運輸時間對高溫高濕環(huán)境條件下家兔血液成分變化的影響

楊通智，李仁旺

（1.貴州工貿(mào)職業(yè)學(xué)院，貴州威寧 553100；2.威寧縣動物疫病預(yù)防控制中心，貴州威寧 553100）

家兔是在熱帶和亞熱帶地區(qū)培育的，由于育種、用作寵物、生物醫(yī)學(xué)用途和屠宰等多種因素而被運輸。運輸期間，兔子可能會接觸到各種類型的應(yīng)激，如物理（高溫高濕環(huán)境、顛簸）、心理（如監(jiān)禁、噪音和擁擠）和生理（水和食物不足），同時應(yīng)激可能來自運輸途中的受傷、饑餓和疲勞（余傳辛等，2017）。動物對應(yīng)激源的正常反應(yīng)模式是行為、內(nèi)分泌、神經(jīng)、免疫、血液和代謝的變化，旨在恢復(fù)體內(nèi)平衡，以適應(yīng)或促進生存（汪開英等，2017）。因此，科學(xué)家們利用生理和行為的變化來衡量和監(jiān)測動物福利，因為這些應(yīng)激源可以引發(fā)多種生理反應(yīng)，特別是主要介質(zhì)濃度的增加，如與應(yīng)激相關(guān)的糖皮質(zhì)激素、兒茶酚胺，導(dǎo)致生化和血液成分的變化（Nemec等，2012）。運輸誘導(dǎo)血液成分、電解質(zhì)、激素、代謝物和酶的變化，同時運輸是肉類生產(chǎn)系統(tǒng)的重要臨界點，其管理不當(dāng)會對動物福利和肉類質(zhì)量構(gòu)成潛在風(fēng)險（Minka和Ayo，2009）。在歐洲一些注重動物福利的國家（特別是意大利和西班牙）已進行了一些關(guān)于屠宰兔子前運輸應(yīng)激影響的研究。相反，特別是在亞洲，關(guān)于兔子運輸?shù)难芯坑邢?。熱?yīng)激是動物在公路運輸過程中經(jīng)常遇到的一個問題，Zulkifli等（2010）報道了夏季和冬季兔運輸效應(yīng)存在差異。但在炎熱、潮濕的環(huán)境條件下運輸時長對肉兔血液成分的研究有限。因此，本研究旨在在炎熱潮濕的環(huán)境條件下評估運輸時長對肉兔血清成分及血液學(xué)指標(biāo)變化的影響。

1 材料與方法

1.1 動物與試驗設(shè)計試驗選擇平均活體重為（2.04±0.23）kg的肉兔630只，按照體重一致性原則平均分為3組，每組8個重復(fù)，每個重復(fù)35只，在相同條件下飼喂同種飼料。試驗持續(xù)2 d，試驗期間平均環(huán)境溫度30℃，相對濕度76%。運輸前從對照組隨機選取16只兔子采集血樣。T1組兔子運輸1 h，平均行程55 km，T2組兔子運輸3 h，平均行程126 km。將肉兔小心裝入90cm×40 cm×25 cm的塑料籠子中，每個籠子運送5只兔子。

1.2 血液采集與分析每組隨機選擇16只兔子耳緣靜脈采血5 mL。一部分血液離心后收集血清，用試劑盒法測定生化指標(biāo)。另一部全血用于血液學(xué)分析，包括白細(xì)胞、紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞計數(shù)及血紅蛋白濃度、血細(xì)胞壓積和血細(xì)胞比容測定。

1.3 數(shù)據(jù)分析試驗采用完全隨機化設(shè)計，本研究被測變量均以重復(fù)為單位，采用SAS統(tǒng)計學(xué)軟件的GLM程序進行分析，用Duncan’s法進行多重比較，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同運輸時間對肉兔血清生化指標(biāo)的影響由表1可知，除乳酸脫氫酶活性外，血清葡萄糖、乳酸鹽、總蛋白、鈣、尿素含量及肌酸激酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均隨運輸時間的延長而顯著升高（P＜0.05），其中運輸1 h后血清上述變量較對照組顯著提高21.24%、17.96%、4.32%、4.79%、15.00%、13.65%、16.15% 和 5.52%（P＜0.05），運輸3 h后血清所有生化指標(biāo)均較對照組 顯著 提 高 45.09%、69.25%、13.66%、13.01%、22.44%、1.23%、25.97% 和 23.31%（P ＜ 0.05），而運輸3 h后較運輸1 h后血清生化指標(biāo)（除乳酸脫氫酶）顯著提高 19.67%、43.48%、8.95%、7.84%、6.22%、11.25%、8.45% 和 16.85%（P＜0.05）。運輸3 h后血清乳酸脫氫酶活性較對照組顯著提高1.23%（P＜0.05）。

2.2 不同運輸時間對肉兔血液學(xué)指標(biāo)的影響由表2可知，血液中白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血細(xì)胞壓積、血細(xì)胞比容和血紅蛋白濃度隨運輸時間的延長顯著升高（P＜0.05）。其中，運輸1 h后較對照組上述指標(biāo)分別提高28.57%、7.23%、22.73%、9.05% 和 9.06%（P＜ 0.05），運輸 3 h后較對照組上述指標(biāo)分別顯著提高49.32%、12.98%、50.00%、17.08% 和 17.09%（P＜ 0.05），運 輸3 h后較運輸1 h后血液上述指標(biāo)分別顯著提高 16.13%、5.36%、22.22%、7.36% 和 7.36%（P＜0.05）。但隨著運輸時間的延長，血液淋巴細(xì)胞數(shù)量表現(xiàn)為顯著降低（P＜0.05），其中運輸1 h后和3 h后較對照組血液淋巴細(xì)胞數(shù)量分別顯著降低48.89%和56.27%（P＜0.05），而運輸3 h后較運輸1 h后血液淋巴細(xì)胞數(shù)量顯著降低14.42%（P＜0.05）。

表1 不同運輸時間對肉兔血清生化指標(biāo)的影響

表2 不同運輸時間對肉兔血液學(xué)參數(shù)的影響

3 討論

3.1 運輸對家兔生化參數(shù)的影響運輸3 h的肉兔血糖濃度顯著高于運輸1 h和未經(jīng)運輸組，這與Liste等（2008）的研究結(jié)果一致。在應(yīng)激情況下葡萄糖參與能量代謝，使其水平成為評估應(yīng)激的有效指標(biāo)，因為葡萄糖濃度通過糖原分解和糖異生的速率增加而增加，而糖原分解和糖異生與兒茶酚胺和糖皮質(zhì)激素的增加有關(guān)，這些物質(zhì)在應(yīng)激環(huán)境中被釋放。運輸后血乳酸濃度明顯升高。循環(huán)系統(tǒng)能為肌肉提供足夠的氧氣時會發(fā)生向厭氧氧化的轉(zhuǎn)變，其結(jié)果是血乳酸濃度增加。血乳酸濃度也會因喘息而增加。由于兔子不出汗，當(dāng)其暴露在較高環(huán)境下時，特別是在25～30℃以上時，其試圖通過喘氣等方式來平衡多余的熱負(fù)荷（Marai和 Rashwan，2004）。在本研究中，運輸途中的平均溫度為30℃，相對濕度為76%。運輸過程中的熱應(yīng)激是影響家兔健康的重要因素。運輸后所有家兔的谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶和肌酸激酶活性均顯著升高，升高的谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶提示肝病、肌營養(yǎng)不良和內(nèi)臟器官損傷，而肌酸激酶是一種非常敏感的酶，其可催化組織中肌酸轉(zhuǎn)化為磷酸肌酸作為能量庫，因此，肌酸激酶活性的升高可以作為細(xì)胞肌肉損傷和肌肉疲勞的指標(biāo)（EFSA，2004）。運輸3 h的家兔血清尿素水平明顯高于運輸1 h和對照組。在炎熱、潮濕的環(huán)境條件下運輸后尿素水平升高可能是熱應(yīng)激的跡象。在熱應(yīng)激下，由于腎小管選擇性再吸收能力的改變導(dǎo)致尿素滯留在血液中，動物腎功能出現(xiàn)異常。血液尿素水平升高也可歸因于脫水，因為兔子濃縮尿液的能力有限，僅幾小時不飲水就可能以引起血氮癥（Melillo，2007）。

3.2 運輸對家兔血液學(xué)指標(biāo)的影響由于長時間不喝水、呼吸頻率增加和尿失水等因素，運輸常常會導(dǎo)致脫水。運輸后家兔的脫水和血液濃縮通過血細(xì)胞壓積和血漿蛋白濃度升高得到證實。血細(xì)胞壓積在運輸后顯著增加，這與Listle等（2008）研究一致。運輸過程中水?dāng)z入量的減少直接影響細(xì)胞內(nèi)液和細(xì)胞外液體積減少。因此，血漿滲透壓、總血漿蛋白和細(xì)胞體積增加。體型較小的動物（如兔子）與體型較大的動物在能量消耗上存在差異，體型小的動物每單位體重需要更多的熱量，且比體積大的動物脫水更快，因為其表面積與體積比較大。因此，與較大動物相比，兔子在運輸過程中由于食物或水的缺乏會更快更嚴(yán)重地受到應(yīng)激影響。在本研究中，運輸影響了兔子的免疫系統(tǒng)，兩個運輸期均導(dǎo)致白細(xì)胞計數(shù)增加。血液中白細(xì)胞數(shù)量的增加可能是由于運輸過程中兔子受到急性應(yīng)激引起的。眾所周知，急性應(yīng)激動物的白細(xì)胞增多是由內(nèi)源性皮質(zhì)類固醇或腎上腺素釋放引起的（Perez等，2002）。

4 結(jié)論

在高溫高濕條件下，無論時間長短，肉兔在運輸過程中均出現(xiàn)熱應(yīng)激，表現(xiàn)為高血糖、高血鈣和高血乳酸癥，同時血液淋巴細(xì)胞減少，血清酶活性升高。