慢性自發(fā)性蕁麻疹患者自體血清皮膚試驗(yàn)與白細(xì)胞介素-18的關(guān)系

鄒育雄, 陳明春, 謝宛潞

(1.惠州市皮膚病防治研究所,廣東 惠州 516000;2.中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院皮膚科,廣東 廣州 510120)

慢性蕁麻疹是指患者皮膚出現(xiàn)風(fēng)團(tuán)并反復(fù)發(fā)作超過6周的蕁麻疹，大多數(shù)病因不明，臨床上可分為自發(fā)性和誘導(dǎo)性兩類，部分慢性自發(fā)性蕁麻疹(chronic spontaneous urticaria，CSU)患者的發(fā)病可能與免疫因素有關(guān)[1]。自體血清皮膚試驗(yàn)(autologous serum skin test，ASST) 是目前檢測CSU患者是否存在自身免疫反應(yīng)的主要方法，具有良好的特異性及敏感性[2]。白細(xì)胞介素-18(interleukin-18，IL-18)是一種Th1細(xì)胞相關(guān)的細(xì)胞因子，與多種免疫性疾病的發(fā)病有密切關(guān)系[3]。本研究通過對CSU患者進(jìn)行ASST檢測及血清IL-18水平測定，并分析CSU病情嚴(yán)重程度與ASST及IL-18的關(guān)系，旨在進(jìn)一步探討CSU的發(fā)病機(jī)制，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

病例組60例來自本院2018年9月至2019年8月門診CSU患者，診斷明確[4]并符合以下標(biāo)準(zhǔn)：①反復(fù)出現(xiàn)風(fēng)團(tuán)，病程超過六周，每周發(fā)作2次以上；②7天內(nèi)未使用抗組胺藥物、1個(gè)月內(nèi)未使用皮質(zhì)類固醇激素及免疫抑制劑；③知情同意并完成本研究者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①食物、吸入物、接觸物、藥物、感染等明確過敏原引起的蕁麻疹；②誘導(dǎo)性蕁麻疹(如寒冷性、膽堿能性、人工性、日光性、水源性蕁麻疹等)和蕁麻疹性血管炎；③免疫性疾病、內(nèi)臟感染、腫瘤、糖尿病及其它過敏性疾病；④妊娠期和哺乳期患者。

60例CSU患者中，男19例，女41例；年齡18～67歲，平均(35.6±13.2)歲；病程1.5～290個(gè)月，平均(63.2±34.8)個(gè)月。根據(jù)患者的臨床表現(xiàn)(包括皮膚瘙癢、風(fēng)團(tuán)數(shù)量和風(fēng)團(tuán)大小)進(jìn)行評分[4]：皮膚瘙癢：無癢感0分，輕度瘙癢1分，中度瘙癢2分，重度瘙癢3分；風(fēng)團(tuán)數(shù)量：無風(fēng)團(tuán)0分，1～6個(gè)1分，7～12個(gè)2分，>12個(gè)3分；風(fēng)團(tuán)大小：無風(fēng)團(tuán)0分，直徑<5 mm 1分，6～15 mm 2分，>15 mm 3分；CSU病情嚴(yán)重程度判定：以上三項(xiàng)評分之和為總評分，總評分0～3分為輕度，4～6分為中度，7～9分為重度。對照組30例為健康體檢者，無過敏性疾病和免疫性疾病史，其中男11例，女19例，年齡21～65歲，平均(38.4±15.1)歲。兩組年齡(t=1.49,P=0.175)、性別比較(2=14.25,P=1.583)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 主要儀器與試劑 DG5033A型酶標(biāo)儀(華東醫(yī)療裝備公司)、電熱恒溫水浴箱(一恒科技公司)。人白細(xì)胞介素-18 ELISA試劑盒(Bender MedSystems)。

1.2.2 ASST檢測 采取兩組受試者靜脈血5 mL，分離血清后取0.1 mL在前臂屈側(cè)作皮內(nèi)注射,并以等量生理鹽水皮內(nèi)注射作對照，兩注射處至少相距5 cm，30 min后觀察結(jié)果。若血清注射處出現(xiàn)紅斑、風(fēng)團(tuán)反應(yīng),其直徑比對照大2 mm以上即為陽性[4]。

1.2.3 IL-18測定 采用ELISA法，操作步驟按人IL-18 ELISA試劑盒說明書進(jìn)行。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用SPSS 17.0軟件分析，組間ASST陽性率比較采用2檢驗(yàn)，兩組IL-18水平比較采用t檢驗(yàn)，不同CSU嚴(yán)重程度患者IL-18水平比較采用F檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組ASST陽性率比較

病例組60例患者中，ASST陽性32例，陽性率53.3%；對照組30例中，ASST陽性1例，陽性率3.3%。病例組ASST陽性率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(2=21.50，P=0.007)。

2.2 血清IL-18水平比較

病例組血清IL-18水平高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。病例組中ASST陽性患者血清IL-18水平高于ASST陰性患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，詳見表1。

表1 兩組血清IL-18水平比較Tab.1 Comparison of serum IL-18 level between the two groups

2.3 病例組ASST結(jié)果、IL-18水平與CSU嚴(yán)重程度的關(guān)系

病例組60例中病情嚴(yán)重程度判定為輕度27例，中度22例，重度11例。比較不同病情嚴(yán)重程度者間ASST陽性率，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(2=0.04,P=0.979)。比較不同病情嚴(yán)重程度患者IL-18水平,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=3.07,P>0.05)，詳見表2。

表2 病例組不同CSU嚴(yán)重程度患者ASST檢測及血清IL-18水平比較 例Tab.2 Comparison of ASST results and serum IL-18 level among CSU patients with different severity Case

3 討論

CSU是一種常見皮膚病，臨床表現(xiàn)遷延頑固，病程可長達(dá)數(shù)月甚至數(shù)十年，常規(guī)抗組胺治療效果欠佳。CSU雖不危及生命，但因伴有瘙癢，影響患者日常生活和工作，致患者睡眠障礙、生活質(zhì)量下降。CSU病因復(fù)雜，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為免疫因素是導(dǎo)致CSU發(fā)病的一個(gè)重要因素[5]，患者血清中存在抗高親和力IgE受體(FcεRI)和抗IgE的自身抗體，這些自身抗體可激活肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞脫顆粒釋放組胺、白三烯等炎癥介質(zhì)而引起蕁麻疹[6]， CSU患者血清中自身抗體可以通過ASST間接檢測。本研究結(jié)果顯示CSU患者ASST陽性率為53.3%，明顯高于正常對照組(P<0.05)，進(jìn)一步說明了部分CSU患者血清中存在自身抗體，免疫因素參與了CSU的發(fā)病機(jī)制。

IL-18為IL-1細(xì)胞因子家族成員，具有強(qiáng)大的誘生γ-干擾素能力。這種多效性細(xì)胞因子來源于單核/巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞、朗格漢斯細(xì)胞和B細(xì)胞，可以激活T細(xì)胞和誘導(dǎo)輔助性T細(xì)胞反應(yīng)[7]。Kurt等[8]研究55例慢性蕁麻疹患者和20例正常人，發(fā)現(xiàn)患者血清IL-18水平高于健康對照。本研究發(fā)現(xiàn)CSU患者血清IL-18水平明顯高于健康對照，ASST陽性CSU患者血清IL-18水平高于ASST陰性患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，表明血清IL-18水平與CSU發(fā)病密切相關(guān)，進(jìn)一步支持CSU發(fā)病機(jī)制的自身免疫理論。本研究結(jié)果亦顯示，ASST結(jié)果及IL-18水平與CSU嚴(yán)重程度無相關(guān)性，提示臨床進(jìn)行ASST檢查及IL-18水平測定對了解CSU病因及發(fā)病機(jī)制有幫助，對指導(dǎo)臨床治療也可能有一定意義，但不能作為病情嚴(yán)重程度的判斷指標(biāo)。本研究結(jié)果提示，針對免疫因素導(dǎo)致的CSU患者，臨床上可考慮應(yīng)用更積極的治療方法。有報(bào)道全身應(yīng)用糖皮質(zhì)激素、甲氨蝶呤、環(huán)孢素A等藥物治療免疫相關(guān)性蕁麻疹有滿意療效[9-10]。Pereira等[11]靜脈注射丙種球蛋白治療嚴(yán)重的難治性CSU，臨床癥狀緩解，抗組胺藥物維持量減少，療效可維持長達(dá)1年以上。 有報(bào)道用奧馬珠單抗(omalizumab)治療對抗組胺藥物反應(yīng)差的免疫相關(guān)性蕁麻疹有良好效果[12]。Westby等[13]報(bào)道對于難治性CSU患者，如果ASST陽性和(或)血清IL-18水平升高，可選擇加用免疫抑制劑等藥物治療。本研究靜態(tài)檢測了CSU患者ASST及血清中IL-18水平，今后將動(dòng)態(tài)觀察多種藥物治療CSU前后的ASST陽性率和血清IL-18水平的變化，為有效治療CSU提供更有實(shí)用價(jià)值的參考。