血清CYFRA21-1和EBV相關(guān)抗體聯(lián)合檢測對鼻咽癌的診斷價值

鄭江

（常德市第一人民醫(yī)院腫瘤科，湖南 常德 415000）

鼻咽癌是好發(fā)于鼻咽腔頂部和側(cè)壁的一種惡性腫瘤，在人群中發(fā)病率常年居高不下，已經(jīng)成為了耳鼻咽喉部位的第一高發(fā)腫瘤[1]。鼻咽癌臨床主要表現(xiàn)為聽力下降、頭痛、耳悶堵感和鼻塞等，鼻咽癌對放射線的敏感較高，因此放射治療是治療鼻咽癌的首選方法[2]。但是鼻咽癌的診斷難度較大，目前臨床主要使用影像學(xué)檢查、鼻咽局部檢查、病理活檢或者細胞涂片等方法，不利于早期確診，以及早期開展放射治療[3-4]。

近年來，針對鼻咽癌腫瘤標志物的篩選和檢測的報道越來越多，其中血清細胞角蛋白19片段（Cytokeratin-19-fragment，CYFRA21-1）和EB病毒殼抗原免疫球蛋白A抗體（Epstein-barr viral capsid antigen immunoglobulin A，EB-VCA-IgA）受到的關(guān)注較多。CYFRA21-1由細胞角蛋白19片段的兩個單克隆抗體組成，主要分布于單層和復(fù)層上皮腫瘤細胞的胞漿內(nèi)，當(dāng)細胞死亡時，它以溶解片段的形式釋放入血清中，血中CYFRA21-1水平顯著升高提示腫瘤的晚期或預(yù)后差[5]，EB-VCA-IgA檢測則可用于鼻咽癌的刪查和早期發(fā)現(xiàn)。本研究探討血清CYFRA21-1和EBV相關(guān)抗體聯(lián)合檢測對鼻咽癌的診斷效果，現(xiàn)報道如下。

1 臨床資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年5月至2018年6月期間常德市第一人民醫(yī)院收治的27例符合鼻咽癌診斷標準且經(jīng)病理證實的鼻咽癌患者為研究對象，設(shè)為研究組，排除合并其他良惡性腫瘤者、嚴重肝腎功能不全者、嚴重心腦血管系統(tǒng)疾病、自身免系統(tǒng)疾病者以及血液系統(tǒng)疾病者。同時選取同期在我院進行健康體檢的27例健康者為對照組。

研究組患者中男性16例、女性11例，年齡36~54歲，平均年齡40.9±2.4歲，體重52~73 kg，平均體重55.2±5.6 kg，臨床分期[6]：I期4例、II期9例、III期11例、IV期3例，病理分型：低分化15例、高分化12例。

對照組患者中男性17例、女性11例，年齡35~55歲，平均年齡40.6±2.3歲，體重51~72 kg，平均體重55.1±5.4 kg。兩組性別、年齡、體重等基本資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 標本獲取

取晨起空腹血5 ml，于EDTA抗凝管中，以3000 rpm·min-1高速離心10 min后分離保留血清，轉(zhuǎn)移至無菌的EP管中，于超低溫冰箱中-20℃環(huán)境下保存。

1.2.2 CYFRA21-1和EB-VCA-IgA測定

CYFRA21-1測定采用電化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)，儀器為德國Rachr公司生產(chǎn)的電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（型號：Eiecsys2010），配套檢測試劑盒由儀器廠家提供。EB-VCA-IgA測定采用免疫酶法，試劑盒由北京生物制品研究所有限責(zé)任公司提供，測定前先將待測血清用pH7.4的PBS緩沖液稀釋10-80倍。二者的測定均嚴格按照儀器和試劑盒使用說明書標明的操作方法進行。

比較兩組CYFRA21-1測定值和陽性率，EB-VCA-IgA滴度測量值和陽性率。計算CYFRA21-1和EB-VCA-IgA單獨檢測以及聯(lián)合檢測的敏感性和特異性。陽性標準[5]：CYFRA21-1測量值≥ 3.36μg·L-1，EB-VCA-IgA滴度≥1：10。敏感性=真陽性例數(shù)/（真陽性例數(shù)+假陰性例數(shù)）×100%，特異性=真陰性例數(shù)/（真陰性例數(shù)+假陽性例數(shù)）×100%。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 CYFRA21-1和EB-VCA-IgA測定結(jié)果比較

表1結(jié)果顯示，研究組EB-VCA-IgA測量值和陽性率以及滴度測量值和陽性率均高于對照組，具有統(tǒng)計學(xué)差別（P＜0.05）。

2.2 CYFRA21-1和EB-VCA-IgA單獨測定和聯(lián)合測定效果比較

CYFRA21-1和EB-VCA-IgA聯(lián)合測定的敏感性和特異性為98.3%和95.6%，高于CYFRA21-1單獨測定（48.1%和76.5%）以及EB-VCA-IgA單獨測定（77.3%和69.6%），見表2。

表1 兩組CYFRA21-1和EB-VCA-IgA測定結(jié)果比較（n=27）

表2 血清CYFRA21-1和EB-VCA-IgA檢測對鼻咽癌的診斷效能（%）

3 討論

早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療是診治鼻咽癌的關(guān)鍵所在。文獻報道顯示早期鼻咽癌患者5年生存率可達95%，而晚期患者卻低于70%[7]。但目前鼻咽癌的早期診斷仍然是臨床面臨的一個挑戰(zhàn)，一方面鼻咽癌早期癥狀不明顯，容易誤診、漏診，另一方面現(xiàn)有的診斷方法靈敏度和特異性不高。因此，尋找簡易、快速、有效的診斷方法對于鼻咽癌的早期診斷意義重大。通過實驗室檢查方法對癌癥相關(guān)的腫瘤標志物水平進行測定，是診斷腫瘤疾病的常用方法。

CYFRA21-1主要以的寡聚物形式存在于人體的正常組織表面和鱗狀上皮中，當(dāng)細胞未癌變時其含量極低，當(dāng)細胞出現(xiàn)癌變時，細胞降解速度加快，大量的細胞角質(zhì)蛋白隨細胞降解而進入血液中，因此CYFRA21-1水平異常升高。絕大多數(shù)的鼻咽癌起源于鼻咽部的被覆鱗狀上皮，因此檢測CYFRA21-1在血液中的表達水平，在一定程度上可以診斷鼻咽癌。本研究結(jié)果也顯示，相比于健康者鼻咽癌患者血清CYFRA21-1水平異常升高，陽性檢出率更高。與此同時，研究顯示起源于上皮的腫瘤都可能使CYFRA21-1升高，因此單獨使用CYFRA21-1血清檢測來診斷鼻咽癌容易造成誤診，診斷的特異性不高[8-9]。我們的結(jié)果也顯示CYFRA21-1單獨檢測診斷鼻咽癌的敏感性和特異性僅為48.1%和76.5%。

鼻咽癌的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后與EB病毒感染具有密切聯(lián)系，采用血清學(xué)方法檢測EB病毒的特異性抗體是發(fā)現(xiàn)和診斷鼻咽癌的方法之一。研究顯示，超過90%的鼻咽癌患者EBV檢測呈陽性，且腫瘤分期越晚，EBV滴度越高[10]，本研究結(jié)果與之類似。目前臨床已經(jīng)將EB-VCA-IgA滴度檢測作為診斷鼻咽癌的特異性方法，我們的研究結(jié)果顯示EB-VCA-IgA單獨檢測對鼻咽癌的診斷敏感性為77.3%，特異性為69.6%。分析原因，可能是因為EB-VCA-IgA的檢測采用免疫酶法，該方法中使用的辣根過氧化物酶在正常環(huán)境中已被空氣中的氧氣氧化，如果患者存在上呼吸道癥狀，則容易出現(xiàn)假陽性結(jié)果，導(dǎo)致診斷的特異性降低。

聯(lián)合CYFRA21-1和EB-VCA-IgA這兩種血清標志物診斷鼻咽癌，本研究結(jié)果顯示診斷的敏感性和特異性可達98.3%和95.6%，遠高于二者單獨檢測。從檢測的便利性和經(jīng)濟性方面來講，增加檢測項目會增加診斷的時間和患者的經(jīng)濟負擔(dān)，但也會給患者帶來受益?？偟恼l來，采用CYFRA21-1和EB-VCA-IgA作為輔助檢查檢測鼻咽癌，診斷敏感性和特異性均明顯升高，可有效幫助臨床提高對鼻咽癌的診斷效能。