活性維生素D3及鋅、錳復(fù)合物改善水印蛋研究

摘 ?要：本試驗(yàn)旨在研究在產(chǎn)蛋雞日糧中添加活性維生素D3及鋅、錳復(fù)合物對蛋殼質(zhì)量的影響。試驗(yàn)材料含維生素D3復(fù)合物，可在腸道中經(jīng)腸道消化酶水解獲得活性維生素D3形式，直接驅(qū)動對鈣、磷的吸收代謝及其他功能，而鋅、錳微量元素具有改善蛋殼質(zhì)量和緩減應(yīng)激等作用。試驗(yàn)結(jié)果顯示，對照組蛋殼厚度為0.317mm，試驗(yàn)組蛋殼厚度為0.348mm，顯著高于對照組（P<0.05）。對照組蛋殼評分為1.82，試驗(yàn)組蛋殼評分為1.10，極顯著降低（P<0.01）。此外，試驗(yàn)組裂紋蛋和水印蛋分別為3.3%和26.7%，與對照組相比均大幅降低（分別為23.3%和48.7%）。結(jié)果表明，蛋雞產(chǎn)蛋料添加活性維生素D3及鋅、錳復(fù)合物可顯著提高蛋殼質(zhì)量，改善水印蛋問題。

關(guān)鍵詞：活性維生素D3;復(fù)合物;蛋殼質(zhì)量;蛋殼評分;水印蛋

雞蛋是人們生活中優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)的主要來源，包含了胚胎生長發(fā)育的全部營養(yǎng)物質(zhì)，且價(jià)格低廉[1]。品質(zhì)好的雞蛋殼既能夠顯著降低雞蛋在生產(chǎn)、運(yùn)輸、加工過程中由于蛋殼破損導(dǎo)致的經(jīng)濟(jì)損失，又能夠提高種蛋的孵化率和經(jīng)濟(jì)效益。隨著近年來食品安全問題日益受到關(guān)注，消費(fèi)者對雞蛋質(zhì)量要求也越來越高，對蛋殼質(zhì)量好、品相好、色澤均勻、蛋品新鮮和味道鮮美的雞蛋，需求也明顯增加。商品蛋蛋殼質(zhì)量直接影響其在市場上的銷售價(jià)格和銷售周期，尤其對品牌雞蛋的影響較大。

水印蛋又稱為半透明蛋（Translucent egg），Hoist等在1932年提出，國內(nèi)亦稱為暗斑蛋、薄斑蛋等，蛋殼表面會呈現(xiàn)不同的水狀條紋，在光照條件下呈現(xiàn)非常明顯的暗斑[2]。水印蛋普遍存在于褐殼、粉殼和綠殼等蛋雞品種，嚴(yán)重影響雞蛋品相，降低消費(fèi)欲望，從而影響銷售價(jià)格[3]。

目前，水印蛋已經(jīng)成為蛋雞行業(yè)最為關(guān)注的問題之一，給鮮蛋生產(chǎn)及種蛋孵化等方面帶來巨大的損失，亦對食品質(zhì)量安全造成威脅。本文依據(jù)活性維生素D3可促進(jìn)蛋雞鈣磷吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)，以及結(jié)合鋅、錳礦物元素在蛋殼形成中的重要作用[4]和改善中后期蛋殼品質(zhì)[5]等理論，與飼養(yǎng)實(shí)踐相結(jié)合，對改善蛋殼質(zhì)量進(jìn)行了初步探索。

1 ?材料和方法

1.1 ?試驗(yàn)材料 ?活性維生素D3及鋅、錳復(fù)合物由廣州琺亞生物科技有限公司提供。

1.2 ?試驗(yàn)動物與設(shè)計(jì) ?試驗(yàn)于2019年8月19號至9月17號在廣西南寧一家規(guī)模型蛋雞養(yǎng)殖基地進(jìn)行。試驗(yàn)選擇體重均勻、產(chǎn)蛋相近的47周齡的京粉商品蛋雞18000只，將其分別隨機(jī)分成對照組和試驗(yàn)組兩個(gè)處理，每個(gè)處理設(shè)置3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)3000只蛋雞。預(yù)飼期7d，試驗(yàn)期30d。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧（每千克飼料含60μg維生素D3），試驗(yàn)組在基礎(chǔ)日糧中按照每噸飼料添加200g試驗(yàn)材料?；A(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平如表1。

1.3 ?飼養(yǎng)管理 ?試驗(yàn)雞采用密閉式雞舍，每天固定光照時(shí)間。自由采食和飲水。按照常規(guī)防疫程序進(jìn)行雞舍消毒和防疫，保證雞舍衛(wèi)生。試驗(yàn)期間每天觀察雞群健康狀況以及采食狀況。

1.4 ?檢測指標(biāo)及方法

1.4.1 ?樣品采集 ?試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，分別對照組和試驗(yàn)組各隨機(jī)采集60枚合格雞蛋，常溫放置7d后進(jìn)行蛋殼評分和裂紋蛋、水印蛋評估，然后檢測蛋殼厚度。

1.4.2 ?檢測方法 ?蛋殼厚度由測厚儀檢測，雞蛋蛋殼評分步驟參見諾偉司水印蛋評分方法[4]。數(shù)據(jù)采用SPSS17.0進(jìn)行單因素方差分析，Duncan多重比較。

2 ?試驗(yàn)結(jié)果

2.1 ?蛋殼厚度 ?蛋殼厚度檢測結(jié)果見表2。

由表2可以看出，與對照組相比，試驗(yàn)組蛋殼厚度明顯高于對照組，且差異顯著（P<0.05）。

2.2 ?裂紋蛋 ?裂紋蛋檢測結(jié)果見表3。

由表3看出，對照組裂紋蛋比例為23.3%，試驗(yàn)組僅為3.3%，相比對照組裂紋蛋比例大幅降低。

2.3 ?水印蛋 ?水印蛋檢測結(jié)果見表4。

由表4看出，對照組水印蛋比例為48.3%，試驗(yàn)組為26.7%，試驗(yàn)組水印蛋比例大幅降低。

2.4 ?蛋殼評分 ?根據(jù)在光照下的透光斑點(diǎn)嚴(yán)重程度，將雞蛋蛋殼分為6個(gè)級別，分別為0分（優(yōu)）、1分（優(yōu)良）、2分（良）、3分（中度）、4分（重度）、5分（極重度）。蛋殼評分結(jié)果見表5。

由蛋殼評分分布看出，對照組蛋殼評分為1分的雞蛋比例為31.7%，評分為2分的雞蛋比例最高，達(dá)到38.3%，優(yōu)良等級蛋殼及以上雞蛋占比為41.7%;而試驗(yàn)組蛋殼評分為2分的雞蛋比例為13.3%，評分為1分的雞蛋比例最高，達(dá)到61.7%，優(yōu)良等級蛋殼及以上雞蛋占比達(dá)到80.0%。

本試驗(yàn)通過對對照組和試驗(yàn)組雞蛋透光性檢測發(fā)現(xiàn)，對照組蛋殼透光度較高，結(jié)構(gòu)較疏松，裂紋雞蛋比例較多;試驗(yàn)組蛋殼沉積均勻，說明蛋殼在形成過程中，蛋雞蛋殼腺體中鈣、磷等礦物能持續(xù)穩(wěn)定供應(yīng)，透光程度明顯好于對照組雞蛋。

3 ?分析與討論

近年來，隨著人們對蛋殼質(zhì)量的關(guān)注程度越來越高，在水印蛋形成機(jī)理方面取得了一定的研究進(jìn)展。蛋殼的形成與蛋雞體內(nèi)鈣流動密切相關(guān)[6]，蛋殼鈣的沉積量直接受到母雞輸卵管和子宮部的鈣結(jié)合蛋白表達(dá)量的影響。聶偉[7]研究發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)暗斑蛋殼的雞子宮和腸道鈣結(jié)合蛋白mRNA表達(dá)量顯著低于產(chǎn)正常蛋殼蛋雞，Ca2+-ATPase mRNA也明顯低于產(chǎn)正常蛋殼蛋雞;同時(shí)，暗斑蛋殼外層鈣元素相對含量、內(nèi)膜磷元素相對含量和蛋殼中鈣含量顯著低于正常蛋殼。張銘容等研究發(fā)現(xiàn)，暗斑蛋殼的石灰質(zhì)硬蛋殼硬度顯著低于正常蛋殼，硬蛋殼含水量顯著高于正常蛋殼部分;通過對超微圖像分析，殼下膜在暗斑位置厚度較薄，網(wǎng)孔較大，蛋內(nèi)水分更易通過該膜向外散失，同時(shí)石灰質(zhì)硬蛋殼表明呈現(xiàn)出較大較深的裂縫，使得蛋內(nèi)水分向外散失時(shí)易滲透進(jìn)入該縫隙，形成暗斑[8]。付良等試驗(yàn)結(jié)果顯示，蛋殼暗斑區(qū)域相較于無暗斑區(qū)域和正常殼，乳突排列疏松，乳突空隙大，具有更高的含水率，光線穿過含水率更高的區(qū)域時(shí)折射率和反射率發(fā)生變化，暗斑產(chǎn)生[9]?？梢姲蛋叩靶纬傻闹苯釉蚴撬诌M(jìn)入疏松的石灰質(zhì)硬蛋殼縫隙，而根本原因是產(chǎn)暗斑的蛋雞輸卵管、蛋殼腺及子宮部鈣結(jié)合蛋白顯著減少，蛋殼鈣沉積量下降，導(dǎo)致蛋殼在形成過程中沉積不均勻，石灰質(zhì)硬蛋殼斷面質(zhì)地明顯疏松，內(nèi)外表面形成裂縫和孔隙，為水分聚集提供了充足的條件[3，9]。

與此同時(shí)，對于如何改善暗斑蛋措施亦有相關(guān)報(bào)道，如李亞杰等在41周齡農(nóng)大3號商品蛋雞飼料中添加1000mg/kg L-絲氨酸能有效降低存放7d后的暗斑蛋產(chǎn)生率[10]。張繼良等研究發(fā)現(xiàn)，在羅曼粉商品蛋雞飼料中添加活性維生素D3及鋅錳復(fù)合物可以顯著提高蛋殼厚度和強(qiáng)度，以及改善暗斑蛋，提高蛋殼質(zhì)量[9]。1α，25-二羥基維生素D3是維生素D3的活性形式，可直接作用于VD受體，促進(jìn)腸道對鈣磷的吸收與重吸收，提高蛋殼腺體造殼能力，從而提高產(chǎn)蛋期蛋雞對鈣磷的需求與代謝，尤其在產(chǎn)蛋后期提高效果更明顯。但是隨著蛋雞年齡增長，機(jī)體產(chǎn)生的1α-羥化酶顯著減少[11]，血清1α，25-二羥基維生素D3含量隨之顯著降低[12]，嚴(yán)重影響產(chǎn)蛋后期蛋殼腺體造鈣能力，導(dǎo)致在實(shí)際雞蛋生產(chǎn)過程中薄殼蛋、破殼蛋、水紋蛋等明顯升高。Bar等研究發(fā)現(xiàn)產(chǎn)薄殼蛋蛋雞十二指腸和蛋殼腺鈣結(jié)合蛋白mRNA表達(dá)量顯著降低，經(jīng)飼喂含1，25-二羥基維生素D3飼糧可顯著提高蛋雞蛋殼厚度[13]。

本試驗(yàn)材料選用維生素D3復(fù)合物，經(jīng)腸道消化酶水解得到活性維生素D3，無需經(jīng)過肝腎轉(zhuǎn)化過程，直接、快速地進(jìn)入小腸、腎臟、蛋殼腺、骨骼等機(jī)體組織與VDR受體結(jié)合，促進(jìn)和提高蛋雞鈣結(jié)合蛋白的表達(dá)量，提高鈣、磷離子的吸收及轉(zhuǎn)運(yùn)[14]，同時(shí)結(jié)合鋅、錳礦物元素在蛋殼形成過程中的重要作用，使試驗(yàn)組雞蛋蛋殼厚度顯著提高，水印蛋評分極顯著降低，蛋殼暗斑比例明顯減少。本研究對改善蛋雞水印蛋問題提供了新的解決方案，其機(jī)理仍需進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)：

[1] ?楊佳林，高金波，韓海霞，等.雞蛋暗斑的研究進(jìn)展[J].家禽科學(xué)，2019，3：53-56.

[2] ?HOIST W F，ALMQUIST H J，LORENZ F W.A Study of shell texture of the hen's egg[J]. Poultry Science，1932，11（3）：144-149.

[3] ?王德賀，華麗娜，高亞輝，等.蛋雞暗斑蛋形成機(jī)理的研究進(jìn)展[J].中國家禽， 2016，38（8）：44-48.

[4] ?孫德發(fā)，譚權(quán)，王琪.水印蛋評分體系的建立及螯合微量元素和抗氧化劑對水印蛋發(fā)生率的影響[J].中國畜牧雜志，2017，53（12）：143-147.

[5] ?喻禮懷，陳連民，丁洛陽，等. 飼糧添加有機(jī)鋅、錳對產(chǎn)蛋中后期蛋雞蛋殼品質(zhì)及血液生化指標(biāo)的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報(bào)，2015，27（10）：3041-3046.

[6] ?Chien Y C，Hincke M T，Vali H，et al. Ultrastructural matrix-mineral relationships in avian eggshell， and effects of osteopontin on calcite growth in vitro[J]. Journal of Structural Biology， 2008， 163（1）：84-99.

[7] ?聶偉.日糧磷水平對矮小型蛋雞產(chǎn)蛋性能、蛋殼品質(zhì)及鈣磷吸收的影響[D].北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)，2013.

[8] ?張銘容，葉勁松，李昕陽，等.雞蛋殼暗斑成因[J].食品與機(jī)械，2016，32（5）：38-42.

[9] ?付良，吳桂琴，孫從佼，等.雞蛋殼暗斑成因研究[J].中國家禽， 2019，41（15）：6-11.

[9] ?張繼良，畢英佐，Chiu Hung，等.活性維生素D3及鋅、錳復(fù)合物改善蛋殼質(zhì)量研究[J].廣東飼料，2019，3：23-24.

[10] ?李亞杰，劉禹辰，曾丹，等.添加不同水平絲氨酸對蛋雞生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)的影響[J].營養(yǎng)飼料，2019，55（2）：86-89.

[11] ?Joyner C J， M J Peddie， and T G Taylor. The effect of age on egg production in the domestic hen[J]. General and comparative endocrinology，2987（65）：331-336.

[12] ?閃愛婷.不同產(chǎn)蛋期蛋雞骨和蛋殼腺鈣磷代謝相關(guān)因子表達(dá)變化的研究[D].沈陽：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)，2017.

[13] ?Bar A，E.Vax，S.Striem.Relationships among age， eggshell thickness and vitamin D metabolism and its expression in the laying hen[J].Comparative Biochemistry and Physiology，1999，123（2）：147-154.

[14] ?Edwards JR，M.Herdy.Dietary 1，25-Dihydroxy cholecalciferol Supplementation Increases Natural Phytate Phosphorus Utilization in Chickens[J]. Journal of Nutrition，1993，123（3）：567-577.