撫州市2016-2018年手足口病病毒核酸檢測(cè)結(jié)果分析

朱智龍，唐 榮，王曉敏

江西省撫州市疾病預(yù)防控制中心，江西撫州 344000

手足口病(HFMD)是由多種腸道病毒引起的急性傳染病，多發(fā)生于學(xué)齡前兒童，5歲以下兒童發(fā)病率最高。HFMD主要臨床表現(xiàn)為發(fā)熱，手、腳和口腔等部位出現(xiàn)皰疹，重癥者甚至呼吸困難，心臟驟停，出現(xiàn)死亡。國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)在2008年已將HFMD納入法定傳染病管理。目前，已發(fā)現(xiàn)有20多種型別的腸道病毒能夠引起HFMD，以腸道病毒71型(EV71)和柯薩奇病毒A16型(CoxA16)最為常見[1-2]。本文通過(guò)對(duì)撫州市2016-2018年送檢的2 072份咽拭子標(biāo)本進(jìn)行分析，旨在及時(shí)掌握本市HFMD的病原學(xué)特征和流行情況。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016-2018年撫州市各區(qū)縣醫(yī)療機(jī)構(gòu)送檢的臨床診斷為HFMD患兒的咽拭子標(biāo)本共2 072份。其中男1 335例，女737例；年齡1個(gè)月至23歲。所有標(biāo)本均按要求運(yùn)送和保存。

1.2儀器與試劑 RNA提取采用Promega公司生產(chǎn)的核酸自動(dòng)純化儀及配套試劑盒(Maxwell 16病毒核酸純化試劑盒)；未分型病毒(PE)、EV71和CoxA16熒光定量PCR(RT-PCR)核酸檢測(cè)試劑盒由深圳市生科源技術(shù)有限公司提供；擴(kuò)增儀為BIO-RAD CFX96 Real-Time System。

1.3方法 病毒核酸檢測(cè)：核酸提取按照Promega公司的提取試劑盒說(shuō)明書提取病毒RNA。PE、EV71和CoxA16核酸檢測(cè)反應(yīng)體系和條件按照深圳市生科源技術(shù)有限公司HFMD病毒RT-PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書操作，擴(kuò)增條件如下：(1)逆轉(zhuǎn)錄和預(yù)變性。50 ℃，10 min；95 ℃，3 min。(2)擴(kuò)增。95 ℃，5 s；55 ℃，60 s，循環(huán)數(shù)45次，檢測(cè)通道FAM有明顯擴(kuò)增曲線，檢測(cè)結(jié)果循環(huán)閾值(Ct)≤35為陽(yáng)性，3538或未檢出為陰性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用Microsoft Excel2007及SPSS17.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1HFMD病毒檢出情況 采集的2 072份咽拭子標(biāo)本中共檢出陽(yáng)性標(biāo)本1 248份，總陽(yáng)性率為60.23%(1 248/2 072)，其中PE陽(yáng)性標(biāo)本828份，占總陽(yáng)性的66.35%；EV71陽(yáng)性標(biāo)本105份，占總陽(yáng)性的8.41%；CoxA16陽(yáng)性315份，占總陽(yáng)性的25.24%。2016年有2例重癥患兒，其標(biāo)本均為PE感染。2016-2018年P(guān)E陽(yáng)性檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=36.77，P<0.01)，各年P(guān)E的陽(yáng)性檢出率均為最高，見表1。

表1 2016-2018年撫州市HFMD病毒檢出情況[n(%)]

2.2不同年齡段患兒HFMD病毒核酸檢出情況 2016-2018年0～<1歲、1～<2歲、2～<3歲、3～<4歲、≥4歲HFMD患兒病毒核酸總陽(yáng)性率分別為12.3%(154/1 248)、41.1%(513/1 248)、23.6%(294/1 248)、12.4%(155/1 248)、10.6%(132/1 248)。2例重癥患兒分別為1歲1例，2歲1例，均為PE感染。3年間1～<2歲年齡段病毒核酸陽(yáng)性率最高，為41.1%；其次為2～<3歲年齡段，陽(yáng)性率為23.6%，見表2。

表2 2016-2018年不同年齡段HFMD病毒核酸陽(yáng)性情況[n(%)]

2.3時(shí)間分布 2016-2018年各月份均檢出HFMD陽(yáng)性病例，其中患病高峰期在春末和秋季，夏季和冬季患病率降低，見圖1。

圖1 2016-2018年撫州市HFMD患病時(shí)間分布

3 討 論

HFMD具有較強(qiáng)的傳染性，短期內(nèi)能造成大規(guī)模的暴發(fā)[3]。HFMD由腸道病毒引起，以往研究表明，EV71及CoxA16是為較為常見的型別[4-6]。但本研究發(fā)現(xiàn)，撫州市近3年引起HFMD的主要病原體為PE，與戴洪柱等[7]研究結(jié)果相似。出現(xiàn)的2例重癥患兒也為PE感染。提示應(yīng)當(dāng)引起重視，病原體已經(jīng)發(fā)生變化，加強(qiáng)對(duì)PE的監(jiān)測(cè)，密切觀察PE感染者的病情變化，以減少死亡病例的發(fā)生。

本研究對(duì)感染患兒的年齡分布進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，4歲以下患兒占89.42%(1 116/1 248)，與文獻(xiàn)[8-9]研究結(jié)果相似。1～<2歲年齡段陽(yáng)性率最高，與楊飛[10]的結(jié)果相似；2～<3歲年齡段患兒陽(yáng)性率次之，2例重癥也發(fā)生在1～<2歲和2～<3歲年齡段中。可能原因?yàn)榛純耗挲g越小，衛(wèi)生意識(shí)較差，患病率越高，隨著年齡增長(zhǎng)，良好的衛(wèi)生習(xí)慣逐漸養(yǎng)成，患病率逐漸下降。提示幼兒應(yīng)是預(yù)防HFMD的重點(diǎn)人群，建議對(duì)<5歲兒童接種HFMD疫苗，以降低HFMD患病率[11]。

本研究結(jié)果顯示，2016-2018年，HFMD的發(fā)病高峰期出現(xiàn)在春末夏初時(shí)期，此時(shí)期南方氣溫適宜，雨水充沛，可能有利于病毒增殖；夏季時(shí)天氣炎熱，氣溫較高，不利于病毒增殖；在秋季，隨著氣溫下降，病毒再次進(jìn)入活躍期，建議此時(shí)期應(yīng)加大對(duì)學(xué)校、幼兒園及社區(qū)進(jìn)行HFMD的預(yù)防宣傳，告知兒童及家長(zhǎng)勤洗手、多通風(fēng)。

HFMD的傳染源是患兒和健康的病毒攜帶者，因此，早發(fā)現(xiàn)、早報(bào)告、早治療、早隔離是控制該病暴發(fā)和擴(kuò)散的有效措施，疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)應(yīng)及時(shí)掌握該病的病原學(xué)分型特征和流行情況，對(duì)疾病的早期防控和治療有重要意義。