氣相色譜法測(cè)定蒲公英中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留

楊秀蝦

摘 要：目的：建立毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定蒲公英藥材中14種組分殘留。方法：采用QuEChERS法作為樣品前處理方法，用氣相色譜法測(cè)定蒲公英藥材中14種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量。結(jié)果：14種有機(jī)磷農(nóng)藥在各自線性范圍內(nèi)均具有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.997 7～1.000 0，在低、中、高3個(gè)加標(biāo)水平的平均回收率為65.5%～107.4%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.8%～14.2%（n=4）。結(jié)論：該方法快速、準(zhǔn)確、操作簡(jiǎn)單、靈敏度高，可用于蒲公英藥材中上述14種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的快速篩查與定量分析。

關(guān)鍵詞：蒲公英;氣相色譜法;有機(jī)磷農(nóng)藥;QuEChERS

Abstract：Objective： To establish methods for determination of 14 organophosphorus pesticide residues in dandelion by gas chromatography. Methods： QuEChERS was used as sample pretreatment method， and 14 organophosphorus pesticide residues in dandelion were determined by gas chromatography. Results： 14 pesticides tested showed good linear relationships in their respective linear ranges， with correlation coefficients ranging from 0.997 7 to 1.000 0. Average recoveries at low， medium and high spiked levels were 65.5%～107.4%， and relative standard deviations were1.8% ～14.2% （n=4）. Conclusion This method is rapid， accurate， which is easy to be operated with high sensitivity， and can be used for rapid screening and quantitative analysis of above 14 organophosphorus pesticide residues in dandelion.

Key words：Dandelion; Gas chromatography; Organophosphorus pesticide; QuEChERS

蒲公英系菊科植物蒲公英（Taraxacum mongolicum Hand.-Mazz.），堿地蒲公英（Taraxacum sinwum Kitag.）或同屬數(shù)種植物的干燥全草[1]。蒲公英味苦、甘，性寒，具有清熱解毒、消腫散結(jié)、舒筋固齒、養(yǎng)陰涼血之功效，是臨床上常用的中藥?，F(xiàn)代研究表明，蒲公英富含多糖、黃酮、多酚等活性物質(zhì)，具有抗菌消炎、抗氧化、抗病原微生物及抑制腫瘤等藥理活性[2]。蒲公英是一種可作為藥食兩用的多年生草本植物，分布于我國(guó)大部分地區(qū)。目前對(duì)市售蒲公英農(nóng)藥殘留量的分析較少。本文采用毛細(xì)管氣相色譜，火焰光度檢測(cè)器（FPD），對(duì)其中的敵敵畏、甲胺磷、滅線磷、甲拌磷、特丁硫磷等14種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量進(jìn)行了檢測(cè)，為蒲公英的質(zhì)量控制提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

1.1.1 儀器

GC-2010 Plus氣相色譜儀（日本Shimadzu公司），F(xiàn)PD檢測(cè)器;LD310-2型電子天平（沈陽(yáng)龍騰電子有限公司）;IKA MS3渦旋混勻器（德國(guó)IKA公司）;TG16-WS型高速臺(tái)式離心機(jī)（湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開(kāi)發(fā)有限公司）;SPT-24氮空吹掃濃縮儀（北京斯珀特科技有限公司）;Mili-Q超純水機(jī)（美國(guó)Millipore公司）等。

1.1.2 試劑

乙腈、丙酮均為色譜純;氯化鈉、檸檬酸鈉、檸檬酸氫二鈉、硫酸鎂均為分析純;N-丙基乙二胺（PSA）吸附劑、石墨化炭黑（GCB）填料;實(shí)驗(yàn)用水為超純水;農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品：敵敵畏、甲胺磷、滅線磷、甲拌磷、特丁硫磷、氯唑磷、樂(lè)果、甲基嘧啶磷、毒死蜱、馬拉硫磷、殺螟硫磷、甲基異柳磷、水胺硫磷和丙溴磷均購(gòu)自德國(guó)Dr.Ehrenstorfer公司。

1.2 方法與結(jié)果

1.2.1 色譜條件

采用SH-Rtx-1701毛細(xì)管色譜柱，其規(guī)格為30 m×0.32 mm（內(nèi)徑）×0.25 μm（膜厚）;檢測(cè)器：FPD;進(jìn)樣口溫度：220 ℃;檢測(cè)器溫度：270 ℃;柱溫升溫程序：初溫80 ℃，保持l min;以30 ℃·min-1升溫至185 ℃，保持6 min;以30 ℃·min-1升溫至210 ℃，保持5 min;以30 ℃·min-1升溫至250 ℃，保持3 min;進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣;進(jìn)樣量：1 μL;載氣：高純氮（純度>99.999%）;燃燒氣：氫氣（純度>99.999%），流速62.5 mL·min-1;助燃?xì)猓嚎諝猓魉?0 mL/min。

1.2.2 樣品的制備

取蒲公英約5 g，精密稱量，置于50 mL塑料離心管中，加水10 mL渦旋混勻，浸泡30 min。精密加入10 mL乙腈混勻，置于冰浴中5 min，加入1 g氯化鈉、1 g檸檬酸鈉、4 g硫酸鎂、0.5 g檸檬酸氫二鈉及1顆陶瓷均質(zhì)子，劇烈振蕩1 min，置于冰浴冷卻后，4 500 r·min-1離心5 min。吸取6 mL上清液加入到內(nèi)含885 mg硫酸鎂、150 mg PSA及15 mg GCB的離心管中，渦旋混勻1 min。4 500 r·min-1離心5 min，準(zhǔn)確吸取2 mL上清液于試管中，40 ℃水浴中氮?dú)獯抵两?。加? mL丙酮復(fù)溶，過(guò)0.45 μm有機(jī)濾膜，濾液供氣相色譜測(cè)定。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性關(guān)系考察

準(zhǔn)確稱取適量的標(biāo)準(zhǔn)品（精確至0.1 mg），用丙酮溶解分別制成1 mg·mL-1的對(duì)照品儲(chǔ)備液，分別精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液制成混合農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品溶液，用丙酮稀釋成濃度為0.01、0.02、0.04、0.08、0.10、0.20、0.40 mg·L-1和1.00 mg·L-1的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，用1.2.1中色譜條件檢測(cè)，空白蒲公英藥材色譜圖見(jiàn)圖1。

14種混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液色譜圖見(jiàn)圖2。以濃度（mg·L-1）為橫坐標(biāo)（X），峰面積為縱坐標(biāo)（Y），得相應(yīng)有機(jī)磷農(nóng)藥的回歸方程，結(jié)果見(jiàn)表1，在0.01～1.00 mg·L-1濃度范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)為0.997 7～1.000 0。結(jié)果表明，各有機(jī)磷農(nóng)藥的質(zhì)量濃度（X）與峰面積（Y）呈良好線性關(guān)系。

2.2 精密度實(shí)驗(yàn)

精密吸取1 μL 1 mg·L-1的14種混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積，計(jì)算RSD，結(jié)果見(jiàn)表2。

2.3 加樣回收率實(shí)驗(yàn)

分別稱取空白蒲公英樣品5 g，各加入濃度1 μg·mL-1的14種有機(jī)磷混合標(biāo)準(zhǔn)溶液0.6、0.9、1.2 mL，充分混勻后靜置1 h，做0.12、0.18、0.24 mg·kg-1，3個(gè)水平的添加回收，每個(gè)添加濃度重復(fù)4次，按照1.2.2方法進(jìn)行樣品前處理，將所得溶液分別進(jìn)樣，按1.2.1色譜條件檢測(cè)，計(jì)算加樣回收率。在這3個(gè)添加水平下，14種農(nóng)藥的回收率在65.5%～107.4%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.8%～14.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均<20%，以上指標(biāo)均符合農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法。測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表3。

2.4 檢出限

以3倍信噪比（S/N）計(jì)算14種農(nóng)藥的定性檢出限（LOD），14種農(nóng)藥的檢出限列于表1。14種農(nóng)藥的定性檢出限為0.002～0.006 mg·kg-1。

2.5 樣品測(cè)定

按照1.2.2方法進(jìn)行樣品前處理凈化，進(jìn)行3批次蒲公英樣品的檢測(cè)，每批樣品平行試驗(yàn)3次，結(jié)果3批樣品均未檢出上述實(shí)驗(yàn)所列的14種有機(jī)磷農(nóng)藥。

3 結(jié)論

本文采用QuEChERS凈化方法，乙腈溶劑提取，氣相色譜法進(jìn)行檢測(cè)，建立了蒲公英中14種有機(jī)磷農(nóng)藥的檢測(cè)方法。該方法操作簡(jiǎn)便快捷、重現(xiàn)性好、靈敏可靠，適應(yīng)性強(qiáng)，同時(shí)節(jié)約大量的有機(jī)溶劑和時(shí)間，可為蒲公英藥材中多種農(nóng)藥殘留量的測(cè)定提供了一種簡(jiǎn)單快速篩查的檢測(cè)方法。

參考文獻(xiàn)：

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典I部[S].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2015.

[2]許先猛，董文賓，盧 軍，等.蒲公英的化學(xué)成分和功能特性的研究進(jìn)展[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)，2018，9（7）：1623-1627.