江門地區(qū)813例甲真菌病真菌培養(yǎng)結(jié)果分析

伍福恒 林珠玲 陳立新

【摘要】 目的 了解江門地區(qū)近3年甲真菌病真菌培養(yǎng)結(jié)果及菌種分布情況。方法 813例甲真菌病患者為研究對(duì)象， 觀察甲真菌病真菌培養(yǎng)結(jié)果， 比較真菌培養(yǎng)陽性患者不同部位、性別、臨床類型的菌屬分離結(jié)果。結(jié)果 813例患者中， 685例真菌培養(yǎng)陽性， 陽性率為84.26%。菌屬分離結(jié)果為皮膚癬菌391株（57.08%）、酵母菌258株（37.66%）、非皮膚癬菌性霉菌36株（5.26%）。菌種分離結(jié)果中以紅色毛癬菌為主， 白色念珠菌次之。685例真菌培養(yǎng)陽性患者中， 指甲233例（34.01%）、趾甲439例（64.09%）、混合感染13例（1.90%）。指甲優(yōu)勢菌為酵母菌136例（58.37%）， 趾甲優(yōu)勢菌為皮膚癬菌305例（69.48%）， 比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。男性優(yōu)勢菌為皮膚癬菌215例（71.43%）， 女性為酵母菌187例（48.70%）， 比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。遠(yuǎn)端側(cè)位甲下型（DLSO）型、淺表白甲型（SWO）型、全甲損毀型（TDO）型、甲板內(nèi)型（EO）型優(yōu)勢菌為皮膚癬菌， 分別為276例（66.99%）、50例（86.21%）、23例（45.10%）、9例（69.23%）， 甲下型（PSO）型為酵母菌， 105例（74.47%）， 黑色甲下甲真菌?。˙SO）型的主要病原菌為非皮膚癬菌性霉菌， 6例（60.00%）。各臨床類型間菌屬分離率比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 江門地區(qū)甲真菌病主要病原菌為皮膚癬菌， 酵母菌次之， 病原菌在不同部位、不同性別、不同臨床類型間的分離結(jié)果存在差異。

【關(guān)鍵詞】 甲真菌病;病原菌;皮膚癬菌;酵母菌

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.20.089

甲真菌病在國內(nèi)廣泛流行， 其發(fā)病率為3%～5%， 占淺部真菌病的30%左右[1]。甲真菌病主要分為6種臨床類型， 分別為近端PSO、SWO、EO、DLSO、TDO、BSO[2]， 其病原菌主要為皮膚癬菌、酵母菌和非皮膚癬菌性霉菌。有研究數(shù)據(jù)顯示[3]， 甲真菌病的病原菌分布發(fā)生了變化。為了解本地區(qū)甲真菌病病原菌分布情況， 作者對(duì)2016年10月～2019年10月本院診斷為813例甲真菌病患者的真菌培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析， 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院2016年10月～2019年10月收治的813例甲真菌病患者為研究對(duì)象， 所有病例均有典型臨床癥狀。其中男333例， 女480例， 年齡3～90歲。

1. 2 方法

1. 2. 1 標(biāo)本采集 選擇臨床癥狀典型的病甲為靶甲， 采集前用70%酒精清潔靶甲淺部損害部位， 從病甲變色、萎縮或變脆部位取材。刮取病甲近端碎屑， 取材范圍盡可能覆蓋全甲， 采用多位點(diǎn)取材， 多位點(diǎn)接種。對(duì)于PSO患者先除去表層甲板， 用無菌取材刀刮取甲下碎屑。

1. 2. 2 真菌培養(yǎng)及鑒定 多位點(diǎn)取材靶甲甲屑， 多位點(diǎn)接種于沙保氏瓊脂（SDA）培養(yǎng)基上， 置于25℃霉菌專用培養(yǎng)箱中， 每隔3 d觀察1次是否有病原菌生長， 連續(xù)4周無菌生長為陰性， 培養(yǎng)陽性標(biāo)本將病原菌分純后， 皮膚癬菌和非皮膚癬菌性霉菌采用麥芽汁瓊脂（MEA）和馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）培養(yǎng)基進(jìn)行小培養(yǎng)。依據(jù)菌落在SDA培養(yǎng)基和小培養(yǎng)上生長速度、形態(tài)特征和產(chǎn)生色素進(jìn)行初步鑒定。挑取部分菌落， 用乳酸酚棉藍(lán)染色后置于顯微鏡下觀察其形態(tài)結(jié)構(gòu)特征和分子孢子特征進(jìn)行菌種鑒定。酵母菌依據(jù)其菌落特征和法國梅里埃公司酵母菌鑒定試條（ID 32 C）檢測結(jié)果進(jìn)行菌種鑒定。

1. 3 觀察指標(biāo) 觀察甲真菌病真菌培養(yǎng)結(jié)果， 比較真菌培養(yǎng)陽性患者不同部位、性別、臨床類型的菌屬分離結(jié)果。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2 檢驗(yàn)。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 甲真菌病真菌培養(yǎng)結(jié)果 813例患者中， 685例真菌培養(yǎng)陽性， 陽性率為84.26%。菌屬分離結(jié)果為皮膚癬菌391株（57.08%）， 酵母菌258株（37.66%）、非皮膚癬菌性霉菌36株（5.26%）。菌種分離結(jié)果中以紅色毛癬菌為主， 白色念珠菌次之。見表1。

2. 2 甲真菌病在不同部位、不同性別、不同臨床類型的菌屬分離結(jié)果 685例真菌培養(yǎng)陽性患者中， 指甲233例（34.01%）、趾甲439例（64.09%）、混合感染13例（1.90%）。指甲優(yōu)勢菌為酵母菌136例（58.37%）， 趾甲優(yōu)勢菌為皮膚癬菌305例（69.48%）， 比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=8.324， P<0.05）。男性優(yōu)勢菌為皮膚癬菌215例（71.43%）， 女性為酵母菌187例（48.70%）， 比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=35.958， P<0.05）。DLSO型、SWO型、TDO型、EO型優(yōu)勢菌為皮膚癬菌， 分別為276例（66.99%）、50例（86.21%）、23例（45.10%）、9例（69.23%）， PSO型為酵母菌， 105例（74.47%）， BSO型的主要病原菌為非皮膚癬菌性霉菌， 6例（60.00%）。各臨床類型間菌屬分離率比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=24.459， P<0.05）。見表2。

3 討論

甲真菌病病程較長， 發(fā)展較慢， 長時(shí)間真菌感染可導(dǎo)致甲變形、增厚、脫離、角化過度等， 有文獻(xiàn)報(bào)道甲真菌病主要致病菌為酵母菌[4]。作者對(duì)本院685例真菌培養(yǎng)陽性患者檢測結(jié)果分析后發(fā)現(xiàn)， 本院甲真菌病患者皮膚癬菌分離率高于酵母菌， 其中以紅色毛癬菌分離率最高， 其次為白色念珠菌， 這與劉紅芳等[5]研究結(jié)果相近， 和尹頌超等[4]、張曉輝等[6]研究結(jié)果不同， 可能與甲真菌病病原菌分布受地理環(huán)境、氣候等多種因素影響有關(guān)[7]， 另外實(shí)驗(yàn)室取材方法、就診人群、取材部位不同， 也可能造成結(jié)果差異。本次統(tǒng)計(jì)中發(fā)現(xiàn)本院酵母菌分離率比部分研究結(jié)果高[8]， 亦高于本地區(qū)2013年相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道[9]， 提示本地區(qū)酵母菌分離率呈現(xiàn)增高趨勢， 這和國內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道甲真菌病流行趨勢一致[10， 11]。酵母菌分離率增高， 尤其是以毛孢子菌為代表的條件致病菌分離率明顯上升， 僅次于白色念珠菌， 這可能是因?yàn)榻陙戆籽?、長期腹膜透析、長期依賴激素治療等人群增多， 而此類人群對(duì)毛孢子菌具有普遍易感性所致。此外， 作者從病甲中分離出10株石膏樣小孢子菌， 小孢子菌屬感染甲板的報(bào)道國內(nèi)外較少見 [12]， 這可能與本地區(qū)部分人喜愛飼養(yǎng)小嚙齒類動(dòng)物為寵物有關(guān)， 石膏樣小孢子菌常寄生于小嚙齒類動(dòng)物皮毛中， 可通過直接接觸感染甲板。