EB病毒抗體聯(lián)合檢測(cè)在鼻咽癌診治中的應(yīng)用價(jià)值

房綺梅 蔡偉鵬 王英 鐘思瑤 羅曉紅*

EB 病毒（Epstein-Barr virus）是人類(lèi)常見(jiàn)的皰疹病毒，宿主感染后無(wú)法將其從體內(nèi)完全清除，可終身攜帶，一旦被激活可引起相關(guān)腫瘤疾病，已被研究證實(shí)與鼻咽癌（NPC）關(guān)系密切［1］。由于NPC早期癥狀不明顯，易誤診為其他頭頸部疾病，因而耽誤治療。EB 病毒血清抗體的篩查可盡早發(fā)現(xiàn)NPC，但單一抗體檢測(cè)的靈敏度偏低，多種血清抗體聯(lián)合檢測(cè)來(lái)提高NPC 診斷的研究越來(lái)越多［2］。然而，對(duì)于EB 病毒血清抗體檢測(cè)在NPC 的診治、療效評(píng)估方面的價(jià)值仍有爭(zhēng)議［3］。本研究探討EB病毒衣殼抗原IgA 抗體（VCA-IgA）、EB 病毒核抗原1 IgA 抗體（NA1-IgA）、EB 病毒早期抗原IgA 抗體（EA-IgA）和EB 病毒Rta 蛋白抗體IgG（Rta-IgG）4種血清抗體水平，分析其在NPC 診治中的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料收集中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院2018 年8 月-2019 年4 月經(jīng)病理確診NPC 患者血清274 例，其中初診NPC 患者48 例［男性36 例，女性12 例，年齡20-76 歲，平均年齡（56.4±13.3）歲］；經(jīng)治療的NPC 患者199 例［（非初診及復(fù)發(fā)NPC），其中男性145 例，女性54 例，年齡17-81 歲，平均年齡（48.1±12.6）歲］；在經(jīng)治療的NPC 患者中，治療半年內(nèi)患者87 例［男性61 例，女性26 例，年齡17-72 歲，平均年齡（47.5±12.6）歲］；鼻咽癌治療后半年以上患者112 例［男性84 例，女性28 例，年齡21-81 歲，平均年齡（48.6±12.7）歲］；鼻咽癌復(fù)發(fā)者27 例［男性17 例，女性10 例，年齡31-64 歲，平均年齡（48.0±7.9）歲］。頭頸部良性疾病患者血清93 例［男性65 例，女性28 例，年齡15-74 歲，平均年齡（44.1±21.1）歲］。同期在本院體檢的健康人群（對(duì)照組）血清93 例［男性63 例，女性30 例，年齡19-74 歲，平均年齡（43.8±13.5）歲，排除鼻炎、過(guò)敏性鼻炎、鼻竇炎、偏頭痛、腦血栓、耳聾、耳鳴、中耳炎、甲狀腺疾病等頭頸部疾?。荨８鹘M年齡與性別比均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05），資料具有可比性。

1.2 儀器與試劑PW-960 型全自動(dòng)酶標(biāo)洗板機(jī)（深圳匯松公司）；MK3 酶標(biāo)儀（廣東仁博醫(yī)療器材有限公司）。VCA-IgA 檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：201901001）；NA1 - IgA 檢 測(cè) 試 劑 盒（批 號(hào)：201811036-2）；EA-IgA 檢 測(cè) 試 劑 盒（批 號(hào)：20190201）；Rta - IgG 檢 測(cè) 試 劑 盒（批 號(hào)：20190101）。

1.3 檢測(cè)方法于清晨抽取空腹靜脈血，分離血清0.5 ml，放在-20 ℃冰箱保存，檢測(cè)時(shí)于室溫融化，采用ELISA 方法檢測(cè)血清中的VCA-IgA、NA1-IgA、EA-IgA、Rta-IgG。所有操作和結(jié)果判斷均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.4 結(jié)果判定VCA-IgA 臨界值為0.15（OD 值），NA1-IgA 臨界值為0.3（OD 值），EA-IgA 臨界值為0.15（OD 值），Rta-IgG 臨界值為0.11（OD 值）。測(cè)定樣品（OD 值）＞臨界值時(shí)為EB 病毒抗體陽(yáng)性?？贵w水平的高低與檢測(cè)結(jié)果的OD 值成正比。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 不同組別4 種EB 病毒抗體的檢測(cè)結(jié)果比較見(jiàn)表1。

表1 不同組別4 種EB 病毒抗體的檢測(cè)結(jié)果比較［例（%）］

2.2 單項(xiàng)抗體檢測(cè)和4 種抗體聯(lián)合檢測(cè)判斷初診NPC 的靈敏度及特異度比較見(jiàn)表2。

表2 單項(xiàng)和4 種EB 病毒抗體對(duì)初診NPC 診斷的靈敏度和特異度比較（%）

2.3 不同NPC 組別間4 種EB 病毒抗體水平比較見(jiàn)表3。

表3 不同鼻咽癌組別4 種EB 病毒抗體水平（OD 值，±s）

表3 不同鼻咽癌組別4 種EB 病毒抗體水平（OD 值，±s）

注：A 組：初診NPC 組；B 組：治療NPC 組；C 組：治療NPC 治療半年內(nèi)組；D 組：治療NPC 治療半年以上組；E 組：NPC 復(fù)發(fā)組。與C組比較，*P＜0.05；與E 組比較，#P＜0.05。

組別A 組（n=48）B 組（n=199）C 組（n=87）D 組（n=112）E 組（n=27）VCA-IgA 0.652±0.378*0.541±0.355 0.549±0.334 0.427±0.367 0.672±0.410#NA1-IgA 0.969±0.556 0.837±0.549 0.861±0.570 0.818±0.533 0.814±0.502 EA-IgA 0.608±0.540a 0.371±0.346 0.484±0.473 0.363±0.352 0.404±0.389 Rta-IgG 0.518±0.508*0.394±0.336 0.440±0.347 0.349±0.318 0.417±0.345

3 討 論

NPC 是中國(guó)多發(fā)的惡性腫瘤之一。目前，NPC監(jiān)測(cè)與診斷的方法很多，其中病理學(xué)診斷是金標(biāo)準(zhǔn)，血清學(xué)檢查為輔助檢查。血清學(xué)檢查主要包括EB 病毒相關(guān)抗體，EB 病毒DNA，EB 病毒基因表達(dá)的蛋白。

3.1 聯(lián)合檢測(cè)EB 病毒相關(guān)抗體可提高NPC 早期診斷的敏感性研究發(fā)現(xiàn)，EB 病毒相關(guān)抗體如VCA-IgA，NA1-IgA，EA-IgA，Rta-IgG 等可作為NPC診斷檢測(cè)指標(biāo)。Yong-Lin Cai 等［4］研究認(rèn)為4 種抗體檢測(cè)中VCA-IgA 靈敏度最高達(dá)98.1%，EA-IgA 特異度最高為98.5%，聯(lián)合VCA-IgA 與Rta-IgG 的靈敏度和特異度達(dá)到最佳，分別為94.8%和98%。J.Fachiroh［5］等的實(shí)驗(yàn)證明單獨(dú)檢測(cè)VCA-IgA，NA1-IgA 的靈敏度分別為88.8%和79.8%，特異度分別為80.1%和70.9%，聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度和特異度達(dá)90.1%和85.4%，表明聯(lián)合檢測(cè)更有助于診斷NPC。本研究結(jié)果顯示，NPC 患者的4 種EB 病毒抗體的陽(yáng)性率明顯高于良性疾病對(duì)照組和健康對(duì)照組，P＜0.05；VCA-IgA 靈敏度最高，為85.4%，低于Yong-Lin Cai 等報(bào)告的98.1%，與J.Fachiroh 等報(bào)道的88.8%相近。出現(xiàn)差異的原因可能與地域差異和試劑盒的生產(chǎn)廠家不同有關(guān)。因此，在早期診斷中，使用單一檢測(cè)指標(biāo)時(shí)可優(yōu)先選擇VCAIgA 抗體的檢測(cè)。但本研究結(jié)果顯示，VCA-IgA 特異度最低，為95.7，最高的是EA-IgA，達(dá)97.8%，與嚴(yán)翠娥［6］等的報(bào)告相似。說(shuō)明單項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)能降低誤診，但容易導(dǎo)致漏診，不利于NPC 的早發(fā)現(xiàn)、早治療。而4 種EB 病毒抗體聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度可達(dá)到100%，即只要有其中一種抗體為陽(yáng)性，則可懷疑患有NPC，減少了漏診的可能，但是同時(shí)也提高了誤診的幾率，特異度會(huì)有所下降，但也達(dá)到較高水平。因此，可認(rèn)為聯(lián)合檢測(cè)能提高對(duì)NPC 早期診斷的敏感性，有利于及早診斷NPC。

3.2 EB 病毒相關(guān)抗體有助于NPC 療效判斷NPC 的死亡率相對(duì)較高，預(yù)后較差，且NPC 復(fù)發(fā)后的再治療，無(wú)論在腫瘤控制還是在生存質(zhì)量方面都難以再取得滿(mǎn)意的療效。本研究結(jié)果顯示，初診NPC 組4 種抗體水平（OD 值）均大于治療半年內(nèi)組及治療半年以上組；治療半年內(nèi)組大于治療半年以上組。說(shuō)明NPC 經(jīng)過(guò)放、化療治療后，EB病毒抗體水平會(huì)下降。下降的原因可能與機(jī)體免疫功能有關(guān)，機(jī)體在放、化療后合成抗體的能力下降，從而使得EB 病毒抗體水平呈現(xiàn)下降趨勢(shì)［7］。但統(tǒng)計(jì)學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，只有初診NPC 組與治療半年以上組的抗體水平（OD 值），除了NA1-IgA 外，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。這可能與本研究的樣本數(shù)過(guò)少有關(guān)。本研究還發(fā)現(xiàn)當(dāng)NPC 復(fù)發(fā)時(shí)VCA-IgA 抗體水平又會(huì)升高，與治療半年以上組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。說(shuō)明EB 病毒抗體VCAIgA，EA-IgA，Rta-IgG 的水平變化對(duì)NPC 療效評(píng)估有一定的輔助作用，而VCA-IgA 抗體水平變化還對(duì)NPC 的復(fù)發(fā)有一定的監(jiān)測(cè)作用。

綜上所述，EB 病毒抗體VCA-IgA，NA1-IgA，EA-IgA，Rta-IgG 聯(lián)合檢測(cè)有助于NPC 的早期診斷；在放、化療療效評(píng)估中，VCA-IgA，EA-IgA，Rta-IgG 抗體水平變化可作為輔助的監(jiān)測(cè)指標(biāo)；VCAIgA 抗體水平變化還對(duì)NPC 的復(fù)發(fā)有一定的監(jiān)測(cè)作用。