2074例羊水染色體核型分析及其產(chǎn)前診斷的意義探討

黃 璇

（北海市婦幼保健院，北海市產(chǎn)前診斷分中心，廣西 北海 536000）

胎兒發(fā)育畸形、流產(chǎn)、死胎和其他遺傳綜合征的內(nèi)在因素大多數(shù)是染色體異常所致，染色體異常是新生兒出生缺陷的最多的一類遺傳性疾病[1]。而羊膜腔穿刺及羊水細胞核型分析是目前臨床上使用最為廣泛、最為安全和經(jīng)濟的產(chǎn)前診斷方法[2]，運用該種產(chǎn)前診斷方法對于出生缺陷的診斷具有較為重要的意義。本研究總結(jié)了我院產(chǎn)前診斷分中心在2015年1月至2018年12月，選取2074例具有產(chǎn)前篩查高風(fēng)險、無創(chuàng)DNA篩查高風(fēng)險、高齡（孕婦年齡≥35歲）、產(chǎn)前篩查臨界風(fēng)險、有不良孕產(chǎn)史和孕期不良接觸史的5種產(chǎn)前診斷指征的高危孕婦，采用羊膜腔穿刺術(shù)抽取羊水進行羊水細胞培養(yǎng)，通過羊水染色體核型分析方法來確診異常染色體核型，從而提高檢測率，減少出生缺陷的發(fā)生。現(xiàn)將2074例孕婦羊水染色體核型結(jié)果分析及其產(chǎn)前診斷意義報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取2015年1月至2018年12月在我院產(chǎn)前診斷分中心進行羊膜腔穿刺術(shù)的2076例孕婦作為研究對象。孕婦年齡18～47歲，孕周18～22+6周，產(chǎn)前診斷指征包括以下5種：產(chǎn)前篩查高風(fēng)險；無創(chuàng)DNA篩查高風(fēng)險；高齡（孕婦年齡≥35歲）；產(chǎn)前篩查臨界風(fēng)險；有不良孕產(chǎn)史和孕期不良接觸史。

1.2 方法：孕婦在B超引導(dǎo)下，常規(guī)消毒鋪無菌孔巾，經(jīng)腹行羊膜腔穿刺術(shù)，抽取羊水20 mL，將羊水細胞進行培養(yǎng)、消化法收獲、染色體制備及G顯帶核型分析。根據(jù)人類細胞遺傳學(xué)國際命名體制（ISCN2013）命名法描述核型。孕婦在羊膜腔穿刺術(shù)前均已簽署產(chǎn)前診斷告知同意書并了解手術(shù)的風(fēng)險。

2 結(jié)果

2.1 染色體核型異常率和種類：對有產(chǎn)前診斷指征的2076例羊水細胞進行培養(yǎng)，培養(yǎng)成功2074例，成功率99.91%，檢出染色體異常核型98例，異常率4.73%。異常染色體核型中常染色體三倍體50例，占異常檢出率51.02%；常染色體三倍體中21-三體41例，占異常檢出率41.84%；性染色體三體及單體10例，占異常檢出率10.20%；易位和倒位及缺失25例，占異常檢出率25.51%；染色體多態(tài)性5例，占異常檢出率5.10%，嵌合體8例，占異常檢出率8.16%。見表1。

表1 染色體核型異常結(jié)果

2.2 染色體異常核型與產(chǎn)前診斷指征的關(guān)系：成功培養(yǎng)2074例病例，檢測出染色體異常核型共98例，其中，產(chǎn)前診斷指征是無創(chuàng)DNA高風(fēng)險確診染色體異常35例，占35.71%，發(fā)生率最高；其次指征是產(chǎn)前篩查高危確診染色體異常27例，占27.55%；指征是高齡（孕婦年齡≥35歲）確診染色體異常25例，占25.51%，指征是不良孕產(chǎn)史和孕期不良接觸史確診染色體異常7例，占7.14%。見表2。

3 討 論

染色體病是由于染色體異常所致的一類遺傳性疾病，新生兒表現(xiàn)為智力低下和畸形等，據(jù)報道我國新生活嬰中染色體異常者約占0.73%[3]。本研究成功進行羊水培養(yǎng)病例共2074例，檢出染色體異常核型98例，異常率4.73%，與近年國內(nèi)相關(guān)文獻報道接近[4-5]，因此選取有產(chǎn)前診斷指征的高風(fēng)險孕婦進行羊膜腔穿刺術(shù)抽取羊水進行核型分析，針對性較高，可以提高產(chǎn)前診斷的檢測率。絕大部分染色體異常疾病均是無法治療，因此只有在孕早期或中期采用不同的產(chǎn)前診斷檢測方法，結(jié)果有異常時而及時終止妊娠，才能達到減少出生缺陷的發(fā)生。本研究檢測胎兒染色體異常核型的98例孕婦均在知情同意下終止妊娠，極大地減少近幾年我市出生缺陷的發(fā)生。

表2 染色體異常與產(chǎn)前診斷指征

本研究檢測出98例染色體異常核型，其中常染色體三體50例（包括13-三體、18-三體和21-三體），占51.02%，異常檢測率最高。胎兒的染色體表型為常染色體三體，出生后有嚴重缺陷，經(jīng)過遺傳咨詢后一般都建議終止妊娠。異常染色體三體中，其中21-三體41例，占異常染色體核型的41.84%，發(fā)生率最高。21-三體綜合征，也稱唐氏綜合征，是活產(chǎn)新生兒最常見的染色體病，其發(fā)生率在活產(chǎn)新生兒中為1/（600～800）[6]。唐氏綜合征是由于21號染色體三體所導(dǎo)致的疾病，是一種偶發(fā)性的染色體疾病，即使是唐氏綜合征的患兒，其父母雙方的染色體也可能是正常的。任何年齡段的孕婦都有生育唐氏綜合征患兒的可能，謝良玉等研究表明[7]，孕婦高齡（年齡≥35歲），生育唐氏綜合征患兒的風(fēng)險增加。也有研究表明，生育唐氏兒的高危因素是孕婦的年齡和胎兒21號染色體不分離，但多數(shù)研究認為，遺傳易感性是低齡孕婦生育唐氏兒的主要因素，而易感性的發(fā)生與葉酸代謝相關(guān)酶基因的突變有關(guān)，導(dǎo)致葉酸代謝異常是由于母體中葉酸代謝相關(guān)基因的多態(tài)性，并且引起21號染色體的重組和分離的關(guān)鍵部位的甲基化模式[8-9]。先天性智力障礙，特殊面容，精神體格發(fā)育遲滯，生活不能自理，并伴有其他嚴重的多發(fā)畸形，先天性心臟病等是唐氏兒的臨床特征。家庭和社會因為唐氏兒的出生而導(dǎo)致負擔(dān)加重，因此妊娠期確診后一般建議終止妊娠。

本研究產(chǎn)前診斷指征是無創(chuàng)DNA篩查高風(fēng)險的病例共45例，檢測出染色體異常35例，異常率為35.71%，異常發(fā)生率最高。無創(chuàng)DNA篩查的方法是：孕婦在孕早期、中期（最好孕周達12周后），抽取外周靜脈血，提取胎兒游離DNA，通過高通量測序技術(shù)和結(jié)合生物信息分析，計算出胎兒染色體非整倍體疾?。?1-三體，18-三體，13-三體）的風(fēng)險率[10]。無創(chuàng)取樣，無流產(chǎn)風(fēng)險，高靈敏度，準確性高是無創(chuàng)DNA篩查的優(yōu)點。無創(chuàng)DNA篩查與羊膜腔穿刺術(shù)產(chǎn)前診斷比較，具有無創(chuàng)取樣（抽取孕婦外周血），無流產(chǎn)的風(fēng)險，因此對于不適宜行羊膜腔穿刺術(shù)的高危孕婦是首選的檢測方法。可見該檢測方法準確性較高，尤其對于常染色體三體的病例，檢測率較高。在經(jīng)濟條件發(fā)達的地區(qū)，如果孕婦經(jīng)濟條件允許的情況下，可以先嘗試用無創(chuàng)DNA篩查替代普通血清學(xué)篩查，避免孕婦第一次抽血檢測普通血清學(xué)篩查，若血清學(xué)篩查高風(fēng)險后又需要再次抽血檢測無創(chuàng)DNA篩查，可避免兩次抽血篩查。另外，對于曾生育過唐氏綜合征的患兒，年齡＞35歲，其父母一方為羅伯遜易位攜帶者的這部分高危孕婦，可以不做血清學(xué)篩查，直接做無創(chuàng)DNA篩查[11]。

本研究產(chǎn)前診斷指征是產(chǎn)前篩查高風(fēng)險的病例共901例，檢測出染色體異常27例，異常率為27.55%，異常發(fā)生率為第二位。產(chǎn)前篩查的方法是：孕周達到15～20周+6的孕婦，簽署知情告知同意書后，常規(guī)抽取靜脈血2 mL，離心后取血清進行檢測。我院產(chǎn)前診斷分中心采用血清甲胎蛋白（AFP）、人絨毛膜促性腺激素游離β亞單位（f-βhCG）、游離雌三醇（UE3）定量化學(xué)發(fā)光法，按照操作說明書的檢測程序進行，根據(jù)孕婦的年齡、體質(zhì)量，結(jié)合末次月經(jīng)和B超測量實際孕周大小估算出實際的孕周，結(jié)合孕婦有無糖尿病史和有無吸煙史等，利用軟件進行綜合評估和計算，得出唐氏綜合征、18-三體綜合征和神經(jīng)管缺陷的切割值，并根據(jù)各項高風(fēng)險的切割值判定高風(fēng)險的孕婦?？梢娫兄衅谶M行血清學(xué)篩查是進行產(chǎn)前診斷前必不可少的方法，對產(chǎn)前篩查高風(fēng)險的孕婦再次進行產(chǎn)前診斷，能避免盲目性，針對性高，篩查出高危病例后再進行診斷，能提高診斷率，而且產(chǎn)前篩查是屬于二級預(yù)防保健項目，屬于基本公共衛(wèi)生項目，各地方均出臺有相關(guān)的補助政策，從而減輕孕婦經(jīng)濟負擔(dān)。

本研究產(chǎn)前診斷指征是高齡孕婦736例，發(fā)生染色體異常25例，異常率為25.51%，異常發(fā)生率為第三位。孕婦高齡被認為是產(chǎn)前診斷的指征，隨著我國生育年齡的不斷推遲和二胎政策的開放，高齡孕婦呈逐年上升趨勢。高齡的孕婦可發(fā)生卵細胞染色體的紡錘體老化，并引起染色體不分離的頻率增高，隨之染色體三體發(fā)生率增高。高齡是導(dǎo)致胎兒非整倍體風(fēng)險增加的重要因素之一[12]。國內(nèi)研究認為對血清學(xué)篩查陽性的患者再行羊膜腔穿刺術(shù)的方案，效價比高于高齡孕婦均行羊膜腔穿刺術(shù)[13]。我院產(chǎn)前診斷分中心接診的高齡孕婦（年齡≥35歲），尤其是部分年齡≥40歲的孕婦，可以不經(jīng)過血清學(xué)產(chǎn)前篩查，而建議在孕中期直接行羊膜腔穿刺術(shù)抽取羊水進行染色體核型分析。

綜上所述，羊水染色體核型分析是目前開展較廣范，安全性較高而有效的產(chǎn)前診斷方法之一。針對有無創(chuàng)DNA高風(fēng)險、產(chǎn)篩高風(fēng)險、高齡（孕婦年齡≥35歲）產(chǎn)前診斷指征的高危孕婦進行羊水染色體核型分析，檢測出染色體異常核型的異常率均較高。因此，對有產(chǎn)前診斷指征的高危孕婦有針對性的進行羊水染色體核型檢測，可以提高檢測率，對降低出生缺陷，提高出生人口素質(zhì)有重大意義。