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    脂肽類生物表面活性劑研究概況

    2020-09-10 06:31:30蔡京榮呂佳佳
    中國洗滌用品工業(yè) 2020年8期
    關(guān)鍵詞:脂肽活性劑脂肪酸

    蔡京榮 呂佳佳

    (陽煤豐喜泉稷能源有限公司,山西運(yùn)城,043200)

    脂肽類生物表面活性劑是由Aaima等于1968年首次在枯草芽孢桿菌的代謝物中發(fā)現(xiàn)[1]。隨后人們對(duì)脂肽展開了廣泛研究,脂肽類物質(zhì)通常為混合物,其化學(xué)機(jī)構(gòu)中包含非極性疏水基和極性親水基,二者以化學(xué)鍵連接,結(jié)構(gòu)不對(duì)稱,具有較強(qiáng)的極性,水油兩親,可大幅降低表面和界面張力[2],隨著研究深入,人們發(fā)現(xiàn)脂肽還具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤、殺蟲等多種生物功能[3],在食品工業(yè)、石油工業(yè)、農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。

    由于分離純化難度大、生產(chǎn)成本高等因素的制約,絕大多數(shù)脂肽尚處于實(shí)驗(yàn)室研究階段,目前的主要研究集中在化學(xué)結(jié)構(gòu)的鑒定方面。因此,挖掘新型高效的脂肽類物質(zhì),使其充分發(fā)揮其多元化的功能,具有重要的科學(xué)意義和實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

    國際上對(duì)脂肽有關(guān)理論和應(yīng)用的研究已開展多年,國內(nèi)有關(guān)研究整體上仍處于起步階段,本文從化學(xué)結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)、分離和純化、主要應(yīng)用、研究現(xiàn)狀等方面對(duì)脂肽的研究概況作出綜述,以期為相關(guān)研究提供借鑒。

    1 脂肽的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)

    1.1 化學(xué)結(jié)構(gòu)

    脂肽類生物表面活性劑(LBS)一般經(jīng)過兩個(gè)步驟生成,首先由非核糖體肽合成酶直接識(shí)別、縮合氨基酸而形成親水性肽鏈,然后生成的肽鏈與疏水性脂肪酸鏈連接為脂肽。由于肽鏈和脂肪酸種類繁多,結(jié)構(gòu)復(fù)雜,所以脂肽的種類和結(jié)構(gòu)具有豐富的多樣性。目前,多數(shù)報(bào)道的脂肽以環(huán)狀和線性兩種結(jié)構(gòu)為主[4]。

    1.1.1 環(huán)狀脂肽

    根據(jù)脂肪酸鏈與肽鏈的成環(huán)、接環(huán)以及離環(huán)的連接方式可將環(huán)脂肽分為3種類型。其中,脂肪酸的羥基或氨基與肽鏈氨基酸的C-端連接,脂肪酸的羧基與氨基酸N-端連接,共同組成了脂肪酸成環(huán)的環(huán)脂肽[5];由于脂肪酸成環(huán)的位置的不同又可細(xì)分為β-羥基脂肪酸成環(huán)的環(huán)脂肽、β-氨基脂肪酸成環(huán)的環(huán)脂肽和α-氨基脂肪酸成環(huán)的環(huán)脂肽。

    (1)β-羥基脂肪酸成環(huán)的環(huán)脂肽

    β-羥基脂肪酸成環(huán)結(jié)構(gòu)的典型代表是莎梵婷系(Surfactins)脂肽。脂肪酸鏈上的碳原子和β-羥基與7個(gè)氨基酸的肽鏈以內(nèi)酯鍵組成環(huán)狀結(jié)構(gòu)。主要包括莎梵婷、地衣素、短小酸素和Kannurin等脂肽類化合物。

    (2)β-氨基脂肪酸成環(huán)的脂肽

    β-氨基脂肪酸成環(huán)結(jié)構(gòu)的典型代表是伊枯草菌素系,包括桿菌肽素、抗霉枯草菌素、伊枯草菌素、桿菌霉素等。Iturins是由7肽與含C14~C17的β-氨基脂肪酸鏈通過酰胺鍵相連而成的一類環(huán)脂肽。

    (3)α-氨基脂肪酸成環(huán)的脂肽

    典型的α-氨基脂肪酸的環(huán)狀脂肽有環(huán)狀四肽(Trapoxins)A和B,可阻礙NIH3T3細(xì)胞轉(zhuǎn)化,起到抗腫瘤作用。

    1.1.2 線性脂肽

    線形脂肽指氨基酸順次連為線形、首尾不相接且不存在環(huán)狀結(jié)構(gòu)的脂肽。如產(chǎn)紫晶鏈孢囊菌亞種發(fā)酵液中發(fā)現(xiàn)的TAN 1511(A~C)[6];由螺旋魚腥藻分泌的螺旋形素。

    1.2 脂肽的性質(zhì)

    1.2.1 理化性質(zhì)

    目前,在脂肽類生物表面活性劑中研究較多的是表面活性素(Surfactin), 它是目前已發(fā)現(xiàn)的生物表面活性劑中表面活性最強(qiáng)的一種,CMC僅為25 mg/L,但可將水的表面張力降至27 mN/m,可將水/十六烷的界面張力降至1 mN/m??莶菅挎邨U菌BS5產(chǎn)生的Surfactin,在pH>5時(shí)就可溶解于水,也可溶解于乙醇、丙酮、甲醇、丁醇、氯仿等有機(jī)溶劑,于100℃加熱1 h仍具有良好的穩(wěn)定性。

    李蔚等[7]用地衣芽孢桿菌株產(chǎn)生的一種脂肽類表面活性劑,其CMC為30.0 mg/L,可耐高溫和高濃度鹽,pH適應(yīng)范圍較廣,對(duì)原油具有較強(qiáng)的乳化、增溶、脫附和降黏作用。

    尹華等[8]由假單胞菌XD-1菌株所產(chǎn)生的表面活性劑為脂肽類和糖脂類混合物,其CMC為50 mg/L,在pH=6.0時(shí)表現(xiàn)出最佳活性。

    1.2.2 生物活性

    (1)抗菌活性

    脂肽對(duì)革蘭氏陽性、陰性菌和真菌均具有高效廣譜的殺菌作用。自2003年至今,已有有十多種脂肽抗生素參與臨床研究或上市。例如Polymixin,一種具備抗內(nèi)毒素活性的特異性藥物,是臨床上治療嚴(yán)重感染泛耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌和假單胞菌的特效抗生素,用于預(yù)防醫(yī)院重癥監(jiān)護(hù)病房及血液病房等區(qū)域交叉感染疾病的發(fā)生,可被囊性纖維患者經(jīng)靜脈注射或經(jīng)霧化吸入來防治呼吸道感染[9]。

    (2)抗支原體

    脂肽具有抗支原體作用,可用于疫苗及免疫調(diào)節(jié)分子等方面。例如 Surfactin與細(xì)胞膜上磷脂和膽固醇具很強(qiáng)的親和力,所以具有豐富磷脂和膽固醇的支原體比哺乳動(dòng)物細(xì)胞對(duì)Surfactin更敏感[10],因此Surfactin對(duì)支原體的繁殖有很強(qiáng)的抑制作用,在臨床上與常規(guī)抗原混合使用起到抗支原體的功效。

    (3)抗炎活性

    脂肽具有抗炎作用。例如Surfactin能選擇性的抑制非洲綠猴腎上皮細(xì)胞磷脂酶A2的活性,抑制了炎癥介質(zhì)花生四烯酸的釋放,阻止炎癥的發(fā)展。

    Taichi等[11]研究發(fā)現(xiàn),Surfactin C1能夠選擇性的抑制脂多糖信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo),可以作為一種潛在的藥物來源,用來治療由脂多糖誘發(fā)的疾病,如革蘭陰性菌白血病和牙周炎等。

    (4)抗病毒活性

    脂肽可與病毒脂包膜的相互作用,進(jìn)而破壞病毒的結(jié)構(gòu),對(duì)DNA 病毒、傳染性法氏囊病毒、皰疫病毒或者逆轉(zhuǎn)錄酶病毒等具有直接滅活作用。

    例如Surfactin對(duì)單純皰疹病毒、鼠腦心肌炎病毒、皰疹性口炎病毒、猿免疫缺陷病毒、豬細(xì)小病毒等病毒表現(xiàn)出不同程度的抑制效果[12],對(duì)偽狂犬病病毒和新城疫病毒具有直接抑制效果。

    (5)抗腫瘤活性

    脂肽能夠破壞腫瘤細(xì)胞的線粒體膜,激活半胱天冬酶從而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,進(jìn)而表現(xiàn)出抗腫瘤的活性,對(duì)人乳腺癌細(xì)胞、宮頸癌細(xì)胞、肝癌細(xì)胞、肺癌細(xì)胞和直腸癌細(xì)胞具有殺傷作用[13]。

    Lee等[14]研究發(fā)現(xiàn),Surfactin對(duì)癌細(xì)胞具有特異的殺傷作用,但不傷害正?;铙w細(xì)胞。

    Wang等[15]研究發(fā)現(xiàn)脂肽能夠使腫瘤細(xì)胞靜止在G1期,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡,對(duì)人白血病細(xì)胞(K562)表現(xiàn)出殺傷作用。

    2 脂肽的生物合成、分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定方法

    2.1 脂肽的主要生產(chǎn)菌種

    自然界中酵母菌、真菌、細(xì)菌等多種微生物都可以產(chǎn)生脂肽,目前已發(fā)現(xiàn)的主要有隱桿菌屬、類芽孢桿菌屬 、梭菌屬、游動(dòng)放線菌屬、芽孢桿菌屬、假單胞菌屬、沙雷氏菌屬、鐮孢霉屬、鏈霉菌屬、節(jié)桿菌屬、分支桿菌屬、短桿菌屬和解硫胺素芽孢桿菌屬[16-22]等,包含陸地和海洋微生物。

    2.2 脂肽的生物合成

    Grangemard等[23]最早研究了枯草芽胞桿菌產(chǎn)生脂肽的機(jī)制,隨后有關(guān)研究陸續(xù)展開,人們發(fā)現(xiàn),與脂肽類物質(zhì)化學(xué)結(jié)構(gòu)的多樣性相反,各種脂肽的生物合成機(jī)制基本上是由獨(dú)立合成的肽和脂質(zhì)部分的縮合產(chǎn)生,以環(huán)脂肽為例,簡(jiǎn)述如下:

    環(huán)脂肽是由非核糖體肽合成酶(NRPS)復(fù)合體以非核糖體多肽的方式催化合成。NRPS是多模塊酶識(shí)別,每個(gè)模塊允許在一個(gè)特定的肽部分氨基酸的摻入,從而激活,修飾和鏈接氨基酸中間體到產(chǎn)生的肽[24]。典型的模塊域包括腺苷化結(jié)構(gòu)域、巰基化功能域、縮合功能域和硫酯酶結(jié)構(gòu)域4部分。合成酶在模塊上有效分部,每個(gè)模塊依次將相應(yīng)氨基酸組合到多肽鏈中。所以非核糖體多肽化合物的結(jié)構(gòu)多樣化往往伴隨著重要的生物學(xué)活性。

    2.2.1 肽段的生物合成

    具有氨基酸激活功能的A結(jié)構(gòu)域從底物中結(jié)合特定的氨基酸,由底物氨基酸的腺苷酸反應(yīng)激活轉(zhuǎn)化為氨酰腺苷酸,然后氨酰酰苷酸與T結(jié)構(gòu)域的磷酸泛酰巰基輔基的巰基以共價(jià)方式結(jié)合形成硫酯鍵,組成后的氨酰-S-載體復(fù)合體上的氨基與C結(jié)構(gòu)域的肽酰基的?;M(jìn)行親核反應(yīng),形成新肽鍵,延長(zhǎng)了一個(gè)氨基酸的肽酰載體復(fù)合物進(jìn)入下一個(gè)肽酰形成的反應(yīng)。在完成肽鏈的延伸后,TE域終止合成肽鏈,將肽鏈釋放下來,并進(jìn)行環(huán)化。

    2.2.2 脂質(zhì)體部分的生物合成

    脂肽脂質(zhì)部分的生物合成是由數(shù)個(gè)模塊耦合來完成,對(duì)肽鏈的脂肪酸鍵進(jìn)行活化。Marahiel等學(xué)者將其歸納為5個(gè)步驟[25],首先,域的?;o酶A連接酶耦合的輔酶A脂肪酸。活性脂肪酸后,轉(zhuǎn)移到第一個(gè)域的?;d體蛋白輔因子,同時(shí),一個(gè)丙二酰輔酶A固定到ACP2域。丙二?;蝓サ拇呋目s合合成酶結(jié)構(gòu)域?qū)е乱煌サ男纬伞MマD(zhuǎn)化為氨基酸的轉(zhuǎn)氨基脂肪酸。氨基脂肪酸可以通過縮合結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)移到硫醚化域。它可以連接到一個(gè)氨基轉(zhuǎn)移酶的固定肽部分的氨基酸生物合成的第一個(gè)模塊。最終實(shí)現(xiàn)合成、脂肽可修改特定酶的糖基化或鹵化的合成酶相關(guān)。

    表1 部分脂肽的分離純化方法

    2.3 脂肽的分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定

    對(duì)脂肽的分離純化,通常采用濃H C l 或(NH2)2SO4沉淀得脂肽粗提物,再通過薄層層析、凝膠色譜層析、反向高效液相(HPLC)等技術(shù)手段進(jìn)一步分離純化[26]。

    最早研究脂肽各肽片段的組成及順序往往通過Edman 酶解法和氨基酸分析儀[27]。隨著分析技術(shù)的革新,以二級(jí)質(zhì)譜和二維核磁共振為代表的質(zhì)譜技術(shù)廣泛用于脂肽氨基酸順序及其結(jié)構(gòu)的鑒定[28],例如,源后衰變-基質(zhì)輔助激光解吸飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜、線性離子阱-軌道間串聯(lián)質(zhì)譜、電噴霧離子源電離三重四級(jí)桿飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜和快速原子轟擊質(zhì)譜等新一代的質(zhì)譜技術(shù)已應(yīng)用到脂肽結(jié)構(gòu)分析中。

    在脂肽的研究發(fā)展進(jìn)程中,不斷涌現(xiàn)出新的更高效的分離純化和結(jié)構(gòu)分析方法。1994年 Peypoux等人通過二級(jí)質(zhì)譜和二維核磁共振發(fā)現(xiàn)了SurfactinAla4;Moyne等[29]采用(NH2)2SO4沉淀、陰離子交換層析、凝膠層析、SDS-PAGE電泳、等電點(diǎn)電泳和質(zhì)譜技術(shù)掌握到Bacillomycin D的結(jié)構(gòu)信息;孫力軍等[30]通過甲醇提取、離子交換層析、反向HPLC、LC-MS和ESI/MS/CID等方法分離到了Fengycin、Iturins和Surfactins;Ye等[31]通過濃HCl沉淀、甲醇萃取和MALDI-TOF-MS/MS質(zhì)譜分析的方法確定了Iturin存在于Bacillussp. B47產(chǎn)物中。

    3 脂肽的主要應(yīng)用

    3.1 食品工業(yè)

    脂肽在食品工業(yè)中常作為乳化劑、分散劑、穩(wěn)定劑等使用。Nitschke等[32]發(fā)現(xiàn)脂肽作用于乳化大豆油及椰子油,具有良好的乳化穩(wěn)定性;Surfactins應(yīng)用于大麥和肉制品中,不僅能改善含淀粉類產(chǎn)品的質(zhì)地和保質(zhì)時(shí)間,乳化部分破碎的脂肪組織,還能起到抗腐敗菌、抗病原菌的能力,是潛在的天然食品防腐劑。

    3.2 石油工業(yè)

    脂肽在油層中能明顯降低油/水的表/界面張力,使油類乳化和降粘,促進(jìn)油/石分離,達(dá)到驅(qū)油、提高石油采收率的目的,也能用于漏油處理、清除原油中的瀝青質(zhì)和防止結(jié)蠟、清洗油罐中污泥和清洗后的原油回收等方面[33]。

    Schaller等[34]發(fā)現(xiàn)Surfactins在極端的油藏環(huán)境下也能保持很好的表面活性,可提高沙裹油的回收率,進(jìn)而提高石油采收率;Youssef等[35]發(fā)現(xiàn)脂肽可以開采出砂巖巖心中的捕集油,表明脂肽在微生物采油中的應(yīng)用是可行的,且具有在極性條件下應(yīng)用的潛力。

    3.3 環(huán)境保護(hù)

    3.3.1 降解多環(huán)芳烴

    菲是在環(huán)境中難以被降解去除的多環(huán)芳烴。章慧[36]發(fā)現(xiàn)脂肽用于降解菲污染的體系時(shí),對(duì)于菲降解菌不會(huì)產(chǎn)生毒害作用,相反在一定程度上可促進(jìn)微生物的生長(zhǎng),提高菲的降解速率;在處理煉油廠廢水中烷烴的過程中,將脂肽生物表面活性劑加入到活化污泥處理池中可顯著提高生物降解的效率。

    3.3.2 除重金屬離子

    脂肽可通過降低表面張力,促進(jìn)重金屬離子與土壤或水體分離,加強(qiáng)重金屬離子與脂肽的絡(luò)合作用。大多數(shù)脂肽對(duì)帶正電的金屬陽離子具有很好的螯合作用,可作為浮選捕收劑與帶電膠粒相吸以除去有毒金屬離子,除去如 Zn(Ⅱ)、P-B、Cu、Cd 和Cr(Ⅵ)等土壤和水體中的金屬離子,解決了處理浮選收集劑毒性的問題。

    3.3.3 降解有害農(nóng)藥

    在農(nóng)藥污染的土壤中添加脂肽生物表面活性劑或培養(yǎng)表面活性劑產(chǎn)生菌,能顯著降解有害成分。在土壤中添加生物表面活性劑降解硫丹殺蟲劑,可以使降解率提高30%~45%[37]。

    3.4 日化領(lǐng)域

    脂肽具有良好的乳化和抗菌性能,對(duì)人體的生理適應(yīng)性較強(qiáng),在化妝品中常用作分散劑、柔軟劑和增溶劑,對(duì)人體無累積毒害作用。在抗皺類化妝品中,用作乳化劑,能起到保濕的作用[38];應(yīng)用于清洗類化妝品中可起到清洗、起泡和殺菌的作用,在使產(chǎn)品具有良好的起泡性和洗凈能力的同時(shí),對(duì)眼睛和皮膚無刺激反應(yīng);還可以改善產(chǎn)品的形態(tài)和對(duì)溫度的適應(yīng)性[39]。

    3.5 紡織工業(yè)

    脂肽性能優(yōu)良而且環(huán)保無毒,作為皂洗劑用于紡織加工中比皂片能更好地去除紡織品浮色[40];作為勻染劑有助于完善紡織品染色工藝的效果;作為柔軟劑可有效改善羊毛產(chǎn)品的柔軟性;另外,脂肽在紡織加工中還可起到分散、抗靜電、滲透、洗凈和潤(rùn)濕等功能,以取代化學(xué)合成表面活性劑在紡織工業(yè)的應(yīng)用。

    4 脂肽目前研究重點(diǎn)

    盡管能產(chǎn)生脂肽的微生物資源非常豐富,但是真正達(dá)到生產(chǎn)水平的并不多,主要有枯草芽胞桿菌生產(chǎn)的Surfactin、Iturin和Fengycin[41];玫瑰孢鏈霉菌生產(chǎn)的Daptomycin;地衣芽胞桿菌生產(chǎn)的Lichenyishin;短小芽胞桿菌生產(chǎn)Pumilacidin、Esperin[42]。

    脂肽通常通過微生物在水混溶或不混溶底物上發(fā)酵來產(chǎn)生,產(chǎn)量低一直是其瓶頸,營(yíng)養(yǎng)底物、接種量、pH值、溫度和曝氣等條件均可影響脂肽的生產(chǎn)。因此,脂肽產(chǎn)量的提高可以通過優(yōu)化發(fā)酵條件和選育過量生產(chǎn)的微生物突變體來實(shí)現(xiàn)。另外,菌種本身的生產(chǎn)能力也是不容忽視的問題,有些菌株產(chǎn)脂肽的水平對(duì)環(huán)境變化過于敏感,使其生產(chǎn)和應(yīng)用受到了極大限制。

    4.1 使用低成本原料

    在大多脂肽數(shù)生產(chǎn)中,原材料成本約占生產(chǎn)總成本的30%~40%[43]。利用農(nóng)業(yè)副產(chǎn)品等低成本的原材料作為底物來生產(chǎn)脂肽,可以顯著降低生產(chǎn)成本[44]。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,木薯廢水、植物來源的油、石油廢物、淀粉物質(zhì)、乳酸乳清和釀酒廢物等各種廉價(jià)原料均可以作為底物來生產(chǎn)脂肽[45]。

    Makkar等[46]發(fā)現(xiàn)向日葵油餅?zāi)茱@著提高伊枯草素A的生產(chǎn)量。Seghal等[47]使用工農(nóng)業(yè)固體廢料或殘?jiān)鼇韮?yōu)化海洋放線菌金黃色短桿菌MSA13的生物表面活性劑的生產(chǎn),使產(chǎn)量增加到原始條件的3倍,而且還產(chǎn)生了新的脂肽。

    4.2 使用突變體和重組菌株

    突變體是實(shí)現(xiàn)提高脂肽產(chǎn)量的重要手段。閆冬等[48]通過亞硝基胍誘變多粘類芽胞桿菌,使其產(chǎn)生的抗菌脂肽是原來的1.71倍。李光等[49]采用利用常壓室溫等離子體對(duì)枯草芽胞桿菌E7進(jìn)行快速誘變,獲得的突變菌株SF90-5所產(chǎn)生的Surfactin的產(chǎn)量是原來的5倍。

    目前,高通量篩選技術(shù)已經(jīng)應(yīng)用于脂肽高產(chǎn)突變株的篩選,主要是利用氯化十六烷基吡啶-溴百里酚藍(lán)(CPC-BTB)顯色原理來檢測(cè)脂肽的含量[50],利用96孔板來替代傳統(tǒng)的搖瓶篩選,提高了篩選效率。除了利用突變體提高產(chǎn)量外,基因重組技術(shù)已經(jīng)在獲得高產(chǎn)脂肽菌株方面取得了一定的效果。 Leclere等[51]利用來源于金黃色葡萄球菌質(zhì)粒pUB110的復(fù)制基因repU的組成型啟動(dòng)子替代枯草芽胞桿菌ATCC 6633操縱子的天然啟動(dòng)子獲得了重組菌株BBG100,使抗霉枯草菌素的產(chǎn)量比野生型提高了15倍,其產(chǎn)量提其產(chǎn)量提高的效率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于常規(guī)誘變。

    4.3 脂肽的提取和純化

    脂肽需要從發(fā)酵液中分離純化后方能付諸應(yīng)用,但生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的泡沫使分離純化非常困難。Jauregi等[52]用殼聚糖固定芽胞桿菌屬細(xì)胞,解決了有氧生產(chǎn)脂肽過程中的發(fā)泡問題。固定細(xì)胞可以在攪拌式發(fā)酵罐中重復(fù)使用,既可維持高脂肽產(chǎn)量,又能使脂肽的回收變得簡(jiǎn)單易行,從而達(dá)到部分純化和濃縮脂肽的目的,分流出的泡沫體對(duì)許多石油樣品顯示出高表面活性,該方法相對(duì)易操作、成本低、并且對(duì)環(huán)境友好。

    混合鹽析、酸沉淀和超濾等多種下游處理技術(shù)聯(lián)用是目前脂肽分離的主要手段,但是多種技術(shù)聯(lián)用會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)品回收率降低[53],因此改良下游的分離提純工藝依然是脂肽生產(chǎn)亟待解決的問題。硅膠柱層析雖然可以有效的分離某些脂肽,但是分離過程中用到的某些有機(jī)溶劑會(huì)明顯降低脂肽的活性,因此分離過程中應(yīng)盡量減少有機(jī)溶劑的使用。Khondee等[54]通過兩步超濾法提取產(chǎn)物中的脂肽,根據(jù)脂肽聚集形成膠束的大小來選擇最合適的MWCO膜,不但程序簡(jiǎn)單,回收率高,而且得到的表面活性素純度可達(dá)94 %,抗霉枯草菌素純度可達(dá)到90.02%。

    5 結(jié)語

    雖然脂肽類生物表面活性劑具有優(yōu)秀的表面活性和抗菌、抗病毒、抗腫瘤等諸多生物活性,在石油、食品、醫(yī)藥、日化等領(lǐng)域有望獲得廣泛的應(yīng)用,但由于居高不下的成本限制,大部分脂肽仍處于實(shí)驗(yàn)室研究階段,離工業(yè)化生產(chǎn)和商業(yè)化應(yīng)用尚有很大的距離,尤其是我國,對(duì)脂肽類的研究起步較晚,有關(guān)研究尚不成熟。但我們相信,隨著生物技術(shù)(工程)、基因工程以及有關(guān)分析測(cè)試手段的不斷進(jìn)步和發(fā)展,對(duì)脂肽類研究將會(huì)不斷深入,人們將更深入的認(rèn)識(shí)脂肽的生產(chǎn)調(diào)控機(jī)制,分子結(jié)構(gòu),進(jìn)而通過構(gòu)建基因工程菌和優(yōu)化培養(yǎng)條件、改善分離工藝、拓寬原材料范圍,不斷提高脂肽的產(chǎn)量,降低其成本,早日實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)和商業(yè)化應(yīng)用。

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