯y=-37.9573+57.7016x，r2=0.9999;乙螨唑y=397.562x+204.957，r2=0.9997。通過信/噪比（S/N）=3，確定聯(lián)苯肼酯和乙螨唑的檢出限為7.9×10-5、1.2×10-5mg/L;通過信/噪比（S/N）=10，確定聯(lián)苯肼酯和乙螨唑的定量限為2.6×10-4、3.9×10-5mg/L。聯(lián)苯肼酯和乙螨唑的標準曲線見圖2。

2.3 方法的回收率

取水樣加標樣品分別按上述色譜操作條件進行測定，計算回收率，確定方法的準確度，結(jié)果見表2。當聯(lián)苯肼酯的添加濃度為3.0μg或15.0μg時，回收率在98.67%～103.33%，平均回收率為101.56%，變異系數(shù)為1.78%;當乙螨唑的添加濃度為1.0μg或5.0μg時，回收率在97.50%～104.40%，平均回收率為100.28%，變異系數(shù)為2.65%。由此可知，該方法準確度良好。

3 結(jié)論

本文使用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜建立了同時測定聯(lián)苯肼酯和乙螨唑的分析方法。在甲醇-0.1%甲酸水溶液（V/V=90︰10）作為流動相下，聯(lián)苯肼酯、乙螨唑分別在3.0～150.0μg/L和1.0～50.0μg/L范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，說明該方法的準確度良好，操作簡單、快速，可同時分析水中聯(lián)苯肼酯和乙螨唑的殘留量。

參考文獻：

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