紫杉醇聯(lián)合卡鉑放療對宮頸癌患者血管生成及侵襲能力的影響

張燕

[摘要] 目的 探討紫杉醇聯(lián)合卡鉑同期放療對宮頸癌患者血管生成及侵襲能力的影響。方法 方便選取2017年1月—2019年1月該院收治的宮頸癌患者82例，按隨機(jī)數(shù)字表法分為研究組（n=41，采取紫杉醇聯(lián)合卡鉑同期放射治療）和對照組（n=41，單純采取放射治療），共治療3個(gè)療程，觀察兩組臨床療效，治療前后取病理組織，經(jīng)免疫組織化學(xué)SP法后，在高倍顯微鏡下觀察兩組患者治療前后的微血管密度（MVD）及微淋巴管密度（LVD）變化，采取Western blot法檢測兩組宮頸癌細(xì)胞株Hela細(xì)胞中Rock-1、p-cofilin表達(dá)，并開展采取Transwell遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)，讀取OD值，觀察兩組患者細(xì)胞體外侵襲能力的變化。結(jié)果 研究組有效緩解率60.98%高于對照組39.02%，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=9.644，P<0.05）;研究組治療后MVD、LVD值分別為（9.83±1.14）個(gè)/高倍視野、（2.24±0.29）個(gè)/高倍視野，均低于對照組，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=12.678、23.549，P<0.05）;研究組Rock-1、p-codinlin蛋白表達(dá)及OD值均低于對照組，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=9.545、5.587，P<0.05）。 結(jié)論 對宮頸癌患者采取紫杉醇聯(lián)合卡鉑同期放療治療可取得良好效果，抑制腫瘤血管的生成，同時(shí)減少細(xì)胞侵襲能力。

[關(guān)鍵詞] 宮頸癌;紫杉醇;卡鉑;血管生成;侵襲能力

[中圖分類號] R71? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1674-0742（2020）06（a）-0013-04

Effect of Paclitaxel Combined with Carboplatin on Angiogenesis and Invasive Ability in Patients with Cervical Cancer

ZHANG Yan

Department of Gynecology， Hedong District People's Hospital， Linyi， Shandong Province， 276000 China

[Abstract] Objective To investigate the effect of concurrent radiotherapy with paclitaxel and carboplatin on angiogenesis and invasive ability in patients with cervical cancer. Methods Eighty-two patients with cervical cancer treated in our hospital from January 2017 to January 2019 were convenient randomly divided into a study group（n=41， paclitaxel combined with carboplatin concurrent radiation therapy） and a control group （n=41， taking radiotherapy alone）， a total of 3 courses of treatment， to observe the clinical efficacy of the two groups， pathological tissues were taken before and after treatment， and after treatment with immunohistochemical SP method， the microvessel density before and after treatment was observed under high power microscope （MVD） and microlymphatic vessel density （LVD） changes. Western blot was used to detect the expression of Rock-1 and p-cofilin in two groups of cervical cancer cell lines Hela cells. Transwell migration and invasion experiments were performed to read the OD value and observe changes of invasion ability of cells in two groups of patients in vitro. Results The effective response rate of the study group was 60.98% higher than that of the control group 39.02%. There was a statistical difference between the groups （χ2=9.644， P<0.05）. The MVD and LVD values of the observation group after treatment were （9.83±1.14）/high visual fields， （2.24±0.29）/high magnification fields were lower than those in the control group. There was a statistical signifant difference between the groups （t=12.678， 23.549， P<0.05）; Rock-1， p-codinlin protein expression and OD values in the study group were lower than those in the control group， and there were statistical differences between the groups （t=9.545， 5.587， P<0.05）. Conclusion Concurrent radiotherapy of paclitaxel combined with carboplatin for cervical cancer patients can achieve good results， inhibit tumor angiogenesis， and reduce cell invasion.

[Key words] Cervical cancer; Paclitaxel; Carboplatin; Angiogenesis; Invasive capacity

宮頸癌是女性生殖系統(tǒng)常見的惡性腫瘤，發(fā)病率較高，僅次于乳腺癌。近年來，隨著宮頸癌篩查的普及，宮頸癌診斷率明顯提高[1]。臨床治療宮頸癌的方法有手術(shù)、放療、化療，參照美國國立綜合癌癥網(wǎng)絡(luò)（National Comprehensive Cancer Network，NCCN）宮頸癌診治指南，對中晚期宮頸癌患者而言，腫瘤組織較大，單純采取手術(shù)治療易復(fù)發(fā)或發(fā)生轉(zhuǎn)移，推薦采取根治性同步放化療治療手段[2]。紫杉醇、卡鉑是臨床常用的化療藥物，具有殺傷腫瘤細(xì)胞的作用。為探討紫杉醇聯(lián)合卡鉑同期放療對宮頸癌患者血管生成及侵襲能力的影響，該文方便選取2017年1月—2019年1月該院收治的82例宮頸癌患者進(jìn)行分析，報(bào)道如下。

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

方便選取上述時(shí)期該院收治的82例宮頸癌患者，納入標(biāo)準(zhǔn)[3]：經(jīng)病理組織學(xué)檢查確診，經(jīng)CT或MRI檢查未發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移;按國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（FIGO）分期IIb～I(xiàn)IIb期;經(jīng)心電圖、尿常規(guī)、肝腎功能檢查未見異常。排除標(biāo)準(zhǔn)：既往有盆腔手術(shù)史;合并糖尿病、高血壓、冠心病等基礎(chǔ)疾病者;認(rèn)知功能障礙者;妊娠婦女。按隨機(jī)數(shù)字表法分為兩組，對照組41例，年齡35～68歲，平均（45.32±2.45）歲;腫瘤直徑4～10 cm，平均（5.48±1.23）cm;按FIGO分期：IIb期15例，IIIa期17例，IIIb期9例;病理分型：宮頸癌鱗癌27例，腺癌9例，鱗腺癌5例。研究組41例，年齡36～68歲，平均（45.46±2.51）歲;腫瘤直徑5～10 cm，平均（5.52±1.27）cm;按FIGO分期：IIb期17例，IIIa期16例，IIIb期8例;病理分型：宮頸癌鱗癌25例，腺癌10例，鱗腺癌6例。兩組年齡、腫瘤直徑、FIGO分期及病理分型比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。所選患者及其家屬均簽署知情同意書，且經(jīng)醫(yī)院倫理學(xué)委員會批準(zhǔn)。

1.2? 方法

對照組：采用6MV-X直線加速器，對盆腔前后野進(jìn)行照射，每周放療5次，每次劑量為2.0 Gy，總劑量為50 Gy;后程給予盆腔中心40 mm×10 mm鉛擋，繼而補(bǔ)充腔內(nèi)后裝治療，每周1次，治療3周為1個(gè)療程，共治療3～4個(gè)療程。

研究組：治療第1天，靜脈滴注紫杉醇（國藥準(zhǔn)字H20063787）135 mg/m2，靜脈滴注卡鉑（國藥準(zhǔn)字H20020181），該藥物用藥劑量按AUC=5靜滴進(jìn)行計(jì)算，用藥3周/次，治療3周為1個(gè)療程，共治療3～4個(gè)療程，靜脈滴注紫杉醇藥物6 h、12 h前，均靜脈注射地塞米松（國藥準(zhǔn)字H35021170）10 mg，同時(shí)化療前給予止吐處理?；熀蟮?天，開始給予放射治療，其方法同對照組。

1.3? 觀察指標(biāo)

①觀察兩組臨床療效，參WHO的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，完全緩解：病灶完全消失;部分緩解：病灶縮小>50%;穩(wěn)定：病灶縮小25%～50%，未見新病灶;進(jìn)展：病灶縮小<25%，且出現(xiàn)新病灶，有效緩解率=（完全緩解+部分緩解）/總例數(shù)×100.00%。②治療前后取病理組織，經(jīng)石蠟處理后，連續(xù)切片，經(jīng)免疫組織化學(xué)SP法后，在高倍顯微鏡下觀察患者微血管密度（Microvascular dengsity，MVD）及微淋巴管密度（Lymphatic vesed density，LVD）變化。③采取Transwell遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)檢測宮頸癌患者細(xì)胞體外侵襲能力的變化，取宮頸癌細(xì)胞株Hela，將其置于含有10%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，細(xì)胞常規(guī)傳代貼壁后，在培養(yǎng)基中加入紫杉醇、卡鉑藥物，作用1 h后取細(xì)胞。提取細(xì)胞及宮頸組織總RNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄酶鏈反應(yīng)（PCR反應(yīng)條件為94℃，30 s;54℃，40 s;72℃，60 s），隨后采取Western blot法測定Rock-1、p-codinlin蛋白表達(dá)。開展Transwell遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)，將ECMatric膠平鋪于小室底部，取出小室，將無血清RPMI 1640培養(yǎng)基置于上室內(nèi)，在37℃條件下放置2 h，水化ECM膜后，移除培養(yǎng)基。將含有10%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基填充室的下室每孔，上室孔加入細(xì)胞濃度為1×106個(gè)/mL的細(xì)胞懸液，培養(yǎng)24 h后，取出上室，膜上層膠用棉簽擦拭。將小室置于500 μL染液中處理20 min，使底膜上侵襲的細(xì)胞染色，隨后用水漂洗3～4次，空氣中干燥。染色的細(xì)胞用10%乙酸溶解，隨后轉(zhuǎn)移至96孔板，在560 nm處讀取OD值。

1.4? 統(tǒng)計(jì)方法

數(shù)據(jù)SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件中完成處理，計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，采用χ2檢驗(yàn);計(jì)量資料用（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2? 結(jié)果

2.1? 臨床療效

研究組有效緩解率比對照組升高，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2? 治療前后血管生成情況

兩組治療后MVD、LVD值較治療前均有所下降，但觀察組MVD、LVD值較對照組下降更為明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;兩組治療前MVD、LVD值比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見表2。

注：與治療前相比，*P<0.05

2.3? 侵襲能力

研究組Rock-1、p-codinlin蛋白表達(dá)均低于對照組，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;對照組OD值為（4.64±0.15），研究組OD值為（3.01±0.09），組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=54.333，P=0.000），見表3、圖1。

3? 討論

紫杉醇是一種新型抗腫瘤藥物，其作用機(jī)制是通過可逆性結(jié)合腫瘤細(xì)胞微管，促進(jìn)微管聚合，抑制DNA有絲分裂，使腫瘤細(xì)胞的功能發(fā)生障礙，可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡[4-5]?？ㄣK作為細(xì)胞周期非特異性的鉑類化合物，通過誘導(dǎo)DNA鏈間與鏈內(nèi)交聯(lián)，擾亂細(xì)胞內(nèi)DNA分子，并干擾DNA合成，可起到殺滅腫瘤細(xì)胞的作用?？ㄣK的生化物與順鉑基本相似，但其所產(chǎn)生的毒副反應(yīng)明顯低于順鉑，其是目前臨床治療宮頸癌的主要化療藥物，與紫杉醇化療藥物聯(lián)合應(yīng)用，可明顯增強(qiáng)其抗腫瘤作用[6-7]。目前，臨床主張同步放化療治療宮頸癌，其作用機(jī)制是通過化療藥物，改善腫瘤細(xì)胞的乏氧狀態(tài)，同時(shí)讓放化療的敏感期與腫瘤細(xì)胞同步，不僅可起到放療增敏作用，也可緩解病灶進(jìn)展。湯艷祥等[8]研究報(bào)道，中晚期宮頸癌患者采取放療聯(lián)合紫杉醇、卡鉑同步化療可取得良好效果，有效緩解率高達(dá)60%以上，且耐受性好。該研究顯示，研究組治療有效緩解率60.98%高于對照組39.02%，這與宋丹等[9]報(bào)道結(jié)果相似。由此可見，在宮頸癌治療中，采取紫杉醇聯(lián)合卡鉑同步放療治療手段，可取得一定效果，能控制患者病情進(jìn)展。

近年，MVD、LVD在宮頸癌化療中的作用已成為臨床研究的熱點(diǎn)。有研究報(bào)道[10]，腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及術(shù)后病灶轉(zhuǎn)移與血管生成密切相關(guān)，且在宮頸癌發(fā)病過程中均伴有腫瘤血管的生成。因此，MVD常被作為評價(jià)腫瘤血管生成的關(guān)鍵指標(biāo)。有研究報(bào)道[11-12]，LVD與腫瘤臨床分期密切相關(guān)，同時(shí)在癌旁組織中該指標(biāo)明顯升高。故LVD可作為反映宮頸癌病情進(jìn)展的一個(gè)獨(dú)立預(yù)后指標(biāo)。該研究顯示，兩組治療后MVD、LVD值均有所下降，但研究組MVD、LVD值的下降幅度更為明顯（P<0.05）。這進(jìn)一步證實(shí)，紫杉醇聯(lián)合卡鉑同步化療可控制患者病情進(jìn)展，抑制腫瘤血管的生成。針對惡性腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移，其主要是通過改變細(xì)胞骨架來影響腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)。有研究報(bào)道[13-14]，Rock-1蛋白活性的提高，可改變細(xì)胞骨架，進(jìn)而影響細(xì)胞運(yùn)動(dòng)。其中Cofilin蛋白是一種肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白，主要存在于真核細(xì)胞中，其活性主要依賴于Ser-3位點(diǎn)的磷酸化，從而參與調(diào)解肌動(dòng)蛋白骨架的重組，進(jìn)而影響細(xì)胞運(yùn)動(dòng)。該研究顯示，研究組Rock-1、p-cofilin蛋白表達(dá)均低于對照組，且OD值下降，這與張立等[15]報(bào)道結(jié)果相似。由此可見，通過藥物抑制Rock-1的作用及p-cofilin蛋白活性，可減少細(xì)胞侵襲能力。

綜上所述，宮頸癌是女性常見的惡性腫瘤，發(fā)病率較高，早診斷、早發(fā)現(xiàn)、早治療，對控制患者病情進(jìn)展有著非常重要的意義。而紫杉醇聯(lián)合卡鉑同步放療是現(xiàn)階段臨床治療宮頸癌的主要手段，通過殺傷腫瘤細(xì)胞，抑制腫瘤生長、轉(zhuǎn)移，不僅可減少腫瘤血管的生成，同時(shí)可降低細(xì)胞侵襲能力，具有良好的應(yīng)用效果。

[參考文獻(xiàn)]

[1]? 王蘭.新輔助化療治療宮頸癌的療效評價(jià)[J].實(shí)用藥物與臨床，2016，19（8）：952-955.

[2]? 王靜，羅小瓊，陳升才.紫杉醇聯(lián)合奈達(dá)鉑動(dòng)脈介入栓塞治療宮頸鱗癌的療效及其對微血管和微淋巴管密度的影響[J].實(shí)用藥物與臨床，2016，19（3）：287-291.

[3]? 陳艷輝.紫杉醇聯(lián)合卡鉑化療并同步放療治療中晚期宮頸癌近期及遠(yuǎn)期療效[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生，2015，53（4）：52-54.

[4]? 王驍，徐曉婷，李莉，等.不同放化療方案治療宮頸癌患者的臨床療效[J].腫瘤，2015，35（6）：653-659.

[5]? 趙靜，張曉彤，胡克，等.紫杉醇聯(lián)合卡鉑三周方案同步胸部放療治療不宜手術(shù)的局部晚期非小細(xì)胞肺癌療效和安全性研究：一項(xiàng)來自單中心的回顧性研究[J].中國肺癌雜志，2016，19（11）：731-737.

[6]? 陸英華，吳亦波. TC化療聯(lián)合放療治療術(shù)后高危子宮內(nèi)膜癌的療效觀察[J].現(xiàn)代藥物與臨床，2014，29（11）：1253-1256.

[7]? 袁秀英，劉燕燕，劉小媚，等.紫杉醇、卡鉑化療聯(lián)合放療在中晚期宮頸癌患者中的效果[J]. 廣東醫(yī)學(xué)，2017，38（1）：242-243.

[8]? 湯艷祥，陳亦樂，唐潔，等.放療聯(lián)合紫杉醇、卡鉑同步化療治療中晚期宮頸癌的臨床療效[J]. 熱帶醫(yī)學(xué)雜志， 2015，15（10）：1359-1361.

[9]? 宋丹，孔為民.紫杉醇聯(lián)合卡鉑治療晚期及復(fù)發(fā)性宮頸癌的可行性研究[J].實(shí)用癌癥雜志， 2016， 31（3）：421-424.

[10]? 李雪，孔為民，韓超，等.Ⅰb2和Ⅱa2期子宮頸癌患者以手術(shù)為主的不同治療方案的前瞻性隨機(jī)對照研究[J].中華婦產(chǎn)科雜志，2016，51（7）：524-529.

[11]? 李梅菊.不同新輔助化療方案對局部宮頸癌的治療效果分析[J].海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2015，21（11）：1578-1580.

[12]? 盧建軍，張林燕.紫杉醇與順鉑聯(lián)合化療治療宮頸癌的療效及與組織微血管和微淋巴管密度的關(guān)系[J].中國生化藥物雜志，2014，34（5）：92-94.

[13]? 閆莉，張靜，杜文芳，等.紫杉醇聯(lián)合卡鉑化療同步放療治療中晚期宮頸癌的近期療效觀察[J].中國生化藥物雜志，2017，37（11）：143-144.

[14]? 李慧，郭榮，岳莎莎，等.紫杉醇聯(lián)合卡鉑同期放療對高危險(xiǎn)早期宮頸癌患者術(shù)后的臨床療效及安全性研究[J].中國實(shí)用醫(yī)藥，2016，11（35）：17-19.

[15]? 張立，谷建俐.姜黃素與卡鉑聯(lián)合用藥對肺癌細(xì)胞遷移和侵襲的影響[J].解放軍預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2017，35（08）：928-931.

（收稿日期：2020-03-09）