菊明降壓丸的薄層色譜研究

葉紫金 廖樹清 楊澤旋

【摘 要】 目的：建立菊明降壓丸的薄層色譜鑒別方法。方法：對菊明降壓丸中野菊花和決明子進(jìn)行薄層色譜研究。結(jié)果：該薄層色譜鑒別斑點(diǎn)清晰，分離度好，陰性對照無干擾，專屬性強(qiáng)。結(jié)論：該方法簡便可行、重復(fù)性好，可用于菊明降壓丸的質(zhì)量控制。

【關(guān)鍵詞】 菊明降壓丸;野菊花;決明子;薄層色譜

【中圖分類號】R284.1 ? 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A ? ?【文章編號】1007-8517（2020）10-0061-04

Abstract：Objective To establish a TLC identification method for Juming Jiangya Pills. Methods Thin layer chromatography was used to study Chrysanthemi Indici Flos and Senmen Cassiae in Juming Jiangya Pills.Results The spots identified by Thin-Layer Chromatography were clear，the separation degree was good，the negative control had no interference，and the specificity was strong.Conclusion The method is simple，feasible and reproducible，and can be used for the quality control of Juming Jiangya Pills.

Keywords：Juming Jiangya Pills; Chrysanthemi Indici Flos;Senmen Cassiae;TLC

菊明降壓丸收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第二十一冊，是由野菊花和決明子組成的中成藥，具有降低血壓的功效。用于高血壓及其引起的頭痛、目眩[1]。但因衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中僅有顯微鑒別項(xiàng)和檢查項(xiàng)，因此，為能更好的控制該藥的質(zhì)量，本研究對野菊花和決明子建立薄層色譜鑒別方法，提供了薄層鑒別指標(biāo)，為控制菊明降壓丸的內(nèi)在質(zhì)量提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 DCS-10薄層色譜自動分析系統(tǒng);TII-II型薄層加熱器;KQ-300DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司，功率300 W，頻率300 W）;電子分析天平（梅特勒AL204）;硅膠G預(yù)制板（德國默克有限公司，批號：536092，規(guī)格：10×20 cm）;硅膠G預(yù)制板（煙臺化學(xué)工業(yè)研究所，批號：150325，規(guī)格：10×20 cm），硅膠G預(yù)制板（青島海洋化工廠分廠，批號：20150108，規(guī)格：10×20 cm）。

1.2 試藥 野菊花對照藥材（批號120995-201506）;蒙花苷對照品（批號111578-201710）;決明子對照藥材（批號121011-200604）;橙黃決明素對照品（批號111900-201605），均購于中國食品藥品檢定研究院;甲醇、無水乙醇、乙酸乙酯、石油醚（60～90 ℃）、丙酮、丁酮、甲酸均為分析純;菊明降壓丸4批（批號：14071348、14072106、14072107、17072812，北京同仁堂科技發(fā)展股份有限公司制藥廠），陰性樣品為自制。

2 方法與結(jié)果

2.1 野菊花的薄層色譜鑒別 取本品10 g，粉碎，加無水乙醇30 mL，超聲處理30 min，放冷，濾過，取濾液作為供試品溶液。另取野菊花對照藥材1 g，加無水乙醇20 mL，同法制成對照藥材溶液。再取蒙花苷對照品，加甲醇制成每1 mL含0.2 mg的溶液，作為對照品溶液[2]。照薄層色譜法（《中國藥典》2015年版四部通則0502）試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各2～5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5∶ 3∶ 1∶ 1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%三氯化鋁溶液，熱風(fēng)吹干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。結(jié)果表明，供試品中清晰，分離效果，陰性無明顯干擾，方法專屬性強(qiáng)。如圖1所示。

2.2 決明子的薄層色譜鑒別 取本品10 g，粉碎，加乙酸乙酯30 mL、鹽酸1 mL，加熱回流30 min ，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴? mL使溶解，作為供試品溶液。另取決明子對照藥材0.2 g，同法制成對照藥材溶液。再取橙黃決明素對照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2015年版四部通則0502）試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各3～10 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90 ℃）（10∶ 4）為展開劑，展開，取出，晾干，在紫外光（365 nm）下檢視。置氨蒸氣中熏后，在日光下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的斑點(diǎn)。結(jié)果表明，供試品中清晰，分離效果，陰性無明顯干擾，方法專屬性強(qiáng)。如圖2所示。

3 方法學(xué)考察

3.1 不同薄層板的考察 選用硅膠G預(yù)制板（德國默克有限公司，批號：536092）;硅膠G預(yù)制板（煙臺化學(xué)工業(yè)研究所，批號：150325），硅膠G預(yù)制板（青島海洋化工廠分廠，批號：20150108）3種薄層板，斑點(diǎn)清晰，陰性無干擾，結(jié)果表明不同產(chǎn)家的薄層板對本實(shí)驗(yàn)所建立的方法無明顯影響。如圖3、圖4所示。

3.2 不同溫度的考察 對低溫（6 ℃）、室溫（26 ℃）進(jìn)行了考察，結(jié)果展開溫度為低溫（6 ℃）、室溫（26 ℃）時(shí)，供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上，均顯相同顏色的斑點(diǎn)，且斑點(diǎn)清晰，分離度好，陰性無干擾，結(jié)果表明不同溫度展開的條件對本實(shí)驗(yàn)建立的方法無明顯影響。如圖5、圖6所示。

3.4 不同濕度的考察 對低濕度（18%）、中濕度（55%）、高濕度（88%）進(jìn)行考察，結(jié)果在展開溫度為室溫，濕度分別為18%和88%時(shí)，供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上，均顯相同顏色的斑點(diǎn)，且斑點(diǎn)清晰，分離度好，陰性無干擾，結(jié)果表明不同濕度下的展開條件對實(shí)驗(yàn)所建立的方法無明顯影響。如圖7、圖8所示。

4 討論

實(shí)驗(yàn)過程中野菊花和決明子提取方法和展開劑系統(tǒng)均參考了藥典中單味藥材及部分相關(guān)中成藥的鑒別方法[3]，而根據(jù)復(fù)方制劑的復(fù)雜性、實(shí)驗(yàn)操作簡易型及所使用試劑的安全性。筆者對最終的薄層方法進(jìn)行了一定的優(yōu)化，以達(dá)到鑒別的最佳效果。

4.1 野菊花的鑒別 提取方法比較了水超聲后乙醚再萃提[4]、80% 乙醇浸泡后提取[5]、甲醇超聲[6]、乙醇超聲[7]、無水乙醇超聲、展開系統(tǒng)比較了乙酸乙酯-丁酮-氯仿-甲酸-水（15∶ 15∶ 6∶ 4∶ 1）、乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5∶ 3∶ 1∶ 1）[3]、正己烷-乙酸乙酯-丁酮-甲酸（2∶ 5∶ 5∶ 1），實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明甲醇超聲提取和無水乙醇超聲提取差別不大，所以最終選擇無水乙醇作為提取溶劑，展開劑為乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5∶ 3∶ 1∶ 1）這個(gè)組合操作簡易，試劑環(huán)保，所得到的斑點(diǎn)清晰，重現(xiàn)性好，專屬性強(qiáng)、陰性對照無干擾，故用此法。

4.2 決明子的鑒別 通過比較7種提取方法，最終以乙酸乙酯加鹽酸加熱回流提取，去除以乙醚作萃取，三氯甲烷溶解為主體的幾種類似提取方法;展開系統(tǒng)比較了石油醚（30～60 ℃）-丙酮（2∶ 1）、石油醚（30～60 ℃）-甲酸乙酯-甲酸（15∶ 5∶ 1）上層溶液[8] 、環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸（12∶ 3∶ 0.15）、石油醚（30～60 ℃）-環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸（6∶ 12∶ 5∶ 0.5）、正己烷-乙酸乙酯-甲酸（10∶ 1∶ 1）上層溶液、石油醚（30～60 ℃）-丙酮（3∶ 1）、石油醚（60～90 ℃）-丙酮（1∶ 3）[9]，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明乙酸乙酯加鹽酸加熱回流提取的操作最為簡易，所用試劑毒性低，對環(huán)境污染少，所得到的斑點(diǎn)清晰，重現(xiàn)性好，專屬性強(qiáng)、陰性對照無干擾，故用此法。

綜上，菊明降壓丸中的野菊花和決明子的薄層色譜具有明顯的鑒別特征。所采用的方法專屬性強(qiáng)、靈敏度高，重復(fù)性好，操作簡便，可為有效控制菊明降壓丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供科學(xué)的依據(jù)，填補(bǔ)該藥缺少薄層鑒別的空白。

參考文獻(xiàn)

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（收稿日期：2020-02-28 編輯：劉斌）