黑木耳桑葚魔芋代餐粉復(fù)合多糖的抗氧化活性研究

廖傳仙　黃建國(guó)　陸萍　朱斌強(qiáng)　施志成　李衛(wèi)旗

摘要 [目的]對(duì)“特醫(yī)食品”黑木耳桑葚魔芋代餐粉及該產(chǎn)品的主要原料黑木耳粉、桑葚果粉、魔芋精粉多糖的抗氧化性進(jìn)行比較研究。[方法]通過(guò)對(duì)4種樣品多糖的抗氧化活性測(cè)定，比較其活性差異。[結(jié)果]黑木耳桑葚魔芋代餐粉多糖的還原力、對(duì)DPPH和OH自由基的清除率皆?xún)?yōu)于黑木耳粉、桑葚果粉、魔芋精粉多糖。[結(jié)論]黑木耳桑葚魔芋代餐粉中的多種多糖間有明顯的協(xié)同增效性，是一種營(yíng)養(yǎng)功能良好的特醫(yī)食品。

關(guān)鍵詞 黑木耳;桑葚;魔芋;特醫(yī)食品;多糖;抗氧化

中圖分類(lèi)號(hào) TS 201.2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

文章編號(hào) 0517-6611（2020）16-0162-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2020.16.045

Study on the Antioxidant Activities of Mixed Polysaccharide from a Compound Meal Powder

LIAO Chuan-xian1，HUANG Jian-guo1，LU Ping2 et al （1.Youheihei Food Co.，Ltd.，Huzhou，Zhejiang 313000;2.Zhejiang University-Huzhou Nantaihu Modern Agricultural Technology Extension Centre，Huzhou，Zhejiang 313000）

Abstract [Objective]The antioxidant activities of mixed polysaccharide from a compound meal powder and the main raw materials of this product were compared.[Method]By measuring the antioxidant activities of four samples of polysaccharides，the differences of the four samples were compared.[Result]The reducing power and the scavenging rate of DPPH and OH radicals of mixed polysaccharide from compound meal powder are better than that of the three raw materials respectively.[Conclusion]The various polysaccharides from raw materials of compound meal? powder have obvious synergism，the product is a kind of good FSMP food.

Key words Auricularia auricular;Morus Multicaulia;Amorphophallus koniac;FSMP;Polysaccharide;Antioxidant

基金項(xiàng)目浙江省湖州市公益性技術(shù)應(yīng)用研究（重點(diǎn)）項(xiàng)目（2018GZ06）。

作者簡(jiǎn)介 廖傳仙（1971—），男，浙江溫州人，博士，高級(jí)工程師，從事功能食品研發(fā)。*通信作者，博士，副教授，從事功能食品研發(fā)工作。

收稿日期 2020-01-19

特殊醫(yī)學(xué)用途配方食品（簡(jiǎn)稱(chēng)“特醫(yī)食品”，F(xiàn)SMP），是指為滿(mǎn)足進(jìn)食受限、消化吸收障礙、代謝紊亂等特定疾病狀態(tài)人群對(duì)營(yíng)養(yǎng)素的特殊需要，專(zhuān)門(mén)加工配制而成的配方食品[1]。特醫(yī)食品常應(yīng)用于糖尿病、呼吸系統(tǒng)疾病、腎病、腫瘤、腸病、蛋白過(guò)敏、減胖、代謝缺陷等病癥的營(yíng)養(yǎng)輔助治療。國(guó)內(nèi)的特醫(yī)食品多以營(yíng)養(yǎng)代餐粉的形式出現(xiàn)，是一類(lèi)以特定的加工工藝將數(shù)種功能食品材料復(fù)配調(diào)制而成的食品[2]。目前市場(chǎng)上已有多款不同功能的特醫(yī)食品代餐粉，如由魔芋膠、果汁粉、水溶性膳食纖維復(fù)配而成的果蔬酵素營(yíng)養(yǎng)代餐粉[3]，將藍(lán)莓、堅(jiān)果干粉與魔芋精粉混合而成的藍(lán)莓堅(jiān)果代餐粉等[4]。這些產(chǎn)品既補(bǔ)充了人體多種必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，還具有良好的口感。

黑木耳含有豐富的蛋白質(zhì)、多糖、維生素及微量元素，其中黑木耳多糖具有抗腫瘤、降血脂、提高免疫力等多種生物活性[5]。桑葚中的多糖、黃酮、生物堿等成分可消除人體內(nèi)自由基、降血糖血脂、促進(jìn)干細(xì)胞生長(zhǎng)等[6-8]。魔芋富含多糖、黃酮、蛋白質(zhì)及礦物質(zhì)等成分，其中的葡甘聚糖（KGM）是一種優(yōu)良的膳食纖維，有防治糖尿病[9]、減肥[10]、改善膽固醇代謝、抗腫瘤和抗氧化等功能[11]。以黑木耳粉、桑葚果粉、魔芋精粉為主原料進(jìn)行等質(zhì)量比例復(fù)配，經(jīng)特定的加工工藝開(kāi)發(fā)研制成一種特醫(yī)食品黑木耳桑葚魔芋代餐粉，在腸胃功能紊亂、高血脂及糖尿病患者群體的營(yíng)養(yǎng)輔助治療方面取得了良好的效果。筆者通過(guò)對(duì)該產(chǎn)品水溶性多糖提取物的抗氧化活性分析，并與該產(chǎn)品的3種主要原料在相同條件下提取的水溶性多糖的抗氧化活性進(jìn)行比較，以期確認(rèn)3種農(nóng)產(chǎn)品原料的活性多糖在復(fù)配以后的協(xié)同增效性。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品。黑木耳粉、桑葚果粉、魔芋精粉、黑木耳桑葚魔芋代餐粉均由浙江優(yōu)嘿嘿食品有限公司提供。

1.1.2 試劑。乙醇、葡萄糖、DPPH、無(wú)水乙醇、水楊酸、H2O2、FeSO4、鐵氰化鉀、三氯乙酸、FeCl3、磷酸緩沖液，均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.1.3 主要儀器。M130-1型粉碎機(jī)，金華市旋風(fēng)藥材機(jī)械廠;GL21M高速冷凍離心機(jī)，上海赫田科學(xué)儀器有限公司;紫外分光光度計(jì)，上海奧析科學(xué)儀器有限公司;RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海亞榮生化儀器廠;LGJ-10C型冷凍干燥機(jī)，北京四環(huán)科學(xué)儀器廠有限公司。

1.2 方法

1.2.1 水溶性粗多糖的提取。分別將黑木耳、桑葚果粉、魔芋精粉以及黑木耳桑葚魔芋代餐粉烘干、粉碎，過(guò)80目篩。稱(chēng)取一定量的樣品干粉，加入蒸餾水，液料比為30∶1（mL/g），沸水浴加熱，攪拌，轉(zhuǎn)速為200 r/min，每次提取70 min，共提取3次。離心，合并上清液，55 ℃下旋轉(zhuǎn)濃縮。加入4倍體積95%乙醇，4? ℃下放置24 h。棄去上清液，室溫下將沉淀晾干，至無(wú)乙醇味，即得水溶性粗多糖。

1.2.2 水溶性多糖抗氧化活性的測(cè)定。

1.2.2.1 還原力的測(cè)定?？寡趸瘎┑倪€原能力與其抗氧化性成正比。其原理是抗氧化劑提供電子給自由基從而消除自由基。鐵氰化鉀的三價(jià)鐵能被抗氧化劑還原成二價(jià)鐵，而二價(jià)鐵會(huì)進(jìn)一步反應(yīng)生成普魯士藍(lán)（Fe4[Fe（CN）6]3），由于普魯士藍(lán)的最大吸光度在 700 nm波長(zhǎng)處，因此多糖的還原能力可通過(guò) OD700 nm的大小反映。參照Gao的方法[12]，將混勻后的樣品溶液于700 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以蒸餾水作為空白對(duì)照，VC作為陽(yáng)性對(duì)照。

1.2.2.2 對(duì)二苯基苦味肼自由基（DPPH）的清除能力。DPPH是一種以氮為中心的穩(wěn)定的自由基，DPPH 的無(wú)水乙醇溶液呈紫色，在517 nm 波長(zhǎng)處有特征吸收峰。當(dāng)多糖作為抗氧化劑加入到 DPPH 的無(wú)水乙醇溶液中時(shí)，DPPH的孤對(duì)電子溶液顏色會(huì)隨著抗氧化劑的增多而變淺，其吸光度也隨之變小。參照賈振寶等[13]方法于517 nm波長(zhǎng)處測(cè)定樣品溶液的吸光度值，以無(wú)水乙醇作空白對(duì)照，VC作陽(yáng)性對(duì)照，計(jì)算樣品對(duì)DPPH自由基的清除率。

1.2.2.3 對(duì)OH自由基的清除能力。Fenton是產(chǎn)生·OH 最常用的反應(yīng)，原理如下：Fe2++H2O2→Fe3++OH-+·OH。其機(jī)理是利用H2O2與 Fe2+混合產(chǎn)生·OH，在體系中加入水楊酸捕捉·OH 并產(chǎn)生有色物質(zhì)，該物質(zhì)在波長(zhǎng)510 nm處有最大吸收。H2O2的量和Fe2+反應(yīng)產(chǎn)生的·OH量成正比。參照Li B等[14]方法于510 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度值。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同樣品的還原力比較 由圖1可知，隨著抗氧化物質(zhì)濃度的升高，各個(gè)樣品的還原力也隨之增強(qiáng)，當(dāng)濃度為1 000 μg/mL 時(shí)，代餐粉多糖的還原力OD值達(dá)到了1.20，黑木耳、桑葚果粉和魔芋精粉的多糖OD值分別為0.89、0.99、0.75。結(jié)果表明，3種原料復(fù)配后的代餐粉多糖的還原力比單一的桑葚果粉、黑木耳粉以及魔芋精粉多糖明顯提高。

2.2 不同樣品對(duì)DPPH自由基的清除率 從圖2可以看出，4種多糖都具有一定的清除DPPH自由基的能力，且與濃度呈正相關(guān)。當(dāng)濃度為1 000 μg/mL時(shí)，清除率分別為61.5%、56.7%、57.3%和71.6%，代餐粉的多糖提取物對(duì)DPPH自由基的清除率最高。這表明多種物質(zhì)混合后多糖清除DPPH自由基的能力得到了一定程度的提高，對(duì)于消除體內(nèi)多余的自由基起到了良好的作用。

2.3 不同樣品對(duì)OH自由基的清除率 從圖3可以看出，4種樣品提取物對(duì)OH自由基的清除能力與劑量呈正相關(guān)。當(dāng)提取物濃度為1 000 μg/mL時(shí)，代餐粉的多糖提取物對(duì)OH自由基的清除能力高于黑木耳多糖、桑葚多糖及魔芋多糖，4種樣品對(duì)其清除率分別為42.6%、41.8%、48.1%、59.7%。這一結(jié)果表明，相對(duì)于每一種原料的多糖來(lái)說(shuō)，作為復(fù)配產(chǎn)品的代餐粉多糖對(duì)OH自由基的清除能力在一定程度上明顯提高。

3 結(jié)論

將黑木耳粉、桑葚果粉、魔芋精粉復(fù)配加工成特醫(yī)食品黑木耳桑葚魔芋代餐粉后，其水溶性多糖提取物的抗氧化活性在一定程度上明顯提高。復(fù)配后的代餐粉多糖還原力和對(duì)DPPH、OH自由基的清除率分別為1.20（OD值）、71.6%、59.7%，皆明顯高于3種原料各自提取的多糖。這表明黑木耳、桑葚果粉及魔芋精粉中的活性多糖之間產(chǎn)生了協(xié)同增效作用，進(jìn)而提高了產(chǎn)品的總體抗氧化水平。近年來(lái)，對(duì)于復(fù)合多糖的研究逐漸興起，為多糖的深入研究提供了新方向[15]。合理組配不同的食品原料后，其中的復(fù)合多糖往往比單一原料多糖具有更高的生物活性，還可以與其他成分相互作用增加其生物活性。已有研究證明，許多復(fù)合多糖的抗腫瘤作用[16]、增強(qiáng)免疫力作用[17]、降血糖以及抗衰老等活性[18]都有不同程度的提高。黑木耳桑葚魔芋代餐粉復(fù)合多糖的抗氧化活性也證實(shí)了這一結(jié)論，從而為研究該特醫(yī)食品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值提供了理論依據(jù)。

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