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    營口市育齡女性MTHFR與MTRR基因多態(tài)性分布研究

    2020-07-23 06:15王麗霞呂妍張波張亞男朱文秀李悅胡季芳魯衍強
    中外女性健康研究 2020年9期
    關(guān)鍵詞:基因多態(tài)性

    王麗霞 呂妍 張波 張亞男 朱文秀 李悅 胡季芳 魯衍強

    【摘 要】 目的:針對營口市育齡女性開展分子流行病學(xué)調(diào)查,研究葉酸代謝關(guān)鍵酶MTHFR和MTRR的基因多態(tài)性分布。方法:以孕期保健的457名健康女性為研究對象,采集口腔黏膜上皮脫落細胞,抽提基因組DNA,使用熒光定量PCR方法檢測MTHFR C677T、A1298C和MTRR A66G基因多態(tài)性,進行統(tǒng)計分析。結(jié)果:1)入組對象的基因多態(tài)性分布符合遺傳平衡。2)MTHFR 677CC、CT、TT的基因型頻率分別為24.3%、49.0%、26.7%,C、T等位基因頻率分別為48.8%、51.2%;MTHFR 1298AA、AC、CC的基因型頻率分別為71.6%、26.3%、2.2%,A、C等位基因頻率分別為84.7%、15.3%;MTRR 66AA、AG、GG的基因型頻率分別為54.9%、38.1%、7.0%,A、G等位基因頻率分別為74.0%、26.0%。3)MTHFR C677T和A1298C兩位點連鎖有7種組合,頻率最高的是CT/AA(31.7%),沒有TT/AC和TT/CC組合。兩位點間存在完全連鎖不平衡。結(jié)論:獲取營口市育齡女性MTHFR和MTRR基因多態(tài)性的群體遺傳學(xué)特征。

    【關(guān)鍵詞】 基因多態(tài)性;亞甲基四氫葉酸還原酶;甲硫氨酸合成酶還原酶

    Study on the distribution of MTHFR and MTRR gene polymorphism in women of childbearing age in Yingkou City

    Wang Lixia1, Lv Yan1, Zhang Bo1, Zhan Yanan1, Zhu Wenxiu1, Li Yue1, Hu Jifang2, Lu Yanqiang*2

    1.Yingkou Ren Ai Hospital, Yingkou, Liaoning 115000;

    2.Shanghai Zhangjiang Puhui Institute of Translational Medicine, Shanghai 200433

    [Abstract] Objective:To investigate the molecular polymorphism of the key enzymes of folate metabolism, MTHFR and MTRR, in a molecular epidemiological survey of Childbearing Age women in Yingkou City. Methods: A total of 457 healthy women were enrolled in the study. The oral mucosal epithelial exfoliated cells were harvested, genomic DNA was extracted, and the MTHFR C677T, A1298C and MTRR A66G gene polymorphisms were detected by real-time PCR. Results: 1) The distribution of gene polymorphisms in the enrolled subjects was consistent with genetic balance. 2) The genotype frequencies of MTHFR 677CC, CT and TT were 24.3%, 49.0% and 26.7%, respectively. The frequencies of C and T alleles were 48.8% and 51.2%, respectively. The genotype frequencies of MTHFR 1298AA, AC and CC were respectively 71.6%, 26.3%, 2.2%, A, C allele frequencies were 84.7%, 15.3%; MTRR 66AA, AG, GG genotype frequencies were 54.9%, 38.1%, 7.0%, A, G, etc. The locus frequencies were 74.0% and 26.0%, respectively. 3) There are 7 combinations of MTHFR C677T and A1298C two-point linkage. The highest frequency is CT/AA (31.7%), and there is no combination of TT/AC and TT/CC. There is a complete linkage disequilibrium between the two points. Conclusion: The population genetics of MTHFR and MTRR gene polymorphisms were obtained in women of childbearing age in Yingkou City.

    [Key words]Gene polymorphism; Methylenetetrahydrofolate reductase; Methionine synthase reductase

    葉酸是人體重要的營養(yǎng)素,葉酸攝入不足或代謝障礙會造成體內(nèi)同型半胱氨酸升高和甲基化降低。孕期葉酸營養(yǎng)不足會導(dǎo)致神經(jīng)管畸形[1]、先天性心臟病[2]、唐氏綜合征[3]、唇腭裂[4]等出生缺陷,并與流產(chǎn)[5]、早產(chǎn)[6]等不良妊娠結(jié)局以及妊娠期糖尿病[7]、妊娠期高血壓[8]等疾病密切相關(guān)。5,10-亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)和甲硫氨酸合成酶還原酶(MTRR)是葉酸代謝通路中的關(guān)鍵酶,基因多態(tài)性決定了不同的酶活性以及葉酸利用能力。本研究針對營口市育齡女性開展分子流行病學(xué)調(diào)查,研究MTHFR C677T、A1298C和MTRR A66G的基因多態(tài)性分布,獲取本地區(qū)的群體遺傳學(xué)特征。

    1 資料與方法

    1.1 研究對象

    選取2019年1月至6月到營口仁愛醫(yī)院進行孕期檢查的健康女性,依據(jù)知情同意原則采集口腔黏膜細胞,入組對象457人。

    1.2 檢測方法

    利用硅膠吸附法提取口腔黏膜細胞樣本的基因組DNA。采用熒光定量PCR技術(shù),檢測MTHFR C677T、A1298C和MTRR A66G基因多態(tài)性。相關(guān)儀器、試劑均購自美國ABI公司。

    1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

    采用HaploView 4.2軟件進行SNPs的Hardy-Weinberg平衡、連鎖不平衡水平(linkage disequilibrium,LD)分析。SPSS 19.0軟件分析基因型和等位基因頻率。

    2 結(jié)果

    2.1 Hardy-Weinberg平衡分析

    入組對象的MTHFR C677T、A1298C和MTRR A66G基因多態(tài)性分布符合遺傳平衡(P>0.05)。見表1。說明數(shù)據(jù)來自同一孟德爾群體,樣本具有群體代表性。

    2.2 基因型頻率分析

    見表2。

    2.3 等位基因頻率分析

    見表3。

    2.4 MTHFR C677T和A1298C連鎖及單倍型分析

    MTHFR C677T和A1298C兩位點連鎖有7種組合,頻率最高的是CT/AA(31.7%),之后依次是TT/AA(26.7%)、CT/AC(17.1%)、CC/AA(13.1%)、CC/AC(9.2%)、CC/CC(2.0%)、CT/CC(0.2%),沒有TT/AC和TT/CC組合。見表4。

    MTHFR C677T和A1298C兩個位點構(gòu)建的單倍型均存在3種組合:TA(51.0%)、CA(33.7%)、CC(15.1%),兩位點間存在完全連鎖不平衡(D=0.978,LOD:23.4,r2=0.182)。

    3 討論

    MTHFR和MTRR的基因多態(tài)性分布具有地域差異[9]。營口市地處遼東半島中樞,渤海東岸,之前未見相關(guān)群體遺傳學(xué)報道。根據(jù)本研究,營口市育齡女性MTHFR 677TT的基因型頻率為26.7%,677T等位基因頻率為51.2%,均高于已有報道的新疆阿克蘇地區(qū)[10](21.9%,47.1%)、浙江麗水市[11](14.0%、37.7%)、貴州貴陽市[12](13.7%,37.7%)、湖北宜都市[13](12.2%,36.8%)、廣東佛山市[14](5.6%,21.5%)等地的數(shù)據(jù),低于山東淄博市[15](43.6%,65.6%)、河南新鄉(xiāng)市[16](38.9%,62.0%)、河北廊坊市[17](37.8%,60.9%)、遼寧沈陽市[18](31.3%,56.6%)等地的數(shù)據(jù)。

    通過調(diào)查不同地區(qū)葉酸代謝關(guān)鍵酶的基因多態(tài)性分布,可以為基于群體遺傳特征的出生缺陷病因?qū)W研究和臨床干預(yù)研究提供依據(jù),指導(dǎo)科學(xué)增補葉酸營養(yǎng),實施個性化保健。

    參考文獻

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    基金項目:中國婦幼保健協(xié)會科研項目“我國婦女圍孕期健康及出生缺陷干預(yù)研究”(MHBD-0417-001)

    作者簡介:王麗霞(1966-),女,研究生,主任醫(yī)師。研究方向:產(chǎn)科遺傳咨詢

    *魯衍強為本文通訊作者

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