• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    防己黃芪湯對(duì)肥胖型高血壓大鼠血管內(nèi)皮保護(hù)作用機(jī)制研究

    2020-07-10 06:06:48王建波張晨新馬永鋼蔡昀潞李秀靈王洪薇
    江蘇中醫(yī)藥 2020年7期
    關(guān)鍵詞:防己肥胖型脂聯(lián)素

    王建波 張晨新 馬永鋼 蔡昀潞 李秀靈 王洪薇 曲 怡

    (遼寧中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥創(chuàng)新工程技術(shù)中心,遼寧沈陽110847)

    高血壓作為心血管疾病發(fā)病及死亡的危險(xiǎn)因素之一,其臨床的發(fā)生率逐年升高,是常伴有心、腦、腎及主動(dòng)脈等器官的功能或器質(zhì)性損害的臨床綜合征[1]。根據(jù)《中國高血壓防治指南(2018 年修訂版)》[2],中國人群高血壓的危險(xiǎn)因素主要包括高鈉低鉀膳食、超重和肥胖、過量飲酒、精神緊張和缺乏體力活動(dòng)等。近年來,我國肥胖型高血壓的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升趨勢[3]。肥胖型高血壓伴隨的糖脂代謝紊亂會(huì)加重血管內(nèi)皮的炎癥反應(yīng),進(jìn)一步加重靶器官的損傷。美國心臟協(xié)會(huì)、美國心臟病學(xué)會(huì)、肥胖學(xué)會(huì)《成人超重和肥胖管理指南》已經(jīng)明確了減重的降壓作用[4]:(1)體重減少3%~5%即可明顯改善糖脂代謝;(2)體重下降5%可使收縮壓和舒張壓分別下降3和2 mmHg。因此,對(duì)肥胖型高血壓患者體重的控制尤為重要。目前國內(nèi)針對(duì)肥胖型高血壓藥物治療常選用降壓藥聯(lián)合減肥藥物(奧利司他或具有減重作用的降糖藥物等),而難治類肥胖型高血壓并無有效控制手段,常輔助以代謝手術(shù)治療,造成很大的身體創(chuàng)傷,所以有效的肥胖型高血壓控制手段值得我們進(jìn)行深入研究。

    現(xiàn)有研究表明,防己黃芪湯可以抑制進(jìn)食進(jìn)水欲望,改善內(nèi)臟體脂分布,調(diào)節(jié)瘦素、脂聯(lián)素水平,縮小脂肪細(xì)胞體積,改善炎癥反應(yīng)等,有減輕體重、降低血壓等功效[5]。本研究旨在明確防己黃芪湯對(duì)肥胖型高血壓大鼠血管內(nèi)皮的保護(hù)作用,為難治性肥胖型高血壓臨床治療提供新思路。

    1 實(shí)驗(yàn)材料

    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF級(jí)雄性自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)60只,Wistar-kyoto(WKY)大鼠10只,體質(zhì)量(200±10)g,由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào):SCXK(京)2019-0011。飼養(yǎng)環(huán)境:遼寧中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心,濕度為(45±5)%,溫度為(22±1)℃。實(shí)驗(yàn)過程中對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處置符合國家科技部頒布的《關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見》的規(guī)定,本實(shí)驗(yàn)通過遼寧中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心倫理委員會(huì)審議同意并簽署批準(zhǔn)意見。

    1.2 主要儀器 智能無創(chuàng)血壓計(jì)(BP-2010A日本);熒光定量PCR儀(Applied Biosysterms 7500 Fast Real-Time PCR Systerm);SpectraMax i3多 功 能 酶 標(biāo) 儀(奧 地 利,Molecu-lar Devices);ABI Veriti梯 度PCR儀器(Applied Biosystems);超微量紫外分光光度計(jì)(Thermo,NANO-DROP 2000);數(shù)碼凝膠圖像處理系統(tǒng)(Tanon-5200,上海天能科技有限公司);VE-386 半干轉(zhuǎn)移電泳槽、EPS-600 電泳儀、VE-180 垂直電泳槽(Tanon Science&Technology Co.,Ltd,天能)。

    1.3 藥物與試劑 防己黃芪湯藥物組成:防己12 g,黃芪15 g,白術(shù)9 g,甘草6 g,生姜10 g,大棗5 g。上述是成年人1日劑量,共57 g。根據(jù)體表面積法換算大鼠給藥量,算出低、中、高劑量藥物濃度分別 為3.125 g/kg、6.25 g/kg、9.375 g/kg。將 購 買 的藥物顆粒(遼寧省中醫(yī)院中藥局制)放入100 ℃蒸餾水中加熱溶解,分裝置于4 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩W利司他膠囊(重慶植恩藥物有限公司,批號(hào)20180604 W0039),成人每日用量為120 mg,按照人與大鼠給藥量換算,大鼠給藥量為1.23 g/kg。常溫蒸餾水溶解奧利司他,分裝置于4 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

    LEP Elisa試劑盒(北京誠林,批號(hào)201911);ADP Elisa試 劑 盒(北 京 誠 林,批 號(hào)201911);PCR反轉(zhuǎn)試劑盒(康為世紀(jì),批號(hào)40326);PCR擴(kuò)增試劑盒(康為世紀(jì),批號(hào)60407);Trizol總RNA抽 提 試 劑(碧 云 天,批 號(hào)R0061);PCR引物(博邁德引物合成公司);組織/細(xì)胞裂解液(索萊寶,批號(hào)20190418);蛋白酶抑制劑(索萊寶,批號(hào)0190505);蛋白濃度測定試劑盒(碧云天,批號(hào)P0012S);蛋白上樣緩沖液(凱基生物,批號(hào)051319190513);發(fā)光液(碧云天,批號(hào)P0018S);凝膠快速配置試劑盒(碧云天,批號(hào)P0012AC);蛋白標(biāo)記物(凱基生物,批號(hào)20171113);內(nèi)參一 抗(愛 必 信,批 號(hào)5814);PPAR-γ一抗(圣克魯斯生物技術(shù)公司,批號(hào)00073972),二抗(安諾倫生物科技有限公司,批號(hào)RS0001);PVDF膜(邁博瑞生物膜技術(shù)有限公司,批號(hào)R9EA30212)。

    2 實(shí)驗(yàn)方法

    2.1 分組與造模 取WKY大鼠10只為空白組。取雄性SHR 60只,按隨機(jī)數(shù)字表法分為模型組、肥胖模型組、西藥組和防己黃芪湯低、中、高劑量組,每組10只。所有大鼠于SPF級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心適應(yīng)性飼養(yǎng)1周,均予普通飼料,監(jiān)測SHR收縮壓均大于150 mmHg。隨后進(jìn)入實(shí)驗(yàn)階段,空白組、模型組繼續(xù)普通飼料喂養(yǎng),其余各組采用高脂飼料喂養(yǎng)。高脂飼料由基礎(chǔ)飼料加入動(dòng)物油15%、蔗糖18%、蛋黃3%,經(jīng)過滅菌后,陰涼處保存。造模期間,每周定時(shí)檢測2次血壓、體重與進(jìn)食量并記錄。當(dāng)除空白組、模型組外的其余各組大鼠體重超過空白組體重的20%[6],血壓為160~179/100~109 mmHg,提示肥胖型高血壓大鼠模型復(fù)制成功。實(shí)驗(yàn)期間飲水飲食自由。

    2.2 藥物干預(yù) 空白組整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間正常飼養(yǎng),不做任何處理。防己黃芪湯各劑量組大鼠分別予中藥顆粒劑溶液3.125 g/kg、6.25 g/kg、9.375 g/kg藥量灌胃,西藥組大鼠予1.23g/kg奧利司他溶液灌胃,模型組與肥胖模型組給予等量蒸餾水灌胃,各組均每日灌胃1次,連續(xù)4周。

    2.3 取材 灌胃4 周后,所有大鼠禁食不禁水12 h,稱量體質(zhì)量后用10%水合氯醛腹腔注射麻醉(3 mL/kg體質(zhì)量),麻醉后用高壓滅菌后的手術(shù)剪打開腹腔,干凈紗布撥開臟器,找到腹主動(dòng)脈,取血后剔除血管粘連漿膜,用玻璃分針游離出胸主動(dòng)脈組織,修剪末支后置于凍存管中放入液氮保存。

    2.4 觀察指標(biāo)

    2.4.1 RT-PCR檢 測核 轉(zhuǎn)錄因子(NF-κB)、內(nèi)皮素-1(ET-1)、細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)mRNA表達(dá) 每個(gè)凍存管中取大鼠主動(dòng)脈100 mg,剪碎,取適量液氮研磨后,加入1 mL Trizol試劑勻漿提取總RNA,測定RNA的濃度和純度,然后進(jìn)行cDNA反轉(zhuǎn)錄,最后對(duì)反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進(jìn)行擴(kuò)增,反應(yīng)體系為20 μL,反 應(yīng) 條 件 為stage1(95 ℃,30 s)、stage2(95 ℃,5 s;60 ℃,34 s;40個(gè)循環(huán))。溶解反應(yīng)按ABI 7500自動(dòng)設(shè)定的條件進(jìn)行,即:95 ℃,15 s;60 ℃,1 min;95 ℃,30 s;60 ℃,15 s。PCR所需特異性引物序列見表1。

    表1 PCR 擴(kuò)增的特異性引物序列

    2.4.2 Elisa法檢測主動(dòng)脈瘦素、脂聯(lián)素濃度 取各組主動(dòng)脈組織100 mg分裝各管,每管中加入一定量PBS(pH7.4)制成勻漿液,離心半徑為20 cm,3000 r/min離心15 min后,仔細(xì)收取上清。設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)品孔和待測樣本孔。在標(biāo)準(zhǔn)品孔加不同量的標(biāo)準(zhǔn)品及標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液共50 μL,在樣本孔中加入待測樣本50 μL;加入酶標(biāo)試劑50 μL,封板膜后37 ℃溫育30 min;洗滌4~5 次,加入顯色劑A、顯色劑B各50 μL,封板膜后37 ℃溫育30 min;最后加入終止液50 μL,450 nm波長測定各孔的吸光度。用標(biāo)準(zhǔn)品孔的OD值繪制y=ax+b曲線,將各組的數(shù)值代入可計(jì)算出主動(dòng)脈中瘦素、脂聯(lián)素濃度。

    2.4.3 Western Blot檢測各組大鼠主動(dòng)脈組織過氧化物酶增殖物激活受體(PPAR-γ)蛋白表達(dá) 取主動(dòng)脈組織100 mg分裝各管,每管加入1 mL RIPA裂解液,研磨、離心后提取上清為總蛋白,用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定主動(dòng)脈總的蛋白濃度,每孔上樣50 μg蛋白。灌制SDS-聚丙稀酰胺凝膠進(jìn)行電泳,分離膠電泳采用80 V電壓,120 V電壓進(jìn)行濃縮膠電泳。電泳結(jié)束后取出凝膠,將凝膠上的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到PVDF膜上,經(jīng)封閉液37 ℃封閉1 h后,4 ℃孵育一抗,過夜,TBST清洗后37 ℃孵育二抗1 h,TBST清洗后用ECL試劑盒檢測,使用數(shù)碼凝膠圖像處理系統(tǒng)成像,采用photoshop分析軟件檢測條帶灰度值,得出PPAR-γ/β-actin的灰度值比值,為PPAR-γ的相對(duì)表達(dá)量。

    2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 20.0軟件分析系統(tǒng)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,數(shù)據(jù)均用(±s)表示,采用單因素方差分析進(jìn)行組間比較。組間方差齊時(shí),采用LSD檢驗(yàn);方差不齊時(shí),采用Tamhane’s T2(M)檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    3.1 各組大鼠主動(dòng)脈組織NF-κB、ET-1、ICAM-1 mRNA

    表達(dá)比較 結(jié)果見表2。與空白組比較,模型組和肥胖模型組大鼠主動(dòng)脈組織NF-κB、ET-1、ICAM-1 mRNA表達(dá)均明顯上調(diào)(P<0.05);與模型組比較,肥胖模型組大鼠上述指標(biāo)表達(dá)明顯上調(diào)(P<0.05);與肥胖模型組比較,各給藥組大鼠上述指標(biāo)表達(dá)明顯下調(diào)(P<0.05),其中防己黃芪湯高劑量組和西藥組下調(diào)最為明顯。

    3.2 各組大鼠主動(dòng)脈組織瘦素、脂聯(lián)素表達(dá)比較 結(jié)果見表3。與空白組比較,模型組和肥胖模型組大鼠主動(dòng)脈組織瘦素、脂聯(lián)素表達(dá)明顯下調(diào)(P<0.05);與模型組比較,肥胖模型組大鼠主動(dòng)脈組織瘦素、脂聯(lián)素表達(dá)明下調(diào)(P<0.05);與肥胖模型組比較,各給藥組大鼠主動(dòng)脈組織瘦素、脂聯(lián)素表達(dá)明顯上調(diào)(P<0.05),其中高劑量組和西藥組上調(diào)最為明顯。

    表2 各組大鼠胸主動(dòng)脈NF-κB、ET-1、ICAM-1 mRNA 表達(dá)比較(±s)

    表2 各組大鼠胸主動(dòng)脈NF-κB、ET-1、ICAM-1 mRNA 表達(dá)比較(±s)

    注: 與空白組比較,#P<0.05;與模型組比較,*P<0.05;與肥胖模型組比較,△P<0.05;與防己黃芪湯中劑量組比較,▲P<0.05;與西藥組比較,●P<0.05。

    組別 動(dòng)物數(shù)/只 NF-κB ET-1 ICAM-1空白組 10 1.00±0.00 1.00±0.00 1.00±0.00模型組 10 10.40±2.59# 15.10±1.91# 7.79±2.44#肥胖模型組 10 29.15±5.62#* 26.90±1.79#* 32.01±2.05#*防己黃芪湯低劑量組 10 18.84±2.22#*△● 15.54±0.65#△● 29.20±2.31#*●防己黃芪湯中劑量組 10 8.49±3.36#△ 7.45±0.28#*△ 13.00±2.57#*△●防己黃芪湯高劑量組 10 1.14±0.53*△▲ 4.29±1.55#*△ 1.42±0.49*△▲西藥組 10 0.81±0.18*△▲ 5.18±1.45#*△ 1.31±0.09*△▲

    表3 各組大鼠主動(dòng)脈組織瘦素、脂聯(lián)素表達(dá)比較(±s) 單位:μg/L

    表3 各組大鼠主動(dòng)脈組織瘦素、脂聯(lián)素表達(dá)比較(±s) 單位:μg/L

    注: 與空白組比較,#P<0.05;與模型組比較,*P<0.05;與肥胖模型組比較,△P<0.05;與防己黃芪湯中劑量組比較,▲P<0.05;與西藥組比較,●P<0.05。

    組別 動(dòng)物數(shù)/只 瘦素 脂聯(lián)素空白組 10 19.58±0.91 152.98±5.05模型組 10 14.45±0.26# 70.93±4.26#肥胖模型組 10 10.70±0.35#* 56.68±5.50#*防己黃芪湯低劑量組 10 15.63±0.50#△● 71.21±7.74#△●防己黃芪湯中劑量組 10 18.17±0.63#*△ 117.31±14.71#*△●防己黃芪湯高劑量組 10 19.27±0.71*△ 143.15±9.57*△▲西藥組 10 20.14±1.21*△▲ 150.18±2.93*△▲

    3.3 各組大鼠主動(dòng)脈組織PPAR-γ表達(dá)比較 見表4、圖1。與空白組比較,模型組和肥胖模型組大鼠主動(dòng)脈組織PPAR-γ蛋白表達(dá)明顯下調(diào)(P<0.05);與模型組比較,肥胖模型組大鼠主動(dòng)脈組織PPAR-γ蛋白表達(dá)明顯下調(diào)(P<0.05);與肥胖模型組比較,各治療組大鼠主動(dòng)脈組織PPAR-γ蛋白表達(dá)明顯上調(diào)(P<0.05),其中高劑量組和西藥組上調(diào)最為明顯。

    表4 各組大鼠主動(dòng)脈組織PPAR-γ 灰度值比較(±s)

    表4 各組大鼠主動(dòng)脈組織PPAR-γ 灰度值比較(±s)

    注: 與空白組比較,#P<0.05;與模型組比較,*P<0.05;與肥胖模型組比較,△P<0.05;與防己黃芪湯中劑量組比較,▲P<0.05;與西藥組比較,●P<0.05。

    組別 動(dòng)物數(shù)/只 PPAR-γ空白組 10 1.45±0.24模型組 10 0.77±0.10#肥胖模型組 10 0.48±0.06#*防己黃芪湯低劑量組 10 0.97±0.17#△●防己黃芪湯中劑量組 10 0.93±0.10#△防己黃芪湯高劑量組 10 1.17±0.08#*△▲西藥組 10 1.14±0.09*△

    圖1 各組大鼠胸主動(dòng)脈PPAR-γ 表達(dá)比較

    4 討論

    《中國成年人超重和肥胖與高血壓發(fā)病關(guān)系的隨訪研究》[7]發(fā)現(xiàn),肥胖組高血壓發(fā)病率是正常組的1.16~1.28倍。肥胖病機(jī)多為痰瘀與陰虛。隨著經(jīng)濟(jì)水平的提高與人們生活方式的改變,肥胖型高血壓的主要誘因是飲食不節(jié)而致過氧化物增多,脂質(zhì)代謝紊亂,氣血津液運(yùn)行不暢,津液停聚為痰,血行不暢留為瘀,痰瘀互結(jié),損傷絡(luò)脈,中醫(yī)辨證為痰濕壅盛證,正如《醫(yī)學(xué)正傳》[8]說“津液黏稠,為痰為飲,積久滲入脈中,血為之濁”。痰濁等病理產(chǎn)物隨著經(jīng)脈上犯清竅,以致血壓升高、眩暈頭痛。中醫(yī)證候?qū)W中指出脂質(zhì)代謝紊亂與痰濁血瘀關(guān)系最為密切[9]。防己黃芪湯出自張仲景《金匱要略》,主治表虛不固之風(fēng)水、風(fēng)濕。防己苦泄辛散、祛風(fēng)除濕,黃芪補(bǔ)氣健脾、固表行水,白術(shù)、甘草健脾益氣,白術(shù)、防己滲濕利水。諸藥合用,共奏益氣化痰、利水除濕之效?,F(xiàn)代學(xué)者多用于肥胖型高血壓的治療,具有減重與降壓的雙重功效[10-12]。

    PPAR-γ屬于非甾體核受體超家族,主要在肝臟、脂肪組織、血管平滑肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá),其與許多病理生理過程如肥胖、胰島素抵抗、高血壓、糖尿病和腫瘤等威脅人體健康的疾病相關(guān)。血管內(nèi)皮中PPAR-γ表達(dá)升高可以抑制血管重構(gòu)[13],多個(gè)參與脂肪前體細(xì)胞分化的基因的轉(zhuǎn)錄由PPAR-γ調(diào)控,且PPAR-γ可以調(diào)節(jié)胰島素介導(dǎo)的外周組織對(duì)葡萄糖的攝取。由此可見,PPAR-γ與脂質(zhì)儲(chǔ)存和血管病變密切相關(guān)。PPAR-γ的生物學(xué)功能主要為改善糖脂代謝異常,通過改善胰島素抵抗,糾正脂質(zhì)代謝紊亂,抑制平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的增殖與遷移,從而改善血管病理性重構(gòu),具有降壓減重的雙重功效。PPAR-γ可被多種脂肪酸及其衍生物激活,在糖脂代謝中起著重要的調(diào)節(jié)作用。PPAR-γ參與炎癥的形成[14]。在炎性反應(yīng)中,PPAR-γ通過抑制NF-κB、c-Jun氨基末端激酶(JNK)/激活蛋白1(AP-1)、環(huán)氧合酶(COX)等多途徑,降低ICAM-1、ET-1、干擾素-γ(IFN-γ)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)等因子產(chǎn)生、釋放及表達(dá)[15-16]。

    調(diào)節(jié)胰島素敏感性方面,PPAR-γ的激活會(huì)使巨噬細(xì)胞產(chǎn)生M2抗炎因子,減少白介素(IL)-1β、IL-6、TNF-α的分泌量和胰島素抵抗,同時(shí)上調(diào)脂聯(lián)素與瘦素表達(dá),實(shí)現(xiàn)降低胰島素抵抗的效果。既往研究證實(shí),中藥復(fù)方中有許多活性成分與單體能夠上調(diào)或激活組織內(nèi)PPAR-γ基因的表達(dá),從而抑制炎癥反應(yīng)[17]。現(xiàn)推測防己黃芪湯可能通過調(diào)控PPAR-γ抑制NF-κB表達(dá)抑制主動(dòng)脈炎癥反應(yīng),通過上調(diào)瘦素、脂聯(lián)素的表達(dá)調(diào)節(jié)胰島素敏感性。

    本研究結(jié)果表明,模型組大鼠NF-κB、ICAM-1、ET-1 mRNA升高,PPAR-γ、瘦素和脂聯(lián)素降低,肥胖模型組大鼠比模型組更甚。防己黃芪湯各劑量可以顯著下調(diào)NF-κB、ICAM-1、ET-1 mRNA表達(dá),上調(diào)PPAR-γ、瘦素和脂聯(lián)素的表達(dá),表明防己黃芪湯可以抑制NF-κB信號(hào)通路的激活和炎癥因子的表達(dá),調(diào)整PPAR-γ、瘦素和脂聯(lián)素的失衡狀態(tài),調(diào)節(jié)胰島素敏感性,降低血壓,保護(hù)主動(dòng)脈組織的損傷,延緩高血壓對(duì)靶器官的損傷。

    本研究下一步預(yù)計(jì)進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn),在細(xì)胞水平明確防己黃芪湯對(duì)脂肪細(xì)胞內(nèi)糖脂代謝相關(guān)信號(hào)通路作用機(jī)制。通過檢測細(xì)胞增殖,檢測PPAR-γ-LXR-ABCA1信號(hào)通路對(duì)ABCA-1和LRP-1作用下的胞內(nèi)外膽固醇交換作用以及防己黃芪湯對(duì)脂肪細(xì)胞自噬的影響,驗(yàn)證防己黃芪湯對(duì)脂肪前體細(xì)胞分化的干預(yù)作用,從而明確防己黃芪湯對(duì)關(guān)鍵性靶點(diǎn)分子PPAR-γ及其相關(guān)糖脂代謝信號(hào)通路調(diào)控作用,以精準(zhǔn)地用醫(yī)學(xué)理論闡釋防己黃芪湯對(duì)心腎微血管功能損傷的作用靶點(diǎn)以及調(diào)節(jié)機(jī)制,為探索肥胖型高血壓中藥干預(yù)策略,推動(dòng)高血壓預(yù)防、評(píng)價(jià)和治療體系建設(shè)奠定基礎(chǔ)。

    猜你喜歡
    防己肥胖型脂聯(lián)素
    防己結(jié)構(gòu)中紅外光譜研究
    煤炭與化工(2023年8期)2023-10-11 04:25:28
    撳針聯(lián)合化痰逐瘀方治療肥胖型2型糖尿病痰瘀互結(jié)證的臨床觀察
    論《金匱要略》木防己湯應(yīng)作術(shù)防己湯
    粉防己堿抗腫瘤機(jī)制的研究進(jìn)展
    中成藥(2018年12期)2018-12-29 12:25:46
    隨訪護(hù)理對(duì)肥胖型老年慢性心力衰竭患者的干預(yù)評(píng)價(jià)
    脂聯(lián)素生物學(xué)與消化系統(tǒng)腫瘤
    利拉魯肽治療肥胖型2型糖尿病療效觀察
    自噬與脂聯(lián)素誘導(dǎo)的人乳腺癌MCF-7細(xì)胞凋亡的關(guān)系
    奧利司他與肥胖型多囊卵巢綜合征的研究進(jìn)展
    脂聯(lián)素、瘦素與2型糖尿病患者輕度認(rèn)知功能障礙的關(guān)系
    精品福利观看| 一级毛片高清免费大全| 国产区一区二久久| 99久久国产精品久久久| 十八禁人妻一区二区| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 国产精品日韩av在线免费观看| 欧美av亚洲av综合av国产av| 欧美精品啪啪一区二区三区| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 在线观看免费午夜福利视频| 99国产精品一区二区蜜桃av| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 亚洲第一青青草原| 午夜a级毛片| 在线观看午夜福利视频| 最好的美女福利视频网| 日韩国内少妇激情av| 一区二区三区国产精品乱码| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 一本久久中文字幕| 国产一区二区激情短视频| 欧美又色又爽又黄视频| 亚洲国产精品合色在线| 99国产精品99久久久久| 脱女人内裤的视频| 精品久久久久久久久久久久久 | 99精品欧美一区二区三区四区| 欧美一级a爱片免费观看看 | 丝袜人妻中文字幕| 精品免费久久久久久久清纯| 女性生殖器流出的白浆| 在线免费观看的www视频| 午夜福利一区二区在线看| 丁香欧美五月| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 在线播放国产精品三级| 一进一出抽搐动态| www.www免费av| 99riav亚洲国产免费| 久久精品国产亚洲av高清一级| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 久久久久久大精品| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 免费高清视频大片| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 亚洲一区二区三区色噜噜| 黄色成人免费大全| 一区二区三区国产精品乱码| 午夜久久久久精精品| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 麻豆国产av国片精品| 一级片免费观看大全| 亚洲性夜色夜夜综合| 宅男免费午夜| 午夜福利18| 亚洲全国av大片| 亚洲熟女毛片儿| 国产私拍福利视频在线观看| 午夜日韩欧美国产| 人人澡人人妻人| 黄色a级毛片大全视频| 久久 成人 亚洲| 亚洲 欧美一区二区三区| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 看免费av毛片| 日韩大尺度精品在线看网址| 国产精品 欧美亚洲| 亚洲av电影不卡..在线观看| 亚洲一区高清亚洲精品| 精品午夜福利视频在线观看一区| 国产单亲对白刺激| av片东京热男人的天堂| 在线看三级毛片| 亚洲成a人片在线一区二区| x7x7x7水蜜桃| 免费在线观看成人毛片| 亚洲欧美激情综合另类| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 最新在线观看一区二区三区| 两人在一起打扑克的视频| 精品无人区乱码1区二区| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 91麻豆av在线| 女人被狂操c到高潮| 十分钟在线观看高清视频www| 国产成人欧美在线观看| 精品欧美一区二区三区在线| 亚洲一区高清亚洲精品| svipshipincom国产片| 可以在线观看毛片的网站| netflix在线观看网站| 亚洲最大成人中文| 在线观看66精品国产| 亚洲三区欧美一区| 大型黄色视频在线免费观看| 日韩欧美 国产精品| 怎么达到女性高潮| 狂野欧美激情性xxxx| 99热这里只有精品一区 | 国产视频内射| 人人妻人人澡人人看| 久久这里只有精品19| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 久久性视频一级片| 这个男人来自地球电影免费观看| 51午夜福利影视在线观看| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 亚洲,欧美精品.| 99热只有精品国产| 黄片小视频在线播放| АⅤ资源中文在线天堂| 国产av不卡久久| 亚洲av成人av| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 黄色视频,在线免费观看| 免费观看人在逋| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 婷婷精品国产亚洲av在线| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 一区福利在线观看| 国产91精品成人一区二区三区| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 久久久国产精品麻豆| 免费高清在线观看日韩| 最近最新免费中文字幕在线| 欧美日韩一级在线毛片| 国产97色在线日韩免费| 精品久久蜜臀av无| 十分钟在线观看高清视频www| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 国产久久久一区二区三区| 黄片播放在线免费| 免费一级毛片在线播放高清视频| 看黄色毛片网站| 欧美性长视频在线观看| 久久国产精品影院| 欧美 亚洲 国产 日韩一| www日本在线高清视频| 一本大道久久a久久精品| 搡老熟女国产l中国老女人| 曰老女人黄片| 亚洲精品在线美女| 国产成人欧美| 国产精品影院久久| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 日韩精品免费视频一区二区三区| 亚洲成人国产一区在线观看| 深夜精品福利| 十八禁网站免费在线| 亚洲人成77777在线视频| 国产伦人伦偷精品视频| 精品免费久久久久久久清纯| 性色av乱码一区二区三区2| av视频在线观看入口| 久久亚洲真实| 99riav亚洲国产免费| 嫁个100分男人电影在线观看| 欧美日韩福利视频一区二区| 久久草成人影院| 精品一区二区三区av网在线观看| 在线观看舔阴道视频| 亚洲中文字幕日韩| 亚洲精品一区av在线观看| 久久亚洲精品不卡| 深夜精品福利| a级毛片a级免费在线| 视频区欧美日本亚洲| 日日干狠狠操夜夜爽| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 免费在线观看亚洲国产| xxx96com| 久久国产精品影院| 国产私拍福利视频在线观看| 精品免费久久久久久久清纯| 桃红色精品国产亚洲av| 成熟少妇高潮喷水视频| 无限看片的www在线观看| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 男人舔女人的私密视频| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 日韩欧美三级三区| 狠狠狠狠99中文字幕| 成年人黄色毛片网站| 人妻久久中文字幕网| 精品欧美一区二区三区在线| 亚洲av电影不卡..在线观看| 色av中文字幕| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 又黄又粗又硬又大视频| 在线观看66精品国产| 男人舔奶头视频| 亚洲第一av免费看| 午夜免费激情av| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 最新美女视频免费是黄的| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 国语自产精品视频在线第100页| 亚洲成人免费电影在线观看| 欧美又色又爽又黄视频| 日韩精品免费视频一区二区三区| 黄片小视频在线播放| 久久久久久国产a免费观看| 国产精品av久久久久免费| 狠狠狠狠99中文字幕| 亚洲成av人片免费观看| 91麻豆av在线| 亚洲av中文字字幕乱码综合 | 他把我摸到了高潮在线观看| 90打野战视频偷拍视频| 日韩高清综合在线| 国产v大片淫在线免费观看| 国产人伦9x9x在线观看| 一级毛片高清免费大全| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 亚洲国产毛片av蜜桃av| www.999成人在线观看| 制服丝袜大香蕉在线| a在线观看视频网站| 人人妻人人澡人人看| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国产精品亚洲美女久久久| 久久婷婷成人综合色麻豆| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 国产精品爽爽va在线观看网站 | 老司机午夜十八禁免费视频| 一本精品99久久精品77| 中文在线观看免费www的网站 | 久久久国产成人精品二区| 在线播放国产精品三级| 欧美乱码精品一区二区三区| 久久久久久免费高清国产稀缺| 精华霜和精华液先用哪个| 久久久水蜜桃国产精品网| 日韩av在线大香蕉| 69av精品久久久久久| 亚洲国产精品成人综合色| 中国美女看黄片| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 亚洲天堂国产精品一区在线| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 丝袜在线中文字幕| 亚洲激情在线av| 最近最新中文字幕大全免费视频| 真人一进一出gif抽搐免费| 在线观看免费午夜福利视频| 日韩有码中文字幕| 性欧美人与动物交配| 成人一区二区视频在线观看| 国产精品99久久99久久久不卡| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 波多野结衣高清作品| 狠狠狠狠99中文字幕| 一进一出抽搐动态| 99热这里只有精品一区 | 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 日本成人三级电影网站| 久久狼人影院| or卡值多少钱| 精品熟女少妇八av免费久了| 国产精品 欧美亚洲| 国产亚洲精品av在线| av免费在线观看网站| 久久久久久九九精品二区国产 | 精品人妻1区二区| АⅤ资源中文在线天堂| 亚洲精华国产精华精| 欧美一级毛片孕妇| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 亚洲精品国产区一区二| 午夜福利在线在线| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 男女床上黄色一级片免费看| 夜夜爽天天搞| 成人亚洲精品av一区二区| 国产伦一二天堂av在线观看| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 亚洲av美国av| 制服诱惑二区| 久久青草综合色| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 国产亚洲欧美精品永久| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 亚洲五月色婷婷综合| 大型黄色视频在线免费观看| 男女下面进入的视频免费午夜 | 99久久精品国产亚洲精品| 丁香六月欧美| 动漫黄色视频在线观看| 国产精品久久久久久精品电影 | 成人一区二区视频在线观看| 麻豆久久精品国产亚洲av| 久久中文看片网| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 特大巨黑吊av在线直播 | 日本免费a在线| 成人手机av| 午夜福利高清视频| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 久久久国产成人免费| 精品一区二区三区av网在线观看| 欧美精品亚洲一区二区| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 精品国产乱码久久久久久男人| 亚洲成人久久爱视频| 男女那种视频在线观看| 成年版毛片免费区| 日韩成人在线观看一区二区三区| or卡值多少钱| 美女 人体艺术 gogo| 热re99久久国产66热| 黄色 视频免费看| 日韩欧美三级三区| 国产成人精品久久二区二区91| 久久久久国产一级毛片高清牌| 国产精品亚洲美女久久久| ponron亚洲| 精品国产美女av久久久久小说| 日韩欧美三级三区| 精品久久久久久久末码| 香蕉国产在线看| 国产高清videossex| 一区二区三区激情视频| 欧美午夜高清在线| 视频在线观看一区二区三区| 黄色丝袜av网址大全| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 亚洲成人国产一区在线观看| 日韩大码丰满熟妇| 国产在线精品亚洲第一网站| 国产午夜福利久久久久久| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 给我免费播放毛片高清在线观看| 国产在线精品亚洲第一网站| 999久久久精品免费观看国产| 长腿黑丝高跟| 久99久视频精品免费| 成人欧美大片| 精品人妻1区二区| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| www国产在线视频色| 日本熟妇午夜| 香蕉av资源在线| 真人一进一出gif抽搐免费| 成人欧美大片| 国产精品影院久久| 久久中文字幕人妻熟女| 久久草成人影院| 激情在线观看视频在线高清| 男女下面进入的视频免费午夜 | e午夜精品久久久久久久| 欧美精品啪啪一区二区三区| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 久久人妻av系列| 国产精品综合久久久久久久免费| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 久久久久国产一级毛片高清牌| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 我的亚洲天堂| 18禁观看日本| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | av视频在线观看入口| 伦理电影免费视频| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 人人妻人人看人人澡| av天堂在线播放| 在线观看午夜福利视频| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 悠悠久久av| 亚洲性夜色夜夜综合| 在线播放国产精品三级| 成人av一区二区三区在线看| 国产精品日韩av在线免费观看| 国产97色在线日韩免费| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 亚洲第一青青草原| 国产成人av教育| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 看免费av毛片| 欧美又色又爽又黄视频| 18禁美女被吸乳视频| www.熟女人妻精品国产| 麻豆久久精品国产亚洲av| 国产精品av久久久久免费| 少妇的丰满在线观看| 婷婷精品国产亚洲av| 国产91精品成人一区二区三区| 后天国语完整版免费观看| 一本综合久久免费| 欧美午夜高清在线| 亚洲人成电影免费在线| 超碰成人久久| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 黄片大片在线免费观看| netflix在线观看网站| 久久亚洲精品不卡| 青草久久国产| 国产亚洲精品av在线| 国产成年人精品一区二区| 人妻久久中文字幕网| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 极品教师在线免费播放| 欧美中文综合在线视频| 国产午夜福利久久久久久| 国产黄a三级三级三级人| 性欧美人与动物交配| www日本在线高清视频| 久久99热这里只有精品18| 两性夫妻黄色片| 99久久99久久久精品蜜桃| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 亚洲精品久久国产高清桃花| 一级毛片精品| 在线观看一区二区三区| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 岛国在线观看网站| 男女床上黄色一级片免费看| 亚洲欧美激情综合另类| 国产亚洲av高清不卡| 国产精品爽爽va在线观看网站 | 国产精品乱码一区二三区的特点| 精华霜和精华液先用哪个| 禁无遮挡网站| 国产熟女xx| 亚洲av成人一区二区三| 亚洲第一av免费看| 男人的好看免费观看在线视频 | 成人三级做爰电影| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 女人被狂操c到高潮| 亚洲精品国产区一区二| av视频在线观看入口| 国产成人av激情在线播放| 久久精品人妻少妇| 日韩av在线大香蕉| 欧美色视频一区免费| 99久久综合精品五月天人人| 亚洲精品在线美女| 黄色视频,在线免费观看| 中文字幕最新亚洲高清| 欧美又色又爽又黄视频| 中国美女看黄片| 精品卡一卡二卡四卡免费| 久久亚洲精品不卡| 麻豆成人午夜福利视频| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| aaaaa片日本免费| 欧美成人午夜精品| 日韩视频一区二区在线观看| 99热这里只有精品一区 | 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 一进一出抽搐动态| 一级a爱视频在线免费观看| 91成年电影在线观看| 欧美国产日韩亚洲一区| 国产亚洲精品第一综合不卡| 日韩大码丰满熟妇| 搞女人的毛片| 国产黄a三级三级三级人| 国产成人啪精品午夜网站| 神马国产精品三级电影在线观看 | www.www免费av| 中文资源天堂在线| 国产精品,欧美在线| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 久久国产精品影院| 精品久久久久久久毛片微露脸| 天堂影院成人在线观看| 国产亚洲精品第一综合不卡| 男人的好看免费观看在线视频 | 窝窝影院91人妻| 日韩精品免费视频一区二区三区| 久久香蕉激情| 成人国产综合亚洲| 女性生殖器流出的白浆| 正在播放国产对白刺激| 亚洲真实伦在线观看| 午夜福利视频1000在线观看| 韩国av一区二区三区四区| 欧美激情 高清一区二区三区| 国产亚洲欧美98| 欧美日韩黄片免| 国产成人精品无人区| 国产激情偷乱视频一区二区| 午夜福利一区二区在线看| 在线看三级毛片| 国产午夜福利久久久久久| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 国产99久久九九免费精品| avwww免费| 国产视频内射| 不卡一级毛片| 国产精品 国内视频| 欧美日本视频| 男女床上黄色一级片免费看| 精品久久蜜臀av无| 国产爱豆传媒在线观看 | 久久中文字幕一级| 午夜免费鲁丝| 欧美黑人精品巨大| 桃色一区二区三区在线观看| 不卡一级毛片| 啪啪无遮挡十八禁网站| 欧美日本视频| 免费高清视频大片| 高清在线国产一区| 美女免费视频网站| 黄色片一级片一级黄色片| 亚洲国产高清在线一区二区三 | 99久久国产精品久久久| 日本成人三级电影网站| 性色av乱码一区二区三区2| 亚洲 欧美一区二区三区| 国产av一区二区精品久久| 性欧美人与动物交配| 老熟妇仑乱视频hdxx| 午夜免费激情av| 曰老女人黄片| 亚洲九九香蕉| 麻豆一二三区av精品| 亚洲av美国av| 国产精品 欧美亚洲| 在线视频色国产色| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 久久精品91蜜桃| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 中文字幕av电影在线播放| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 日韩有码中文字幕| 欧美不卡视频在线免费观看 | 丁香欧美五月| 麻豆成人午夜福利视频| 日韩中文字幕欧美一区二区| 欧美zozozo另类| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 听说在线观看完整版免费高清| 99国产精品99久久久久| 国产黄a三级三级三级人| 国产在线精品亚洲第一网站| 婷婷六月久久综合丁香| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 婷婷精品国产亚洲av在线| 女警被强在线播放| 亚洲一区二区三区色噜噜| 国产精华一区二区三区| 国语自产精品视频在线第100页| 69av精品久久久久久| 国产精品乱码一区二三区的特点| 51午夜福利影视在线观看| 亚洲专区字幕在线| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 亚洲久久久国产精品| 精品第一国产精品| 久久天堂一区二区三区四区| 亚洲精品国产一区二区精华液| 亚洲成人精品中文字幕电影| 午夜激情福利司机影院| 一级a爱片免费观看的视频| 久久这里只有精品19| 18禁观看日本| 在线观看日韩欧美| 国产成人欧美| 香蕉国产在线看| 国产午夜福利久久久久久| 国产成人影院久久av| 一级黄色大片毛片| 欧美黑人巨大hd| 国产精品国产高清国产av| 欧美zozozo另类| 亚洲色图av天堂| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 欧美最黄视频在线播放免费| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 中文字幕最新亚洲高清| 两个人免费观看高清视频| 日本三级黄在线观看| 久久亚洲精品不卡| 国产精品 欧美亚洲| 免费av毛片视频| 最新美女视频免费是黄的| 18禁国产床啪视频网站| 在线播放国产精品三级| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 午夜成年电影在线免费观看| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 亚洲国产中文字幕在线视频| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 老司机福利观看| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 色尼玛亚洲综合影院| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 久久伊人香网站| 91麻豆精品激情在线观看国产| 我的亚洲天堂| 亚洲中文av在线| netflix在线观看网站| 国产伦人伦偷精品视频| 婷婷亚洲欧美| 又大又爽又粗| 不卡一级毛片| 人人妻人人澡人人看| 欧美日本亚洲视频在线播放| 精品午夜福利视频在线观看一区| 亚洲成人国产一区在线观看|