EML4—ALK融合基因與EGFR基因突變?cè)诜蜗侔┲械谋磉_(dá)

肖勝霞 沈洋 郭麗霞 張國(guó)鋒 周雷貴

【摘 ? 要】 目的 ?探討肺腺癌EML4-ALK融合基因與EGFR基因突變?cè)诜蜗侔┲械谋磉_(dá)。方法 ?選取我院2012年6月—2014年5月診治的肺腺癌患者30例作為本次研究對(duì)象，采用原位熒光雜交法（FISH）對(duì)患者組織標(biāo)本分別進(jìn)行EML4-ALK融合基因與EGFR基因突變檢測(cè)，并分析與臨床病理特征的相關(guān)性。結(jié)果 ?肺腺癌病理組織中EML4-ALK融合基因陽(yáng)性2例，陽(yáng)性表達(dá)率為6.67%（2/30）;EGFR基因突變17例，基因突變率56.67%（17/30）;女性突變率70.59%（12/17），男性41.67%（5/12）;不吸煙者突變率68.75%（11/16），吸煙者42.86%（6/14）;60歲以下突變率78.57%（11/14），60歲及以上31.25%（5/16）。EML4-ALK融合基因與EGFR基因突變的相關(guān)性分析顯示，二者之間呈負(fù)相關(guān)（R=-0.262，P=0.048）。結(jié)論 ?EML4-ALK融合基因在肺腺癌中低表達(dá)，EGFR基因突變高表達(dá)，兩者呈負(fù)相關(guān)。

【關(guān)鍵詞】 EML4-ALK融合基因;EGFR基因突變;肺腺癌

【中圖分類(lèi)號(hào)】 R734.2 ? ?【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A

肺癌是臨床常見(jiàn)惡性腫瘤之一，其中NSCLC約占肺癌的4/5左右，嚴(yán)重威脅到患者的生命安全[1]。隨著對(duì)肺腺癌研究的不斷深入，特異性高、不良反應(yīng)輕的分子靶向藥物逐漸成為行業(yè)研究的新方向，也就是說(shuō)，當(dāng)前肺癌治療的模式已經(jīng)向基于基因組特征的個(gè)體化治療模式轉(zhuǎn)變[2]。本文將30例肺腺癌患者納為研究對(duì)象，采用原位熒光雜交法對(duì)患者組織標(biāo)本進(jìn)行EML4-ALK融合基因與EGFR基因突變檢測(cè)，探討二者相關(guān)性?，F(xiàn)將具體情況報(bào)導(dǎo)如下。

1 ?資料與方法

1.1 ?一般資料 ?①對(duì)象選取：選取我院2012年6月—2014年5月診治的肺腺癌患者30例作為本次研究對(duì)象;其中，男性患者13例，年齡最小34歲，最大74歲，平均年齡（53.5±3.5）歲;女性患者17例，最小年齡35，最大76歲，平均年齡（54.5±4.0）歲。②病情分布：30例研究對(duì)象經(jīng)病理確診為NSCLC，I期患者7例，II期患者9例，III期患者9例，IV期患者5例。③全30例研究對(duì)象的年齡、性別、病情程度等一般臨床資料均經(jīng)我院核實(shí)，符合客觀性、科學(xué)性要求，具有觀察、分析、研究?jī)r(jià)值。

1.2 ?方法 ?①用EGFR基突變檢測(cè)試劑盒檢測(cè)表皮生長(zhǎng)因子受體基因18-21外顯子29種突變。②用原位熒光雜交法檢測(cè)EML4-ALK融合基因。判斷標(biāo)準(zhǔn)：計(jì)數(shù)100個(gè)完整細(xì)胞，異常細(xì)胞數(shù)量達(dá)到15個(gè)以上為陽(yáng)性。

1.3 ?統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 ?本次研究相關(guān)數(shù)據(jù)用SPSS13.0數(shù)據(jù)包進(jìn)行處理，EML4-ALK陽(yáng)性數(shù)量、EGFR基因突變數(shù)量均為客觀研究數(shù)據(jù)，EML4-ALK陽(yáng)性數(shù)比例、EGFR基因突變比例以率（%）表示，相關(guān)性分析用連續(xù)X2檢驗(yàn)，以P<0.05差異為存有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 ?結(jié)果

2.1 ?EML4-ALK ?30例肺腺癌病理組織中共檢出EML4-ALK融合基因陽(yáng)性2例，陽(yáng)性表達(dá)率為6.67%（2/30）。2例EML4-ALK融合基因陽(yáng)性病人皆為女性，無(wú)吸煙史，年齡都<60歲。

2.2 ?EGFR基因突變 ?30例研究對(duì)象中，EGFR基因突變17例，基因突變率56.67%（17/30）。其中，女性突變率70.59%（12/17），高于男性的41.67%（5/12）;不吸煙者突變率68.75%（11/16），高于吸煙者42.86%（6/14）;60歲以下突變率78.57%（11/14），高于60歲及以上31.25%（5/16）。

2.3 ?EML4-ALK融合基因和EGFR基因突變?cè)诜蜗侔┲械谋磉_(dá) 30例研究對(duì)象中，共有1例對(duì)象的EML4-ALK和EGFR監(jiān)測(cè)結(jié)果均為陽(yáng)性。進(jìn)行相關(guān)性分析后發(fā)現(xiàn)兩者間存有一定的負(fù)相關(guān)關(guān)系（R=-0.262，P=0.048），但因研究數(shù)量較少，需要增加樣本數(shù)量開(kāi)展進(jìn)一步驗(yàn)證。具體報(bào)告見(jiàn)表1。

3 ?討論

EML4-ALK最初由Soda等于2007年發(fā)現(xiàn)，并于2008年建立了肺泡上皮細(xì)胞特異性表達(dá)EML4-ALK融合蛋白的轉(zhuǎn)基因小鼠模型，證實(shí) EML4-ALK融合基因可抑制腫瘤的生長(zhǎng)，為肺腺癌的臨床治療提供的潛在靶點(diǎn)[3-5]。此后，Perner等將600例非小細(xì)胞癌患者納為研究對(duì)象，采用原位熒光雜交法對(duì)患者的EML4-ALK基因情況進(jìn)行檢測(cè)，共發(fā)現(xiàn)融合基因16例，結(jié)果表明：融合基因的發(fā)生率為2.7/100，要比Soda之前報(bào)道的6.7/100低一些[6-8]。張緒超等對(duì)103例小細(xì)胞癌癥患者的術(shù)后標(biāo)本進(jìn)行研究，使用RACE-PCR法檢測(cè)出EML4-ALK陽(yáng)性12例，占檢測(cè)例數(shù)的11.6%，進(jìn)一步分析顯示與EGFR基因突變者相比，EML4-ALK融合基因更多發(fā)生于男性、無(wú)吸煙嗜好的患者;在具有這些臨床特征但未檢出EGFR基因突變肺癌患者中，約33%可能攜帶 EML4-ALK融合基因型[9，10]。

在本次研究中，30例肺腺癌病理組織中共檢出EML4-ALK融合基因陽(yáng)性2例，陽(yáng)性表達(dá)率為6.67%（2/30）。2例EML4-ALK融合基因陽(yáng)性病人皆為女性，無(wú)吸煙史，年齡都在60歲以上。30例研究對(duì)象中，EGFR基因突變17例，基因突變率56.67%（17/30）。其中，女性突變率70.59%（12/17），高于男性的41.67%（5/12）;不吸煙者突變率68.75%（11/16），高于吸煙者42.86%（6/14）;60歲以下突變率78.57%（11/14），高于60歲及以上31.25%（5/16）。EML4-ALK融合基因與EGFR基因突變?cè)诜蜗侔┲械谋磉_(dá)呈一定負(fù)相關(guān)，由于本研究樣本量偏小，尚待擴(kuò)大樣本量后的進(jìn)一步佐證。

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