探討精漿SEMG1蛋白和精漿生化對(duì)精子活力及其受精結(jié)局的影響

趙 麗，蔡昭煒，李雪玲，王志鳴

（東莞市松山湖中心醫(yī)院 生殖中心，廣東 東莞 523326）

目前影響男性不育的原因是多因素的，包括環(huán)境，營(yíng)養(yǎng)，行為和遺傳因素都會(huì)影響男性的生育能力。傳統(tǒng)上，男性不育的診斷取決于描述性評(píng)估，重點(diǎn)是精子濃度，運(yùn)動(dòng)性和形態(tài)，大部分不育男性顯示精子活力低，因此被定義為弱精子癥[1]。然而，這些臨床參數(shù)并不總是與了解男性不育的病因有關(guān)，少部分的男性不育癥患者沒(méi)有明確的原因。臨床和實(shí)驗(yàn)室證據(jù)也表明精子功能障礙并不是常見(jiàn)的精液分析能得到的結(jié)果，而這些功能障礙也可導(dǎo)致不育。精漿的許多成分作為精子活力的能源，在精子活力方面發(fā)揮著重要的作用[2]。本文對(duì)精漿中SEMG1 蛋白及精漿生化對(duì)精子活力的影響做進(jìn)一步的分析。探討精漿中這些成分對(duì)受精結(jié)局的影響。為男性不育的診斷和治療提供依據(jù)，也可為將來(lái)開(kāi)發(fā)非激素男性避孕藥提供理論依據(jù)，現(xiàn)報(bào)告如下。

資料與方法 一、一般資料 本實(shí)驗(yàn)89例標(biāo)本來(lái)自2017-2018年?yáng)|莞市第三人民醫(yī)院生殖中心檢驗(yàn)室，22～46 歲，均身體健康，無(wú)性功能障礙史、無(wú)創(chuàng)傷史、無(wú)遺傳疾病史及無(wú)睪丸及輸精管結(jié)扎術(shù)異常等。其中31例是正常男性（PR 精子≥32%），32例是輕度弱精患者（PR 為20%～32%），16例是中度弱精患者（PR 精子10%～20%），10例是重度弱精患者（PR 精子0～10%）。每個(gè)受試者和病人都簽有知情同意書(shū)。東莞市第三人民醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)了這個(gè)課題。

二、研究方法 1.精液標(biāo)本收集和精液常規(guī)參數(shù)分析：禁欲2～7d，精液樣本放于37℃水浴箱內(nèi)，待其液化。使用SCA 系統(tǒng)分析精液，將樣本進(jìn)行離心處理留取精漿，在-20 度冰箱凍存。

2.精漿SEMG1 及生化測(cè)定：采用滬震實(shí)業(yè)公司提供的SEMG1 蛋白檢測(cè)試劑盒和深圳市博銳德生物科技有限公司生產(chǎn)的試劑盒。

3.查閱本中心IVF 周期相關(guān)病人的受精結(jié)局情況，并計(jì)算正常受精率進(jìn)行比較分析，以正常受精率＜50%為低受精組，正常受精率≥50%為正常受精組。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 使用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件，所有數(shù)據(jù)均以（±s）表示，各組間平均數(shù)比較采用單因素方差分析，2 組間平均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，P＜0.05 具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果 一、精漿SEMG1 和精漿生化與精子活力的關(guān)系 精漿中SEMG1 蛋白及精漿鋅、果糖、中性α- 葡萄糖糖苷酶、彈性蛋白酶在正常男性、輕度弱精患者、中度弱精患者、重度弱精患者中表達(dá)含量有差異（F=68.623，3.258，5.593，45.151，59.520，P＜0.05），見(jiàn)表1。

二、精漿SEMG1 和精漿生化與精子活力的關(guān)系 精漿中SEMG1 蛋白及彈性蛋白酶在低受精組其表達(dá)含量高于正常受精組（t=2.361，8.430，P＜0.05）；精漿鋅、果糖、中性α- 葡萄糖糖苷酶在正常受精組比低受精組其含量要高（t＝2.965，2.739，4.186，P＜0.05），見(jiàn)表2。

討論 精子的運(yùn)動(dòng)對(duì)于受精來(lái)說(shuō)是一個(gè)重要的因素。弱精癥或精子活力低，可能是由精子結(jié)構(gòu)或功能缺陷引起的，也有可能通過(guò)精漿中的一些成分而被影響。弱精癥發(fā)生的因素多種多樣，發(fā)病機(jī)制尚未清楚。本文中實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)隨著精子活力下降，SEMG1 蛋白的表達(dá)量卻升高。本文中實(shí)驗(yàn)結(jié)果還顯示在精子活力降低時(shí)，其精漿中鋅、果糖、中性α- 葡萄糖糖苷酶及彈性蛋白酶也在發(fā)生相應(yīng)的變化，如鋅、果糖、中性α- 葡萄糖糖苷酶隨著精子活力下降，其值也在降低；彈性蛋白酶隨著精子活力降低，其酶活性升高。有學(xué)者認(rèn)為鋅可以維持精子細(xì)胞膜的穩(wěn)定性，從而維持精子活力[3]，說(shuō)明精漿鋅對(duì)于精子的活力還是很重要的。果糖濃度直接關(guān)系到精子的活動(dòng)性和受精能力，當(dāng)果糖濃度低于正常水平時(shí)，會(huì)影響精子能量的供應(yīng)和活力，導(dǎo)致不育。精子質(zhì)量下降時(shí)，尤其是精子運(yùn)動(dòng)能力下降時(shí)，可能需要考慮生殖系統(tǒng)的炎癥。而本文中彈性蛋白酶的變化情況，反映炎癥會(huì)影響精子的活力。本文中正常受精組SEMG1 蛋白表達(dá)量比低受精組要低，正常受精組精漿果糖、鋅和中性α- 葡萄糖糖苷酶含量高于低受精組；而正常受精組彈性蛋白酶含量要低于低受精組。精漿鋅、果糖和中性α- 葡萄糖糖苷酶為精子提供受精需要的能量，當(dāng)其含量低時(shí)，不足以去為精子獲能及受精提供能量，進(jìn)而影響受精結(jié)局。當(dāng)精液中表示炎癥的彈性蛋白酶含量變高時(shí)，會(huì)影響精子的獲能及受精結(jié)局。至于為什么會(huì)影響受精結(jié)局，可能跟精子的相關(guān)功能會(huì)在炎癥的情況下發(fā)生變化，進(jìn)而影響受精結(jié)局。當(dāng)精漿中一些成分影響精子活力時(shí)，可能會(huì)進(jìn)一步影響精子的受精能力。有研究顯示出在IVF 失敗的患者中的SEMG1 濃度有升高的趨勢(shì)[4]。這些檢測(cè)項(xiàng)目可以作為體外受精男性生育能力的檢測(cè)指標(biāo)。目前研究最多的表型是弱精子癥，尋找可能參與精子活力調(diào)節(jié)的相關(guān)蛋白。

表1 精漿SEMG1和精漿生化與精子活力的關(guān)系

表2 精漿SEMG1和精漿生化與受精結(jié)局的關(guān)系