強(qiáng)生VITROS 4600全自動干式生化儀性能驗證*

戴俊華，韓 月，唐 浩，彭輝勇

江蘇省鎮(zhèn)江市第一人民醫(yī)院檢驗科，江蘇鎮(zhèn)江 212002

強(qiáng)生VITROS 4600全自動干式生化儀(以下簡稱“VITROS 4600”)由美國強(qiáng)生公司生產(chǎn)，目前被廣泛應(yīng)用于國內(nèi)大、中型醫(yī)院急診生化、常規(guī)生化檢驗。其原理是將分析試劑全部固化在多層復(fù)合干片上，分析時只需少量待檢標(biāo)本滴在干片上進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)，具有方便、快速、準(zhǔn)確、省時、環(huán)保、穩(wěn)定及試劑有效期長等特點(diǎn)[1-2]。根據(jù)《醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則(ISO15189：2012)》[3]《臨床檢驗方法確認(rèn)與性能評價》[4]《臨床檢驗方法評價》[5]中的相關(guān)要求，本研究對急診檢驗室使用的VITROS 4600開展的12個生化項目進(jìn)行精密度、準(zhǔn)確度、攜帶污染率、線性范圍及參考區(qū)間性能驗證。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取本院體檢中心20例健康志愿者為研究對象，年齡20～60歲。20例志愿者中男7例，其中20～<30歲2例，30～<40歲2例，40～<50歲1例，50～<60歲2例；女13例，其中20～<30歲3例，30～<40歲7例，40～<50歲2例，50～<60歲1例。收集20例健康志愿者的血液標(biāo)本，標(biāo)本無明顯溶血、脂血、黃疸等。

1.2儀器與試劑 VITROS 4600及原裝配套試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品。

1.3檢測項目 尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)、血糖(GLU)、尿酸(UA)、鉀(K)、鈉(Na)、氯(Cl)、鈣(Ca)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、淀粉酶(AMY)。

1.4方法

1.4.1精密度驗證 參照美國臨床實驗室改進(jìn)修正案1988(CLIA′88)制定的能力比對檢驗分析質(zhì)量要求[6]及廠家要求，選取兩個水平質(zhì)控品(高水平和低水平質(zhì)控品)，連續(xù)重復(fù)測定20次，計算批內(nèi)精密度(CV批內(nèi))和精密度指數(shù)，CV批內(nèi)≤1/4允許總誤差(TEa)或精密度指數(shù)≤1為合格；同樣使用兩個水平質(zhì)控品，每天檢測1次，連續(xù)檢測20 d，在此過程中不能更換試劑批號及質(zhì)控品批號，計算批間精密度(CV批間)，CV批間≤1/3TEa為合格。

1.4.2準(zhǔn)確度驗證 在設(shè)備上檢測高水平和低水平質(zhì)控品的相關(guān)檢測項目，每個水平重復(fù)2次，記錄實測均值并與定標(biāo)品的定值比較，計算偏倚，準(zhǔn)確度偏倚≤1/2TEa為合格。

1.4.4線性范圍驗證 選取1份H(接近線性范圍上限)，1份L(接近線性范圍下限)，將H和L按體積比例5L、4L+1H、3L+2H、2L+3H、1L+4H、5H關(guān)系進(jìn)行混合，將實測值(Y)與理論值(X)進(jìn)行比較，計算公式Y(jié)=bX+a，驗證線性范圍。斜率b值在1.00±0.03內(nèi)，r2≥0.95為合格。

1.4.5參考區(qū)間驗證 項目參考區(qū)間的評價：如果20例研究對象中不超過2例(或10%的結(jié)果)的觀察值在驗證的參考區(qū)間之外，廠商或提供參考區(qū)間實驗室報告的95%參考區(qū)間可以接受。若2例以上研究對象的觀察值超出參考區(qū)間，再選20例研究對象進(jìn)行驗證，若≤2例觀察值超過驗證的參考區(qū)間，則可以接受。若又有2例以上觀察值超過驗證的參考區(qū)間，應(yīng)重新檢查分析條件，決定實驗室是否需要自行建立參考區(qū)間。

1.5統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件和Excel進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析和數(shù)據(jù)處理。

2 結(jié) 果

2.1精密度CV批間和CV批內(nèi)結(jié)果及精密度指數(shù)見表1，均符合CLIA′88質(zhì)量分析及廠家聲明的要求，通過驗證。

表1 VITROS 4600精密度驗證結(jié)果

表2 VITROS 4600準(zhǔn)確度驗證結(jié)果

2.2準(zhǔn)確度 結(jié)果顯示，12個檢測項目均通過驗證，見表2。

2.3攜帶污染率 結(jié)果顯示，K1和K2均為-10%～10%，通過驗證，見表3。

表3 VITROS 4600攜帶污染率結(jié)果(%)

2.4線性范圍 12個檢測項目的斜率b均在1.00±0.03內(nèi)，r2≥0.95，表明檢測的12個生化項目實測值和理論值具有良好的線性關(guān)系，通過驗證，見表4。

2.5參考區(qū)間驗證 本研究驗證的12個項目廠家提供的參考區(qū)間：BUN為1.7～7.5 mmol/L；CREA為35～135 μmol/L；GLU為3.8～6.1 mmol/L；UA為145～428 μmol/L；K為3.5～5.1 μmol/L；Na為135～145 mmol/L；Cl為95～106 mmol/L；Ca為2.20～2.75 mmol/L；AST為0～40 U/L；LDH為110～220 U/L；CK為10～110 U/L；AMY為20～220 U/L。本研究驗證的參考區(qū)間結(jié)果均合格，見表5。

表4 VITROS 4600線性范圍驗證結(jié)果

表5 12個檢測項目參考區(qū)間驗證結(jié)果

續(xù)表5 12個檢測項目參考區(qū)間驗證結(jié)果

注：R值>90%為合格,R值=測定結(jié)果在參考范圍內(nèi)的例數(shù)/總測定例數(shù)×100%。

3 討 論

臨床檢驗工作量大，內(nèi)容豐富多樣，而實驗室儀器自動化程度高，可檢測多種指標(biāo)，打破了傳統(tǒng)檢驗人工完成為主，效率低、成本高的局限。與此同時，標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化的實驗室質(zhì)量控制也越來越受到重視。雖然廠家已提供儀器的性能參數(shù)，但由于各實驗室、地區(qū)、環(huán)境及操作人員等之間存在差異，實驗室在儀器使用前必須進(jìn)行性能驗證，以確定設(shè)備能達(dá)到所要求的性能指標(biāo)，這對保證檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性至關(guān)重要[7-10]。VITROS 4600采用干片試劑進(jìn)行檢測，避免了液體試劑保存時間短、復(fù)融時間長等缺點(diǎn)。該儀器能夠快速檢測生化項目，平均檢測時間為6 min左右，能夠滿足急診檢驗的需求。

本研究依據(jù)EP5-A2[11]、EP6-A2[12]、EP15-A2[13]、C28-A2[14]對VITROS 4600的精密度、準(zhǔn)確度、攜帶污染率、線性范圍、參考區(qū)間進(jìn)行性能驗證。結(jié)果顯示，各檢測項目CV批間<1/3TEa，CV批內(nèi)<1/4TEa，精密度指數(shù)≤1，表明該儀器檢測隨機(jī)誤差小，具有良好的重復(fù)性。準(zhǔn)確度驗證試驗顯示，結(jié)果偏倚均小于1/2TEa，表明該儀器檢測準(zhǔn)確度好。攜帶污染率是指標(biāo)本間的污染程度，本研究結(jié)果顯示，攜帶污染率均為-10%～10%，表明該儀器具有較好的加樣系統(tǒng)和自潔系統(tǒng)，避免了交叉污染，可以連續(xù)測量樣品。線性范圍即分析測量范圍，是由檢測系統(tǒng)直接測量得到的可靠結(jié)果范圍，在此范圍內(nèi)檢測不同樣品分析物的測量值和其真實值呈線性比例關(guān)系。本研究中12個項目回歸方程斜率b值均在1.00±0.03內(nèi)，r2≥0.95，表明該儀器線性范圍良好。參考區(qū)間驗證試驗顯示，R值均≥95%，表明可以引用此參考區(qū)間。

綜上所述，VITROS 4600是一種精密度較高，準(zhǔn)確度較好，攜帶污染較低，線性范圍較好及檢測速度較快的分析儀，其性能能夠滿足臨床工作的需求。通過對該檢測系統(tǒng)的性能驗證，不僅可保證檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，而且符合臨床實驗室質(zhì)量管理要求。