枳實(shí)中酚類化合物的分離與鑒定

鄧可眾 劉聰 萇美燕 宗琪 熊英

中圖分類號 R284.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號 1001-0408（2020）09-1040-04

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.09.04

摘 要 目的：分離鑒定枳實(shí)中的酚類化合物，為其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究提供參考。方法：采用硅膠柱色譜、HW-40F凝膠柱色譜、ODS反相柱色譜以及制備高效液相色譜（HPLC）等方法對枳實(shí)中酚類化合物進(jìn)行分離純化，并根據(jù)其理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果與結(jié)論：從枳實(shí)中分離鑒定了12個化合物，分別為6′-O-trans-cinnamoyl-3，5-dihydroxyphenyl β-D-glucopyranoside（化合物1）、3-（2′，4′-二羥基苯基）丙酸甲酯（化合物2）、間苯三酚（化合物3）、Aurantiside A（化合物4）、5，7，4′-三羥基-8，3′-二甲氧基黃酮-3-O-6″-（3-羥基-3-甲基戊二酸單酯）-β-D-葡萄糖苷（化合物5）、香橙素-7-O-β-D-葡萄糖苷（化合物6）、橙皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷（化合物7）、柚皮苷（化合物8）、橙皮苷（化合物9）、蕓香柚皮苷（化合物10）、新圣草苷（化合物11）、圣草次苷（化合物12）。其中，化合物1為新化合物，化合物2、3為首次從柑橘屬植物中分離得到。

關(guān)鍵詞 枳實(shí);化學(xué)成分;酚類化合物;分離;鑒定

Isolation and Identification of Phenols Compounds in Aurantii Fructus Immaturus

DENG Kezhong，LIU Cong，CHANG Meiyan，ZONG Qi，XIONG Ying（College of Pharmacy， Jiangxi University of TCM， Nanchang 330004， China）

ABSTRACT? ?OBJECTIVE： To separate and identify the phenols compounds in Aurantii Fructus Immaturus， and to provide reference for basic research of its effective substances. METHODS： The phenols compounds were isolated and separated by silica gel， HW-40F gel column， ODS reversed column and preparation HPLC. Their physicochemical properties and spectral data were used to identify the structures. RESULTS & CONCLUSIONS： Totally 12 compounds were isolated from Aurantii Fructus Immaturus， identified as 6′-O-trans- cinnamoyl-3，5-dihydroxyphenyl β-D-glucopyranoside （compound 1）， methyl 3-（2′，4′- dihydroxy phenyl） propionate （compound 2）， phloroglucinol （compound 3）， aurantiside A （compound 4）， 5，7，4′-trihydroxy-8，3′-dimethoxyflavone-3-O-6″-（3-hydroxyl-3-methylglutaroyl） β-D-glucopyranoside （compound 5）， aromadendrin-7-O-β-D- glucopyranside （compound 6） ， hesperidin-7-O-β-D-glucoside （compound 7）， naringin （compound 8）， hesperidin （compound 9）， narirutin （compound 10）， neoeriocitrin （compound 11）， eriocitrin （compound 12）. Among them， compound 1 is a new compound， and compounds 2 and 3 are isolated from Critus for the first time.

KEYWORDS? ?Aurantii Fructus Immaturus; Chemical constituents; Phenols compounds; Isolation; Identification

枳實(shí)為蕓香科柑橘屬植物酸橙（Citrus aurantium L.）及其栽培變種或甜橙（C. sinesis Osbeck）的干燥幼果[1]，主產(chǎn)于江西、湖南、重慶等地。枳實(shí)為常用理氣類中藥，具有破氣消積、化痰散痞之效，常用于治療胃腸積滯導(dǎo)致的痞滿脹痛[2]。本課題組前期已報道枳實(shí)中的雜環(huán)類[3]、香豆素類[4]等化學(xué)成分，推測枳實(shí)中還含有較多的其他類化學(xué)成分，現(xiàn)采用硅膠柱色譜、HW-40F凝膠柱色譜、ODS柱色譜以及制備高效液相色譜（HPLC）等方法對枳實(shí)中酚類化合物進(jìn)行分離純化，并根據(jù)其理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，以期為枳實(shí)藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的闡明提供參考。

1 材料

1.1 儀器與色譜柱

Avance HD型600 MHz核磁共振儀（瑞士Bruker公司）;VERIEX70型傅里葉變換紅外光譜儀（日本島津公司）;BS 224S型電子分析天平（德國賽多利斯公司）;ZF-1型三用紫外分析儀（上海寶山顧村電光儀器廠）;1100 LC/MSD Trap SL型質(zhì)譜儀（美國Agilent公司）;2489 Alliance Separations Module型制備液相色譜儀、2695型HPLC儀（美國Waters公司）;ODS-AQ色譜柱、Phenomenex C18色譜柱（日本YMC公司）。

1.2 藥品與試劑

枳實(shí)藥材于2013年購于江西省樟樹市藥材市場，經(jīng)江西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院熊英教授鑒定為蕓香科柑橘屬植物酸橙（C. aurantium L.）的干燥幼果;柚皮苷對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：0722-200108，純度：>98%）;蕓香柚皮苷對照品（上海源葉生物科技有限公司，批號：YY90132，純度：>98%）;HW-40F凝膠（日本TOSOH公司）;大孔樹脂HP-20（日本三菱化學(xué)公司）;柱色譜硅膠（100～300目）、GF254薄層硅膠（青島海洋化工廠）;甲醇為色譜純，石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷等試劑均為分析純，水為純凈水。

2 方法與結(jié)果

2.1 枳實(shí)中酚類化合物的提取與分離

取50 kg枳實(shí)，粉碎，采用5倍量（L/kg，下同）體積的95%、70%乙醇依次滲漉提取20 d，提取液減壓回收，得浸膏;將浸膏用水分散，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇（各約50 L）萃取，減壓濃縮得3種不同萃取物浸膏（其中石油醚萃取部分親脂性較強(qiáng)，故暫未進(jìn)行分離）。

2.1.1 乙酸乙酯層浸膏的分離 取乙酸乙酯層浸膏1 kg，經(jīng)硅膠柱色譜分離，以二氯甲烷-甲醇（1 ∶ 0、49 ∶ 1、? 19 ∶ 1、8 ∶ 2、7 ∶ 3、5 ∶ 5、0 ∶ 1，V/V）梯度洗脫，流速約50? ? mL/min。依據(jù)薄層色譜檢測結(jié)果，合并得146個流分。其中第133流分再經(jīng)ODS反相柱色譜分離，以水-甲醇（1 ∶ 0、9 ∶ 1、8 ∶ 2、7 ∶ 3、6 ∶ 4、5 ∶ 5、4 ∶ 6、3 ∶ 7、2 ∶ 8、1 ∶ 9、0 ∶ 1， V/V）梯度洗脫，流速為10 mL/min，并根據(jù)薄層色譜主斑點(diǎn)合并得22個組分即Fr.1A～Fr.22A。Fr.15A組分經(jīng)HW-40凝膠柱色譜分離，甲醇洗脫，制備液相色譜[流動相為甲醇-水（4 ∶ 6，V/V）]純化，得化合物1（29.5 mg）;Fr.3A析出結(jié)晶得化合物3（68 mg）;Fr.11A和Fr.14A同樣經(jīng)HW-40凝膠柱色譜分離以及制備液相色譜[流動相分別為甲醇-水（3 ∶ 7，V/V）和甲醇-水（4 ∶ 6，V/V）]純化，得到化合物 2（7 mg）和化合物7（60 mg）。第135流分同樣經(jīng)ODS反相柱色譜分離，以水-甲醇（1 ∶ 0、9 ∶ 1、8 ∶ 2、7 ∶ 3、6 ∶ 4、5 ∶ 5、4 ∶ 6、3 ∶ 7、2 ∶ 8、1 ∶ 9、0 ∶ 1，V/V）梯度洗脫，流速為10 mL/min，并根據(jù)薄層色譜主斑點(diǎn)合并得16個組分即Fr.1B～Fr.16B，其中Fr.1B組分經(jīng)制備液相色譜[流動相為甲醇-水（3 ∶ 7，V/V）]分離純化，得到化合物4（40.7 mg）和化合物6（42.3 mg）。

2.1.2 正丁醇層浸膏的分離 取正丁醇層浸膏1.5 kg，經(jīng)過大孔樹脂柱色譜分離，將30%乙醇洗脫部分經(jīng)ODS反相柱色譜分離，以水-甲醇（1 ∶ 0、9 ∶ 1、8 ∶ 2、7 ∶ 3、6 ∶ 4、? ?5 ∶ 5、4 ∶ 6、3 ∶ 7、2 ∶ 8、1 ∶ 9、0 ∶ 1，V/V）梯度洗脫，流速為10 mL/min，得22個組分即Fr.1C～Fr.22C，其中Fr.3C、Fr.17C采用制備液相色譜[流動相分別為甲醇-水（4.5 ∶ 5.5，V/V）和甲醇-水（4 ∶ 6，V/V）]純化，分別得化合物 5（77.1 mg）和化合物8（10 mg）;Fr.2C經(jīng)HW-40凝膠柱色譜分離，甲醇洗脫，得8個流分，再將洗脫的第2、5流分分別采用制備液相色譜[流動相分別為甲醇-水（4.5 ∶ 5.5，V/V）和甲醇-水（3.5 ∶ 6.5，V/V）]純化，得化合物9（24.6 mg）、化合物10（12 mg）、化合物11（11.7 mg）、化合物12（11 mg）。

2.2 枳實(shí)中酚類化合物的結(jié)構(gòu)鑒定

采用波譜數(shù)據(jù)和理化性質(zhì)以及紅外光譜、質(zhì)譜等方法鑒定各化合物的結(jié)構(gòu)。

化合物1：黃色粉末。高分辨質(zhì)譜顯示其分子離子峰 [M+Na]+質(zhì)荷比（m/z）為 441.116 2，推測分子式為C21H22O9 ;紅外光譜中3 435、1 634、1 497、1 400、1 385、? 1 165、1 078、 831 cm-1的吸收峰表明該化合物含有羥基、共軛酯基和苯環(huán)。薄層色譜（紫外光下觀察，下同）中為暗斑點(diǎn)，10% 硫酸乙醇加熱后顯棕灰色。1H-NMR中δH 7.72（1H，d，J=16.2 Hz，H-7″）和6.62（1H，d，J=16.2 Hz，H-8″）為一對反式耦合雙鍵上的2個H質(zhì)子信號，δH 7.63（2H，m）、7.42（3H，m）結(jié)合13C-NMR中δc 118.7（C-8″）、129.4（C-3″，5″）、130.0（C-4″）、131.5（C-2″，6″）、135.8（C-1″）、146.6（C-7″）、168.6（C-9″），說明分子中含有1個肉桂?；?δH 6.12（2H，d，J=2.4 Hz，H-2，6）、5.99（1H，t，J=1.8 Hz，H-4）和δc 96.8（C-2，6）、98.1（C-4）、160.2（C-3，5）、160.9（C-1），說明苯環(huán)上有間位3取代;? ?δH 4.86（1H，d，J=7.2Hz，H-1′）為糖的端基H質(zhì)子，δH 3.73～3.42（4H，m，H-2′，3′，4′，5′）、δH 4.60（1H，dd，J=2.4、12.0 Hz，H-6′a）、 4.32（1H，dd，J=7.2、12.0 Hz，H-6′b）結(jié)合δc 65.0（C-6′）、71.8（C-4′）、74.9（C-2′）、75.5（C-5′）、78.0（C-3′）、102.1（C-1′），說明該化合物為葡萄糖苷，該糖苷經(jīng)酸水解后通過薄層色譜鑒定為D型葡萄糖，并根據(jù)耦合常數(shù)的大小推斷該苷鍵構(gòu)型為β-型。在碳?xì)溥h(yuǎn)程相關(guān)（HMBC）譜中，根據(jù) δc 168.6（C-9″）和δH 4.60（1H，dd，J=2.4、12.0 Hz，H-6′a）、4.32（1H，dd，J=7.2、12.0 Hz，H-6′b）有HMBC信號，并且δc 168.6（C-9″）還與反式雙鍵的一對質(zhì)子δH 7.72（1H，d，J=16.2 Hz，H-7″）、6.62（1H，d，J=16.2 Hz，H-8″）有遠(yuǎn)程相關(guān)，推測肉桂酰基的羰基碳與葡萄糖的6位相連;δc 160.9（C-1）與δH 4.86（1H，d，J=7.2Hz，H-1′）有遠(yuǎn)程相關(guān)，并且還與δH 6.12（2H，d，J=2.4 Hz，H-2，6）有遠(yuǎn)程相關(guān)，推測葡萄糖的端基連有1個3-取代苯環(huán)。因此，確定化合物1的結(jié)構(gòu)為6′-O-trans-cinnamoyl-3，5-dihydroxyphenyl β-D- glucopyranoside，經(jīng)查閱美國化學(xué)文摘數(shù)據(jù)庫，發(fā)現(xiàn)其為新化合物。化合物1的化學(xué)結(jié)構(gòu)見圖1。

化合物2：黃色油狀物。薄層色譜中為暗斑點(diǎn)，10%硫酸乙醇加熱后顯紫色。1H-NMR（CD3OD，600 MHz） δ：6.83（1H，d，J=8.4 Hz，H-6），6.26（1H，d，J=2.4 Hz，H-3），6.19（1H，dd，J=8.4、2.4 Hz，H-5），3.63（3H，s，O-CH3），2.77（2H，t，J=7.8 Hz），2.55（2H，t，J=7.8 Hz）。13C-NMR（CD3OD，150 MHz）δ：175.9（C-9），157.9（C-2），157.2（C-4），131.4（C-6），119.3（C-1），107.3（C-5），103.4（C-3），51.9（OCH3），35.4（C-8），26.5（C-7）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道[5]基本一致，故鑒定化合物2為3-（2′，4′-二羥基苯基）丙酸甲酯。

化合物3：白色塊狀晶體。薄層色譜中為暗斑點(diǎn)，10%硫酸乙醇加熱后顯橘黃色。1H-NMR（CD3OD，600 MHz） δ：5.79（3H，d，J=1.8 Hz，H-2，4，6）。13C-NMR（CD3OD，150 MHz） δ：159.8（C-1，3，5），95.6（C-2，4，6）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道[6]基本一致，故鑒定化合物3為間苯三酚。

化合物4：淡黃色粉末。薄層色譜中為暗斑點(diǎn)，10% 硫酸乙醇加熱后顯灰褐色。1H-NMR（CD3OD，600 MHz） δ：7.64（1H，d，J=15.6 Hz，H-7″），7.21（1H，d，J=1.8 Hz，H-2″），7.11（1H，dd，J=1.8、8.4 Hz，H-6″），6.81（1H，d，J=8.4 Hz，H-5″），6.44（1H，d，J=15.6 Hz，H-8″），6.20（1H，d，J=8.4 Hz，H-5″），6.11（2H，d，J=2.4 Hz，H-2，6），5.97（1H，t，J=2.4 Hz，H-4），4.85（1H，d，J=7.2 Hz，H-1′），4.56（1H，dd，J=2.4、12.0 Hz，H-6′a），4.30（1H，dd，J=6.6、12.0 Hz，H-6′b），3.92（3H，s，OCH3），3.72～3.37（4H，m，H-2′，3′，4′，5′）。13C-NMR（CD3OD，400 MHz）δ：56.5（OCH3），64.7（C-6′），71.8（C-4′），74.8（C-2′），75.5（C-5′），78.0（C-3′），96.8（C-2，6），98.1（C-4），102.1（C-1′），111.8（C-2″），115.2（C-8″），116.5（C-5″），124.2（C-6″），127.7（C-1″），147.1（C-7″），149.4（C-3″），150.8（C-4″），160.1（C-3，5），160.8（C-1），169.2（C-9″）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道[7]基本一致，故鑒定化合物4為Aurantiside A。

化合物5：黃色油狀物。薄層色譜中為暗斑點(diǎn)，10%硫酸乙醇加熱后顯黃色。1H-NMR（CD3OD，600 MHz） δ：7.92（1H，s，H-2′），7.67（1H，d，J=8.4 Hz，H-6′），6.87（1H，d，J=8.4 Hz，H-5′），6.21（1H，s），5.30（1H，d，J=7.2 Hz，H-1″），4.20（1H，d，J=10.2 Hz，H-6″a），4.09（1H，m，H-6″b），3.92（3H，s，O-CH3），3.87（3H，s，O-CH3），3.59～3.45（4H，m，H-2″，3″，4″，5″），2.46（4H，m，H-2[′ ′ ′]，4[′ ′ ′]），1.16（3H，s，H-6[′ ′ ′]）。13C-NMR（CD3OD，150 MHz） δ：179.4（C-4），174.9（C-5[′ ′ ′]），172.2（C-1[′ ′ ′]），158.5（C-7），158.4（C-2），157.9（C-5），151.0（C-4′），150.2（C-9），148.3（C-3′），135.3（C-3），129.1（C-8），123.9（C-6′），122.9（C-1′），116.1（C-5′），114.1（C-2′），105.6 （C-10），104.0（C-1″），100.1（C-6），77.8（C-3″），75.6（C-3[′ ′ ′]），73.8（C-5″），71.5（C-2″），70.6（C-4″），64.4（C-6″），62.0（O-CH3），56.6（O-CH3），46.1（C-2[′ ′ ′]），45.8（C-4[′ ′ ′]），27.5（C-6[′ ′ ′]）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道[8]基本一致，故鑒定化合物5為5，7，4′-三羥基-8，3′-二甲氧基黃酮-3-O-6-（3-羥基-3-甲基戊二酸單酯）-β-D-葡萄糖苷。

化合物6：黃色粉末。薄層色譜中為暗斑點(diǎn)，10%硫酸乙醇加熱后顯黃色。1H-NMR（600 MHz，CD3OD） δ：7.33（2H，d，J=8.4 Hz，H-2′，6′），6.82（2H，d，J=8.4 Hz，H-3′，5′），6.22（1H，J=1.8 Hz，H-8 ），6.21（1H，J=1.8 Hz，H-6），5.39（1H，d，J=2.4 Hz，H-2），4.98（1H，d，J=7.2 Hz，H-1″），3.90（1H，m，H-3）。13C-NMR（150 MHz，CD3OD） δ ：197.2（C-4），167.0（C-5），166.9（C-7），163.2（C-9），159.3（C-4′），130.7（C-1′），129.1（C-2′，6′），116.4（C-3′，5′），105.0（C-10），101.2（C-1″），98.0（C-6），96.9（C-8），80.6（C-2），78.3（C-3″），77.8（C-5″），74.64（C-2″），71.14（C-4″），62.32（C-6″），77.2（C-3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道[9]基本一致，故鑒定化合物6為香橙素-7-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物7：黃色粉末。薄層色譜中為暗斑點(diǎn)，10%硫酸乙醇加熱后顯黃色。1H-NMR（DMSO-d6，600 MHz）δ ：12.04（1H，s，5-OH），9.11（1H，s，3′-OH），6.94（1H，d，J=8.8 Hz，H-5′），6.93（1H，s，H-2′），6.88（1H，d，J=8.3 Hz，H-6′），6.15（1H，s，H-8），6.13（1H，s，H-6），5.50（1H，dd，J=2.4、12.0 Hz，H-2），4.96（1H，d，J=7.6 Hz），為糖的端基質(zhì)子信號;δ：3.77（1H，s，O-CH3），3.20（1H，m，H-3a），2.77（1H，dd，J=17.0、2.4 Hz，H-3b）。13C-NMR（DMSO-d6，150 MHz） δ：197.1（C-4），165.3（C-7），162.9（C-5），162.6（C-9），148.0（C-4′），146.5（C-3′），130.9（C-1′），117.9（C-6′），114.2（C-2′），112.0（C-5′），103.3（C-10），99.6（C-1″），96.5（C-6），95.5（C-8），78.5（C-2），77.1（C-3″），76.3（C-5″），73.0（C-2″），69.5（C-4″），60.6（C-6″），55.7（OCH3），42.2（C-3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道[10]基本一致，故鑒定化合物7為橙皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物8：黃色粉末。薄層色譜中為暗斑點(diǎn)，10% 硫酸乙醇加熱后顯黃色。采用HPLC法[11]分析，流動相為甲醇-水（3.5：6.5，V/V），檢測波長為238 nm，以柚皮苷對照品為對照。結(jié)果，化合物8與柚皮苷對照品的保留時間一致，因此鑒定化合物8為柚皮苷。

化合物9：淡黃色粉末。薄層色譜中為暗斑點(diǎn)，10% 硫酸乙醇加熱后顯黃色。Molish反應(yīng)呈陽性。1H-NMR（C5D5N，600 MHz） δ：7.48（1H，d，J=1.8 Hz，H-2′），7.05（1H，dd，J=1.8、7.8 Hz，H-6′），6.97（1H，d，J=7.8 Hz，H-5′），6.74（1H，d，J=1.8 Hz，H-8），6.71（1H，d，J=7.8 Hz，H-6），5.35（1H，dd，J=3.0、12.6 Hz，H-2），5.67（1H，d，J=7.2 Hz，H-1″），4.79（1H，br.s，H-1[′ ′ ′]），3.59（3H，s，OCH3），3.26（1H，dd，J=12.6、16.8 Hz，H-3a），2.89（1H，dd，J=3.0、16.8 Hz，H-3b），1.77（3H，d，J=6.0 Hz，rhamnosyl-CH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道[12]基本一致，故鑒定化合物9為橙皮苷。

化合物10：淡黃色粉末。薄層色譜中為暗斑點(diǎn)，10% 硫酸乙醇加熱后顯黃色。1H-NMR（CD3OD，600 MHz） δ：7.35（2H，d，J=8.4 Hz，H-2′，6′），6.45（2H，d，J=8.4 Hz，H-3′，5′），6.22（1H，br. s，H-8），6.19（1H，br. s，H-6），5.42（1H，m，H-2），4.97（1H，d，J=7.2 Hz，H-1″），4.72（1H，br. s，H-1[′ ′ ′]），3.33～3.99（10H，m，H-Glc和Rha），3.12（1H，m，H-3a），2.76（1H，m，H-3b），1.21（3H，d，J=6.0 Hz，CH3）。采用HPLC法[11]分析，流動相為甲醇-水（3.5 ∶ 6.5，V/V），檢測波長為238 nm，以蕓香柚皮苷對照品為對照。結(jié)果，化合物10與蕓香柚皮苷對照品的保留時間一致，因此鑒定化合物10為蕓香柚皮苷。

化合物11：黃色結(jié)晶（甲醇）。薄層色譜中為暗斑點(diǎn)，10% 硫酸乙醇加熱后顯紅色。1H-NMR（DMSO-d6，600 MHz） δ：6.90（1H，dd，J=1.8、8.4 Hz，H-6′），6.76（2H，m，H-2′，5′），6.11（1H，d，J=2.4 Hz，H-8），6.09（1H，d，J=2.4 Hz，H-6），5.45（1H，dd，J=4.8、12.0 Hz，H-2），5.32（1H，br. s，H-1[′ ′ ′]），4.71（1H，dd，J=7.8、2.4 Hz，H-1″），1.16（3H，d，J=6.0 Hz，CH3）。13C-NMR（DMSO-d6，150 MHz） δ：197.8（C-4），165.3（C-7），163.4（C-5），163.2（C-9），146.4（C-4′），145.7（C-3′），129.7（C-1′），118.7（C-6′），115.8（C-5′），114.9（C-2′），103.8（C-10），101.0（C-1[′ ′ ′]），100.9（C-1″），96.7（C-6），95.6（C-8），79.4（C-2），79.1（C-3″），77.6（C-5″），77.4（C-2″），76.6（C-4[′ ′ ′]），72.3（C-3[′ ′ ′]），70.9（C-2[′ ′ ′]），70.0（C-4″），68.7（C-5[′ ′ ′]），60.9（C-6″），42.6（C-3），17.9（C-6[′ ′ ′]）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道[13]基本一致，故鑒定化合物11為新圣草苷。

化合物12：黃色結(jié)晶（甲醇）。1H-NMR（DMSO-d6，600 MHz）δ：6.97（1H，d，J=8.4 Hz，H-6′），6.81（2H，br.s，H-2′，5′），6.21（1H，br. s，H-8），6.20（1H，br. s，H-6），5.36（1H，t，J=12.0 Hz，H-2），4.97（1H，d，J=7.2 Hz，H-1″），4.71（1H，d，J=2.4 Hz，H-1[′ ′ ′]），3.12（1H，t，J=15.6 Hz，H-3a），2.78（1H，t，J=15.6 Hz，H-3b），1.22（3H，d，J=6.0 Hz，rhamnosyl-CH3）。13C-NMR（DMSO-d6，150 MHz） δ：198.7（C-4），167.0（C-7），165.1（C-5），164.6（C-9），147.1（C-4′），146.7（C-3′），131.8（C-1′），119.4（C-6′），116.4（C-5′），115.0（C-2′），105.1（C-10），102.3（C-1[′ ′ ′]），101.3（C-1″），97.9（C-6），97.1（C-8），80.7（C-2），78.0（C-3″），77.2（C-5″），74.8（C-2″），74.2（C-4[′ ′ ′]），72.5（C-? ?3[′ ′ ′]），72.2（C-2[′ ′ ′]），71.4（C-4″），69.9（C-5[′ ′ ′]），67.6（C-6″），43.7（C-3），18.1（C-6[′ ′ ′]）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道[13]基本一致，故鑒定化合物12為圣草次苷。

3 討論

本研究從枳實(shí)中分離鑒定了12個酚類化合物，包括4個酚苷和8個黃酮類成分。其中，黃酮類成分如柚皮苷、橙皮苷、蕓香柚皮苷在蕓香科柑橘屬植物中分布較為普遍，具有抗氧化、抗炎、抗腫瘤、促胃腸動力等多種藥理活性[14]，應(yīng)用價值廣泛。筆者查閱美國化學(xué)文摘、SCIE、中國知網(wǎng)、維普網(wǎng)等數(shù)據(jù)庫，發(fā)現(xiàn)化合物1為新化合物，化合物2和化合物3（間苯三酚）是首次從柑橘屬植物中分離得到的，其中間苯三酚是非阿托品非罌粟類的平滑肌解痙劑，也是消化系統(tǒng)痙攣性疼痛的首選藥[15]，化合物1和化合物4均為間苯三酚的衍生物，故筆者推測枳實(shí)中間苯三酚及其衍生物可能是其理氣作用的有效成分，但具體作用機(jī)制仍需進(jìn)一步深入研究。

參考文獻(xiàn)

[ 1 ] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部[S]. 2015年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：247.

[ 2 ] 姜峰.經(jīng)方枳實(shí)應(yīng)用規(guī)律淺析[J].中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2009，15（7）：522-523.

[ 3 ] 鄧可眾，萇美燕，宗琪，等.枳實(shí)藥材乙醇提取物的化學(xué)成分研究[J].中國藥房，2018，29（4）：458-460.

[ 4 ] XIONG Y，CHANG M，DENG K，et al. A new phenolic glycoside and two new monoterpenoid furocoumarins from Aurantii Fructus Immaturus[J]. Nat Prod Res，2016，30（14）：1571-1576.

[ 5 ] 李良波，何翊，溫秀萍，等.綿頭雪蓮的化學(xué)成分研究[J].時珍國醫(yī)國藥，2013，24（1）：5-7.

[ 6 ] 韓麗平.雞血藤的化學(xué)成分研究[J].中國藥房，2006，17（20）：1596-1598.

[ 7 ] 張永勇，倪麗，范春林，等.枳實(shí)中一個新的酚苷成分[J].中草藥，2006，37（9）：1295-1297.

[ 8 ] 丁邑強(qiáng)，熊英，周斌，等.枳殼中黃酮類成分的分離與鑒定[J].中國中藥雜志，2015，40（12）：2352-2356.

[ 9 ] 李藥蘭，王輝，范兆永，等.水團(tuán)花黃酮類成分及其體外抗病毒活性[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2009，21（5）：740- 743.

[10] 鄭健，高慧媛，陳廣通，等.留蘭香的活性成分：Ⅰ[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報，2006，23（3）：145-147.

[11] 王淳，呂署一，宋志前，等.高分離度快速液相色譜法測定不同產(chǎn)地枳實(shí)中主要黃酮類成分的含量[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2009，15（6）：1-3.

[12] 張慶華，蔣以號，龔千鋒，等.枳殼樟幫炮制品黃酮類化學(xué)成分研究[J].時珍國醫(yī)國藥，2010，21（10）：2536-2537.

[13] 閔鵬，趙慶春，高云佳，等.常山胡柚汁化學(xué)成分的研究[J].中國藥物化學(xué)雜志，2010，20（2）：129-132.

[14] 金元寶，劉萍，劉小根，等.柚皮苷的生物活性研究進(jìn)展[J].中國現(xiàn)代醫(yī)藥雜志，2018，20（3）：92-97.

[15] 李健和，易利丹，彭六保，等.間苯三酚的藥理作用與臨床應(yīng)用[J].中國新藥與臨床雜志，2011，30（7）：494-499.

（收稿日期：2020-01-30 修回日期：2020-03-26）

（編輯：唐曉蓮）