豬瘟與豬圓環(huán)病毒混合感染的實驗室診斷與防治

摘要：以某養(yǎng)殖場的發(fā)病情況為例，介紹了豬瘟與圓環(huán)病毒混合感染的診斷與防治過程，希望對廣大養(yǎng)殖戶有所幫助。

關(guān)鍵詞：豬瘟;豬圓環(huán)病毒病;混合感染;實驗室診斷;防治

中圖分類號：S858.28? ? ? ? 文獻標識碼：B? ? ? ? 文章編號：1007-273X（2020）06-0025-02

臨床中豬瘟與豬圓環(huán)病毒病是生豬養(yǎng)殖中最容易發(fā)生的2類病毒性傳染病，其中豬圓環(huán)病毒病屬于嚴重的免疫抑制疾病，該病會造成豬群嚴重的免疫抑制，導致疫苗免疫失敗，引起其他病原的繼發(fā)感染或并發(fā)感染。豬瘟是由豬瘟病毒感染引起的急性、熱性、接觸性傳染病，該病具有極高的傳染性與致死性，在自然條件下，不同年齡與品種的豬均可感染。

1? 發(fā)病經(jīng)過

2018年11月上旬，某養(yǎng)殖戶從外地購進了130頭90日齡左右的斷奶仔豬。在購進后沒有進行嚴格的隔離觀察就混群養(yǎng)殖。豬群進入養(yǎng)殖場的第3天陸續(xù)出現(xiàn)臨床癥狀，主要表現(xiàn)為精神狀態(tài)變差，采食量逐漸下降，體溫升高，氣喘，腹瀉，發(fā)病3～5 d后，發(fā)病豬數(shù)量逐漸增加，并陸續(xù)出現(xiàn)死亡現(xiàn)象。據(jù)調(diào)查，引進的斷奶仔豬在20日齡接種了3頭份的豬瘟疫苗，30日齡接種了口蹄疫疫苗，此外沒有接種其他疫苗。養(yǎng)殖場養(yǎng)殖密度較大，不同年齡的豬混群養(yǎng)殖，整體衛(wèi)生環(huán)境較差，糞便清理不及時。

2? 臨床癥狀

該養(yǎng)殖場發(fā)病十分突然，發(fā)病后大部分患豬表現(xiàn)為精神萎靡不振，被毛雜亂，患豬臥地不起，嗜睡，身體逐漸消瘦，飼料利用率逐漸下降，部分豬停止生長發(fā)育，體重顯著下降，有的患豬體溫升高至41 ℃，最高升至42 ℃，眼結(jié)膜潮紅、充血，個別患豬的眼結(jié)膜呈蒼白色或黃疸癥狀?；钾i眼睛流出大量膿性分泌物，鼻液中夾雜很多血液，先便秘后腹瀉，隨后便秘與腹瀉交替出現(xiàn)，糞便中夾雜很多黏液或血絲，部分患豬排出的尿液中夾雜大量血液，呈蛋白尿。大多數(shù)患豬表現(xiàn)出明顯的氣喘癥狀，隨后身體逐漸衰弱，后肢交叉或并在一起支撐，不能正常站立。部分患豬后期肢體出現(xiàn)嚴重的麻痹現(xiàn)象，四肢運動不協(xié)調(diào)，關(guān)節(jié)嚴重腫大變形，全身體表組織發(fā)紅，并出現(xiàn)出血性斑塊，頸部、背部皮膚出血最明顯。患豬的耳尖、四肢內(nèi)側(cè)、腹部等毛少區(qū)域的皮膚呈紫紅色，體表淋巴結(jié)顯著腫大，部分患豬出現(xiàn)磨牙的癥狀，后期皮膚輕度黃染、排出黃色或深紅色的尿液，膀胱積尿嚴重，小便不能正常排出。眼球向內(nèi)凹陷，短時間內(nèi)衰竭而死。

3? 病理學變化

將病死豬解剖后，發(fā)現(xiàn)大部分病死豬都呈現(xiàn)敗血癥，病變皮膚組織黏膜與實質(zhì)器官存在廣泛性充血現(xiàn)象，在臟器表面有大小不等的出血點、出血斑塊，甚至出現(xiàn)出血性的條紋。病死豬的全身淋巴結(jié)腫大、出血，特別是頸部淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)、支氣管淋巴結(jié)、腹股溝淋巴結(jié)最明顯，將腫大的淋巴結(jié)橫切后，切面質(zhì)地變硬，呈蒼白色[1]，在淋巴結(jié)的邊緣存在大量梗死病灶。腎臟顏色呈蒼白色，質(zhì)地腫大，存在數(shù)量不等的出血點，脾臟邊緣存在梗死病灶。病死豬的喉頭黏膜、會厭軟骨、膀胱黏膜、心外膜、肺臟與腸系膜存在大量出血性變化，膀胱黏膜表面存在不同程度的充血、出血現(xiàn)象，黏膜表面有針尖大小的出血點。肺臟淤血、腫大明顯，并且存在散在硬塊，有纖維素樣滲出物流出，扁桃體出現(xiàn)梗死。腸道存在不同程度的充血、出血，其中回腸與結(jié)腸段的腸壁嚴重擴張變薄，盲腸與結(jié)腸黏膜充血、出血嚴重，盲腸淋巴濾泡呈現(xiàn)紐扣狀潰瘍[2]。

4? 實驗室診斷

結(jié)合上述病理變化與臨床表現(xiàn)，可以對病情做出初步診斷，懷疑為豬瘟與豬圓環(huán)病毒感染，要確診還需要采集病料進行嚴格的實驗室診斷。在無菌條件下，采集患豬的病變肺臟組織、淋巴結(jié)組織、肝臟組織充分研磨后，取上層清液進行豬瘟、豬圓環(huán)病毒2型、豬繁殖與呼吸疾病綜合征病毒、豬偽狂犬病毒等的PCR檢測。具體方法如下：采集病死豬的大腦皮層組織、淋巴結(jié)組織、扁桃體組織，放置在50%的甘油生理鹽水中，8 ℃環(huán)境下保存。每份樣品分別稱量1 g粉碎后充分研磨，加入1.5 mL生理鹽水，研磨均勻后放置在離心管中離心2 min，取上清液放置在滅菌離心管中，再加入消化液與蛋白酶K振蕩混合均勻后放置在56 ℃的水中消化1 h。將樣品從水浴鍋中取出后等溫度下降到室溫狀態(tài)，向其中加入DNA結(jié)合液，然后將液體全部轉(zhuǎn)移到吸附柱中，室溫環(huán)境靜置30 min，離心30 s，舍去收集管液體，加入DNA洗滌液，再進行離心重復上述步驟。將收集管中的液體舍去后，空心柱離心1 min，舍去殘余的DNA洗滌液，然后將吸附柱放置在新的離心管中，向其中加入DNA洗脫液，室溫環(huán)境2 min后離心處理30 s獲得模板DNA，然后放置在擴增儀上， 94 ℃ 30 s，65 ℃ 30 s，72 ℃ 30 s，共35次循環(huán)，72 ℃延伸7 min，然后進行電泳試驗。結(jié)果發(fā)現(xiàn)圓環(huán)病毒與豬瘟病毒均在目的條帶上出現(xiàn)了一條與陽性對照基本一致的線，由此可以判定病料中存在豬瘟與豬圓環(huán)病毒，即可確診。

5? 緊急處理

豬瘟屬于國家一類重特大傳染病，豬圓環(huán)病毒病屬于國家二類傳染病，上述2種疾病都沒有特效藥物，發(fā)病后應(yīng)將確診的患豬立即撲殺進行無害化處理，并及時清理被患豬污染的環(huán)境，清理圈舍中的糞便、墊料，進行嚴格的堆積發(fā)酵。定時對整個豬群進行全面的豬瘟與豬圓環(huán)病毒2型檢測，檢測出隱性帶毒豬后立即作淘汰處理，并將檢測為陰性的豬群作為假定健康豬立即進行豬瘟與豬圓環(huán)病毒疫苗的免疫接種，并做好抗體水平監(jiān)測工作，對免疫方案作出適當?shù)恼{(diào)整，保證豬群抗體水平達標。選用2%的氫氧化鈉溶液，1次/d進行豬舍消毒。豬舍內(nèi)部選用聚維碘酮溶液進行消毒。在整個緊急處理期間，還需要做好養(yǎng)殖場的封鎖隔離工作，禁止養(yǎng)殖場的生豬調(diào)運行為，并做好受威脅區(qū)域內(nèi)養(yǎng)殖場的流行病學調(diào)查與抗體水平監(jiān)測[3]，對于抗體不達標的豬群立即進行緊急免疫接種，確保轄區(qū)范圍內(nèi)的生豬養(yǎng)殖場豬瘟、豬圓環(huán)病毒病抗體水平達標，避免豬群出現(xiàn)嚴重的免疫抑制。

6? 科學預防

日常養(yǎng)殖管理過程中，應(yīng)該加強對豬群的科學管理，控制合理的養(yǎng)殖密度，避免不同年齡的豬混群養(yǎng)殖，按照季節(jié)變化控制好養(yǎng)殖密度，保持豬舍內(nèi)外部的環(huán)境良好，減少應(yīng)激刺激，降低圓環(huán)病毒感染的機會，構(gòu)建完善的生物安全體系，將衛(wèi)生消毒工作貫穿于生豬養(yǎng)殖的全過程，最大限度地降低養(yǎng)殖場內(nèi)傳染源的傳播流行。根據(jù)流行病學調(diào)查結(jié)果對免疫方案做出適當調(diào)整，做到科學免疫。

7? 小結(jié)

為降低上述2種疾病的發(fā)生率，需要不斷加強對2種病的流行病學調(diào)查，掌握疾病的具體臨床表現(xiàn)與病理變化，進行嚴格的實驗室診斷，在明確具體致病原的基礎(chǔ)上，采取緊急措施進行防控，控制傳染源的傳播流行范圍，保證生豬養(yǎng)殖安全。

參考文獻：

[1] 陳德飛，成治州.豬瘟與圓環(huán)病毒混合感染的診治[J].今日畜牧獸醫(yī)，2008（10）：20，69.

[2] 孟紀萍，王建梅，武曉虎，等.豬圓環(huán)病毒2型和豬瘟病毒抗體檢測與分析[J].中國動物檢疫，2012，29（12）：39-40.

[3] 邢香元，王? 斌，崔? 巖.兔病毒性出血癥滅活疫苗的制備、保存、使用方法及注意事項[J].邯鄲農(nóng)業(yè)高等?？茖W校學報，2003（3）：20-22.

收稿日期：2020-05-13

作者簡介：李建蓮（1981-），女，河南光山人，助理獸醫(yī)師，主要從事動物疫病實驗室檢測工作。