2018～2019年陜西省臨床實(shí)驗(yàn)室梅毒血清學(xué)室間質(zhì)評(píng)結(jié)果分析

藺兆星，郭博陽(yáng)，王耀斐，干 娜，賀 琪，李 鴿，朱參勝

（陜西省地方病防治研究所/陜西省皮膚性病防治所,西安710003）

梅毒是由梅毒螺旋體感染人引起的慢性、系統(tǒng)性性傳播疾病，同時(shí)也可在子宮內(nèi)發(fā)生母嬰傳播，嚴(yán)重危害人體（包括新生兒）的健康[1]。梅毒的血清學(xué)檢測(cè)是目前梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷的重要依據(jù)，對(duì)梅毒患者的臨床診斷與治療，以及梅毒傳染病疫情的及時(shí)上報(bào)意義重大。梅毒的實(shí)驗(yàn)室血清學(xué)檢測(cè)方法根據(jù)檢測(cè)對(duì)象的不同分為兩大類(lèi)，一是以檢測(cè)梅毒螺旋體特異性抗體的梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)，二是以檢測(cè)梅毒螺旋體非特異性抗體的非梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)[2]。為進(jìn)一步提高我省二級(jí)及以上醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)的臨床實(shí)驗(yàn)室梅毒血清學(xué)檢測(cè)水平，陜西省皮膚性病防治所組織全省386家醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)開(kāi)展了2018～2019年臨床實(shí)驗(yàn)室梅毒血清學(xué)室間質(zhì)量評(píng)價(jià)活動(dòng)，現(xiàn)將結(jié)果分析報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 參控實(shí)驗(yàn)室 陜西省二級(jí)及以上醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)共386家參與了本次梅毒血清學(xué)檢測(cè)室間質(zhì)量評(píng)價(jià)活動(dòng)，包括綜合醫(yī)療機(jī)構(gòu)308家，婦幼機(jī)構(gòu)63家，疾病預(yù)防控制中心14家，第三方醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)1家，其中經(jīng)省性病中心實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)收合格的規(guī)范化性病實(shí)驗(yàn)室24家。

1.2 參控樣本 梅毒血清參控樣本統(tǒng)一采購(gòu)自北京金豪制藥股份有限公司，所有參控樣本均已滅活處理，但仍需按照傳染性樣本對(duì)待。參控樣本儲(chǔ)存于2～8℃，在冷藏運(yùn)輸?shù)臈l件下分發(fā)至全省386家參控實(shí)驗(yàn)室。預(yù)期值參照生產(chǎn)廠商提供的說(shuō)明書(shū)。

1.3 方法 每家參控實(shí)驗(yàn)室收到1套（5支）參控樣本，1份質(zhì)評(píng)說(shuō)明書(shū)。要求各參控實(shí)驗(yàn)室在建議檢測(cè)期內(nèi)，用各自實(shí)驗(yàn)室常規(guī)使用的梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法，分別對(duì)5支參控樣本進(jìn)行梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)以及非梅毒螺旋體血清學(xué)定性和定量試驗(yàn)檢測(cè)。按要求在規(guī)定時(shí)間內(nèi)通過(guò)陜西省梅毒質(zhì)評(píng)系統(tǒng)向省性病中心實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)報(bào)質(zhì)評(píng)活動(dòng)的所有結(jié)果。質(zhì)評(píng)結(jié)果總分100分，其中梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)和非梅毒螺旋體血清學(xué)定量試驗(yàn)各占50分。每支參控樣本與預(yù)期值一致得10分，漏報(bào)或與預(yù)期值不一致得0分。綜合得分80分及以上為合格，單項(xiàng)得分40分及以上為合格。

2 結(jié)果

2.1 質(zhì)評(píng)成績(jī) 見(jiàn)表1。全省參控的386家實(shí)驗(yàn)室全部按時(shí)回報(bào)了質(zhì)評(píng)結(jié)果，上報(bào)率為100%。386家參控實(shí)驗(yàn)室得分≥80分的384家，＜80分的2家，全省總合格率為99.48%。梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)單項(xiàng)得分≥40分的386家，無(wú)＜40分的，單項(xiàng)合格率100%。非梅毒螺旋體血清學(xué)定量試驗(yàn)單項(xiàng)得分≥40分的349家，＜40分的37家，單項(xiàng)合格率90.41%。

表1 2018～2019年陜西省梅毒血清學(xué)室間質(zhì)評(píng)成績(jī)分布[實(shí)驗(yàn)室數(shù)(%)]

2.2 質(zhì)評(píng)符合率 見(jiàn)表2。全省386家參控實(shí)驗(yàn)室的梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)符合率達(dá)到99.79%，非梅毒螺旋體血清學(xué)定性試驗(yàn)符合率達(dá)98.91%，而非梅毒螺旋體血清學(xué)定量試驗(yàn)符合率為91.32%。符合率的計(jì)算是按照所檢測(cè)項(xiàng)目的檢測(cè)符合例數(shù)/該項(xiàng)目實(shí)際檢測(cè)例數(shù)×100%。

表2 2018～2019年陜西省梅毒血清學(xué)室間質(zhì)評(píng)符合率

2.3 檢測(cè)方法比較 本次386家參控實(shí)驗(yàn)室所用檢測(cè)方法的符合率見(jiàn)表3。

2.4 質(zhì)評(píng)錯(cuò)誤結(jié)果分析 本次質(zhì)評(píng)活動(dòng)全省總計(jì)171例結(jié)果回報(bào)與預(yù)期值不符，其中非梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)定量錯(cuò)誤146例，定性錯(cuò)誤21例（TRUST假陰性15例，RPR假陰性6例）。梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)定性錯(cuò)誤4例（TP-CLIA，TP-ELISA，TP-RT假陰性各1例，TP-CLIA假陽(yáng)性1例）。

3 討論

梅毒血清學(xué)檢測(cè)是目前實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)梅毒的主要手段。通過(guò)臨床實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)確的梅毒血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果，結(jié)合患者流行病學(xué)史和臨床表現(xiàn)，才能對(duì)患者是否感染梅毒、梅毒的分期、隱性梅毒或是胎傳梅毒作出正確診斷[3]。開(kāi)展室間質(zhì)評(píng)活動(dòng)有利于評(píng)估并提高全省各參控實(shí)驗(yàn)室的梅毒血清學(xué)檢測(cè)能力，同時(shí)也是實(shí)現(xiàn)全省規(guī)范化性病實(shí)驗(yàn)室全面建設(shè)的基礎(chǔ)前提[4]。

本次2018～2019年全省梅毒室間質(zhì)評(píng)活動(dòng)，為了評(píng)估各臨床實(shí)驗(yàn)室梅毒血清學(xué)的實(shí)際檢測(cè)能力，只將梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)和非梅毒螺旋體血清學(xué)定量試驗(yàn)的參控樣本檢測(cè)成績(jī)納入考核，且二者各占50%。在實(shí)際工作中，根據(jù)考評(píng)的側(cè)重點(diǎn)不同，也有報(bào)道參控樣本的檢測(cè)成績(jī)只占質(zhì)評(píng)總成績(jī)的50%，剩余50%則為現(xiàn)場(chǎng)督導(dǎo)檢查評(píng)分[5]，該類(lèi)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)最終反映的是參控實(shí)驗(yàn)室的綜合檢測(cè)能力。此外，在本次室間質(zhì)評(píng)活動(dòng)中，雖然考評(píng)了非梅毒螺旋體血清學(xué)定性試驗(yàn)但并未算入考核成績(jī)，是因?yàn)槠浒诹朔敲范韭菪w血清學(xué)定量試驗(yàn)中，而后者除了能夠反映定性結(jié)果外，還可反映出參控實(shí)驗(yàn)室對(duì)定量結(jié)果滴度判讀的準(zhǔn)確性。

表3 不同梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法的符合率

在梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)、非梅毒螺旋體血清學(xué)定性和定量試驗(yàn)符合率方面，與其他省份梅毒血清學(xué)檢測(cè)室間質(zhì)評(píng)報(bào)告的符合率情況大體一致，同時(shí)本次質(zhì)評(píng)非梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)的符合率只達(dá)到91.32%，同樣相對(duì)低于梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)[6-8]。從參控實(shí)驗(yàn)室性質(zhì)來(lái)看，第三方醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)三項(xiàng)符合率均達(dá)到了100%；婦幼機(jī)構(gòu)各項(xiàng)符合率次之，分別為100%，99.37%和94.29%，排名第二；而參控?cái)?shù)量最多的綜合醫(yī)院由于檢驗(yàn)水平不齊，整體符合率低于婦幼機(jī)構(gòu)而排名第三；最后整體符合率最低的是疾控機(jī)構(gòu)分別為98.57%，98.57%和90.00%。提示除了對(duì)全省各級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行培訓(xùn)外，也應(yīng)加強(qiáng)對(duì)疾控機(jī)構(gòu)梅毒相關(guān)檢測(cè)人員的技術(shù)培訓(xùn)。

從檢測(cè)方法來(lái)看，在梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)中，雖然梅毒螺旋體明膠顆粒凝集實(shí)驗(yàn)(TPPA)是梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)的金標(biāo)準(zhǔn)且符合率較高，但由于該方法對(duì)操作人員水平有較高要求且不能實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，所以多數(shù)參控實(shí)驗(yàn)室選擇酶聯(lián)免疫法（213家）或是化學(xué)發(fā)光法（81家）進(jìn)行替代，而在多數(shù)條件有限的參控實(shí)驗(yàn)室（58家）中，免疫層析快檢法也受到廣泛應(yīng)用，上述三種方法本次回報(bào)的符合率均在99.5%以上；在非梅毒螺旋體血清學(xué)定量試驗(yàn)中，甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)(TRUST)和快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)(RPR)作為目前臨床應(yīng)用最廣的兩種方法，其使用實(shí)驗(yàn)室數(shù)相近，分別為223家和163家，且二者在定量檢測(cè)中的符合率也相近，分別為91.25%和91.41%。

對(duì)此次質(zhì)評(píng)活動(dòng)171例錯(cuò)誤結(jié)果具體分析如下：①非梅毒螺旋體血清學(xué)定量試驗(yàn)錯(cuò)誤最多，共計(jì)146例，其中128例高于預(yù)期值范圍，而剩余的18例則低于預(yù)期值范圍，此外上述錯(cuò)誤接近4/5都是與預(yù)期值范圍只差一個(gè)滴度；②非梅毒螺旋體血清學(xué)定性試驗(yàn)的21例錯(cuò)誤結(jié)果均為假陰性，除1家參控實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)明顯失誤將滴度范圍在1∶4～1∶16的參控樣本回報(bào)成了陰性外，其余20例都是將滴度范圍在1∶1～1∶4的參控樣本回報(bào)成了陰性；③最后在梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)的4例定性錯(cuò)誤結(jié)果中出現(xiàn)了1例假陽(yáng)性，可能是由于該參控實(shí)驗(yàn)室所用化學(xué)發(fā)光法過(guò)于敏感導(dǎo)致。雖然梅毒螺旋體血清學(xué)檢測(cè)靈敏度和特異度更高的免疫印跡法尚未在全省的臨床實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)用[9]，但本次質(zhì)評(píng)出現(xiàn)的大多數(shù)錯(cuò)誤并不是檢測(cè)方法造成的，而是可以通過(guò)規(guī)范檢測(cè)操作來(lái)避免的。

本次室間質(zhì)評(píng)活動(dòng)，全省386家二級(jí)及以上醫(yī)療機(jī)構(gòu)只有2家參控實(shí)驗(yàn)室存在非梅毒螺旋體血清學(xué)定量試驗(yàn)單項(xiàng)漏報(bào)的情況，整體上報(bào)率較2014年的97.4%有了很大改善，可以看出各參控實(shí)驗(yàn)室的主動(dòng)性有所提高，這與近年來(lái)在全省積極開(kāi)展臨床實(shí)驗(yàn)室性病檢測(cè)技術(shù)培訓(xùn)和規(guī)范化性病實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)收密不可分。各市（區(qū)）衛(wèi)生行政部門(mén)認(rèn)真貫徹落實(shí)了《性病防治管理辦法》和《陜西省預(yù)防與控制梅毒規(guī)劃（2010～2020年）》，今年全省參控實(shí)驗(yàn)室數(shù)由2014年的341家增長(zhǎng)至386家，覆蓋了全省12個(gè)市（區(qū)），而總合格率也由2014年的70.97%上升至99.48%，非梅毒螺旋體血清學(xué)定性和定量試驗(yàn)的符合率也由2014年的97.69%和76.16%分別上升至98.91%和91.32%[10]。此外，全省非梅毒螺旋體血清學(xué)定量試驗(yàn)還存在很大提升空間，今后需要加強(qiáng)此方面的技術(shù)培訓(xùn)和規(guī)范化性病實(shí)驗(yàn)室的驗(yàn)收督導(dǎo)工作，從而進(jìn)一步提高全省梅毒血清學(xué)檢測(cè)水平。