位詩(shī)棋, 房 雪, 丁東玲, 劉慧敏, 龔澤慧, 鄭 艷
(1.安徽師范大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院,安徽 蕪湖 241000;2.安徽師范大學(xué) 中藥資源研究所,安徽 蕪湖 241000;3.安徽省中藥日化產(chǎn)品工程技術(shù)研究中心,安徽 蕪湖 241000)
電梯作為流動(dòng)頻繁的重要場(chǎng)所,其按鈕攜帶各類(lèi)細(xì)菌,清潔問(wèn)題備受關(guān)注。目前,我國(guó)市面上的電梯按鈕清洗產(chǎn)品分為兩大類(lèi),第一類(lèi)產(chǎn)品通過(guò)物理機(jī)制如沖洗、摩擦的方法對(duì)按鈕進(jìn)行表面清潔,紫外線照射[1]破壞微生物細(xì)胞核酸結(jié)構(gòu)進(jìn)行殺菌消毒;第二類(lèi)產(chǎn)品采用化學(xué)試劑以酸洗[2]、堿洗和溶劑清洗三種方式最為常見(jiàn)。但物理清潔無(wú)法做到長(zhǎng)時(shí)間抑菌,化學(xué)清潔會(huì)對(duì)按鈕造成不小的損傷且會(huì)對(duì)環(huán)境造成不可逆的破壞。中草藥及其組合物對(duì)電梯按鈕無(wú)腐蝕,且具備去污清潔、除菌抑菌的功效,因而被用于按鈕清潔劑的研究開(kāi)發(fā)中。
中草藥組合物:中藥浸提液a是將黃連、黃芩、金銀花、苦參、紫蘇、丹皮中的一種或幾種按比例混合后,加入5~20倍的去離子水浸泡12h~48h,一定條件下熬制得到中藥浸提初液,濃縮至0.5~3.0g/mL得到,中藥浸提液b是將姜、桔、山蒼子、柚、橙、檸檬中的部分或全部按比例混合,然后加入混合物質(zhì)量份的5~10倍1%~95%浸提液,浸泡4h~36h后提取得到,由安徽省中藥日化產(chǎn)品工程技術(shù)研究中心提供(專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)枺?01811183366.1),其中藥材原料由安徽師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院中藥資源研究所/安徽省中藥日化產(chǎn)品工程技術(shù)研究中心鄭艷教授鑒定;供試菌株:大腸桿菌(Escherichiacoli)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、綠膿桿菌(Pseudomonasaeruginosa)、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis),由安徽師范大學(xué)中藥資源研究所微生物資源庫(kù)提供;轎廂電梯按鈕菌懸液:用無(wú)菌棉簽擦拭電梯按鈕,然后將棉簽的頭部用無(wú)菌剪刀剪入無(wú)菌水中,震蕩,制備菌懸液,取自安徽師范大學(xué)圖書(shū)館轎廂電梯;人工油污以及標(biāo)準(zhǔn)溶液的具體制備方法參見(jiàn)GB/T 9985-2000《手洗餐具用洗滌劑》;試片的制備方法參見(jiàn)GB/T 27728-2011《濕巾》附錄C。電子天平,上海浦春計(jì)量?jī)x器有限公司;數(shù)顯恒溫水浴鍋,上海葉拓儀器儀表有限公司;立式壓力蒸汽滅菌器,上海申安醫(yī)療器械廠。
1.2.1 無(wú)腐蝕性的測(cè)定 取金屬試片18組,每組5個(gè)金屬片。其中9組浸泡在自來(lái)水中,另9組浸泡在等量的實(shí)驗(yàn)溶液中,同時(shí)標(biāo)記4h/12h/24h三個(gè)時(shí)間組,每3組為一平行。實(shí)驗(yàn)操作前,用電子天平稱(chēng)取每組金屬片的質(zhì)量,實(shí)驗(yàn)操作后,分別在4h、12h、24h記錄每組金屬試片的質(zhì)量。
1.2.2 去污率的測(cè)定 將盛有300mL試驗(yàn)溶液稀釋液的燒杯放置于30℃恒溫水浴中,將試片浸入試驗(yàn)溶液稀釋液中3min,擺洗3min,然后再浸入400mL蒸餾水(30℃)擺洗30s。之后掛晾烘干、稱(chēng)重。同樣以標(biāo)準(zhǔn)溶液、蒸餾水為對(duì)照組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
1.2.3 抑菌效果的測(cè)定 采用牛津杯法:在牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基上分別均勻涂布200μL大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、枯草芽孢桿菌菌懸液。等距離放置無(wú)菌牛津杯,并在杯內(nèi)分別注入200μL中草藥組合物,每組做3個(gè)平行。蒸餾水作空白對(duì)照。于37℃恒溫箱中培養(yǎng)24h后,測(cè)量各組的抑菌圈直徑,取其平均值。采用涂布平板法:將滅菌的牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中,待凝固后均勻涂布200μL轎廂電梯按鈕菌懸液,制成帶菌平板。然后向其中加入200μL中草藥組合物均勻涂布。加入等量蒸餾水作對(duì)照組。待培養(yǎng)皿表面干燥后,于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)并觀察。每組做三個(gè)平行實(shí)驗(yàn)。
1.3.1 無(wú)腐蝕性測(cè)定 電子天平稱(chēng)取每組金屬片的質(zhì)量,記錄每組金屬試片的質(zhì)量變化。
1.3.2 去污率實(shí)驗(yàn) 試驗(yàn)溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液、蒸餾水分別測(cè)定3組金屬試片,按下式分別計(jì)算試驗(yàn)溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液的去污率。去污率X,以%表示,按下式計(jì)算:
X=(m1-m2)/(m1-m0)*100%
(1)
其中:m0——涂污前金屬試片的質(zhì)量,單位為g;
m1——涂污后金屬試片的質(zhì)量,單位為g;
m2——洗滌后金屬試片的質(zhì)量,單位為g。
以3個(gè)試片去污率的平均值表示結(jié)果,在3個(gè)試片的平行試驗(yàn)所得去油率值中,至少應(yīng)有兩個(gè)數(shù)值之差不超過(guò)3%,否則應(yīng)重新測(cè)定。采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件和Excel處理數(shù)據(jù),進(jìn)行平均值和方差的計(jì)算,對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性分析,以P<0.05為顯著性差異。
1.3.3 抑菌實(shí)驗(yàn) 將菌培養(yǎng)48h后,在第一塊平板上均勻畫(huà)取2cm×2cm的正方形區(qū)域3塊,計(jì)數(shù)正方形里的菌落數(shù)。在第二塊平板上均勻畫(huà)取4塊1cm×1cm的正方形,計(jì)數(shù)其中的菌落數(shù)。
將菌培養(yǎng)48h后,用直尺測(cè)量每個(gè)平板的抑菌圈直徑,求出平均值。
通過(guò)觀察,中草藥組合物處理前后,試片表面無(wú)明顯腐蝕點(diǎn)、無(wú)明顯變色,質(zhì)量變化均小于0.3mg(表1)。
表1 各樣品實(shí)驗(yàn)前后金屬片質(zhì)量變化及結(jié)論
試驗(yàn)溶液以及蒸餾水的去污力分別為26.36%、10.08%,本次實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)溶液的去污力為15.19%(表2)。試驗(yàn)溶液較標(biāo)準(zhǔn)溶液及蒸餾水去污率高。
表2 各樣品油污去除率
2.3.1 中草藥組合物對(duì)菌落生長(zhǎng)的抑制情況 使用中草藥組合物前后,菌落數(shù)目有明顯減少,除菌率=(446-2)/446×100%=99.55%(表3、4)。
表3 蒸餾水對(duì)照組菌落生長(zhǎng)情況
表4 中草藥組合物實(shí)驗(yàn)組菌落生長(zhǎng)情況
2.3.2 中草藥組合物對(duì)四種常見(jiàn)病原菌的抑制作用 中草藥組合物對(duì)四種常見(jiàn)的病原菌:綠膿桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌都有強(qiáng)抑制作用,抑菌圈均達(dá)到了20.0mm以上,其中對(duì)大腸桿菌的抑菌效果最強(qiáng),抑菌圈達(dá)到了28.5mm(表5)。
表5 中草藥組合物對(duì)四種常見(jiàn)病原菌的抑菌圈大小
根據(jù)GBT 27728-2011《濕巾》中附錄C可知,實(shí)驗(yàn)前后金屬試片的質(zhì)量變化不大于2.0mg,試片表面無(wú)明顯腐蝕點(diǎn)、無(wú)明顯變色,則為合格。分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知:自來(lái)水組實(shí)驗(yàn)前后金屬片質(zhì)量變化均小于0.9mg;使用該中草藥組合物在實(shí)驗(yàn)前后金屬片質(zhì)量變化均小于0.3mg,且表面無(wú)腐蝕點(diǎn)、無(wú)變色,即對(duì)電梯按鈕無(wú)腐蝕性。隨時(shí)間增加,金屬試片的質(zhì)量損失有減小趨勢(shì),分析原因可能為樣品中部分物質(zhì)附著于金屬試片,使得質(zhì)量損失減小。
以試驗(yàn)溶液(中草藥組合物)、標(biāo)準(zhǔn)溶液和蒸餾水為對(duì)照組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。試驗(yàn)溶液以及蒸餾水的去污力分別為26.36%、10.08%,本次實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)溶液的去污力為15.19%,去污實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明中草藥組合物的去污力高于標(biāo)準(zhǔn)洗滌劑的去污力,而蒸餾水的去污力低于標(biāo)準(zhǔn)洗滌劑的去污力。因此,中草藥組合物在去污力方面具有較好的效果,并且優(yōu)于標(biāo)準(zhǔn)洗滌劑(P<0.05),且中草藥組合物的去污力與蒸餾水對(duì)照組相比,差異極顯著(P<0.01)。
抑菌試驗(yàn)結(jié)果顯示使用中草藥組合物后,菌落數(shù)目明顯減少,除菌率達(dá)到99.55%。此外,在牛津杯抑菌實(shí)驗(yàn)中,中草藥組合物對(duì)綠膿桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌四種常見(jiàn)病原菌的抑菌圈均達(dá)到20.00mm以上,抑制作用較強(qiáng),其中,對(duì)大腸桿菌的抑菌圈達(dá)到了28.50mm。
本研究基于大量文獻(xiàn)查詢(xún)及前期研究工作,篩選出對(duì)綠膿桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌具有較強(qiáng)抑菌效果的中草藥[3-6],將其組合經(jīng)安全的生產(chǎn)工藝優(yōu)化處理后,制得環(huán)境友好型的中草藥組合物清潔劑。根據(jù)相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果表明其對(duì)金屬無(wú)腐蝕性,具有較強(qiáng)的去污和抑菌能力。同時(shí),本文中的實(shí)驗(yàn)方法操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確性較高,可以對(duì)清潔其它金屬類(lèi)型的產(chǎn)品提供參考。目前,筆者尚未見(jiàn)針對(duì)轎廂電梯按鈕清潔工作的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),近年來(lái)醫(yī)院、學(xué)校、居住商務(wù)樓等高層建筑的拔地而起帶動(dòng)了電梯行業(yè)的快速發(fā)展,醫(yī)院電梯上下樓層按鈕污染尤為嚴(yán)重[8-9],電梯日常維修保養(yǎng)的定義中把清潔放在了第一位,由此可見(jiàn),清潔工作在日常維修保養(yǎng)中具有舉足輕重的地位,并不是無(wú)關(guān)緊要的工作[10]。中草藥組合物可作為良好的轎廂電梯按鈕清洗劑,具有一定的應(yīng)用價(jià)值,值得進(jìn)一步推廣和進(jìn)行相關(guān)產(chǎn)品的深度研究開(kāi)發(fā)。
安徽師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)2020年4期