鮮魚(yú)腥草UPLC特征圖譜及5種指標(biāo)成分含量測(cè)定研究

徐 杰，曾昭君，鄧?yán)罴t，魏 梅，黃夢(mèng)婷，劉燎原，程學(xué)仁

廣東一方制藥有限公司 廣東省中藥配方顆粒企業(yè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，佛山 528244

鮮魚(yú)腥草為三白草科植物蕺菜(HouttuyniacordataThunb.)的新鮮全草，性辛，味微寒，具有清熱解毒，消癰排膿，利尿通淋的功效[1]，是常見(jiàn)的“藥膳兼用型”大宗中藥材之一，具有廣闊的經(jīng)濟(jì)和藥用價(jià)值。研究表明，魚(yú)腥草主要的活性成分為揮發(fā)油、有機(jī)酸和黃酮類化合物，其中綠原酸、蘆丁、槲皮苷等是其質(zhì)量控制的重要指標(biāo)[2-4]。顯然，單一成分定量分析難以全面反映鮮魚(yú)腥草藥材的質(zhì)量。

中藥特征圖譜是中藥整體性的化學(xué)表征，在中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)方面應(yīng)用廣泛[5]。目前已有鮮魚(yú)腥草HPLC特征圖譜研究的報(bào)道[6]，但該方法檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)達(dá)70～90 min，供試品制備方法復(fù)雜、分析耗時(shí)長(zhǎng)、試劑用量大、檢測(cè)成本高，不利于全面推廣應(yīng)用。超高效液相色譜法(UPLC)是在傳統(tǒng)高效液相色譜法(HPLC)基礎(chǔ)上開(kāi)發(fā)的一種基于小顆粒填料的液相色譜技術(shù)，具分離度好、靈敏度高、分析速度快等優(yōu)點(diǎn)，在中藥特征圖譜的研究中發(fā)揮了重要的作用[7]。近年來(lái)，由于UPLC特征圖譜技術(shù)突破了單組份定量分析的局限性，能快速、全面、系統(tǒng)地對(duì)中藥材進(jìn)行多指標(biāo)定量、定性分析，因此已逐漸成為中藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)的重要手段[8-12]。本研究建立了基于UPLC同時(shí)測(cè)定鮮魚(yú)腥草藥材特征圖譜及5種指標(biāo)成分含量的方法，顯著縮短了分析時(shí)間，提高了分析效率，為鮮魚(yú)腥草藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)提供了參考。

1 儀器與材料

1.1 儀器

Waters ACQUITY 型超高效液相色譜系統(tǒng)(包括真空脫氣機(jī)、二元梯度泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、TUV檢測(cè)器、Empower數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，美國(guó)Waters公司)；Waters液質(zhì)聯(lián)用儀(液相部分ACQUITY UPLC H-Class Core System、質(zhì)譜部分Waters Xevo TQD MS，美國(guó)Waters公司)；MiliQ Direct 8型超純水機(jī)(德國(guó)默克密理博公司)；ME203E型分析天平(美國(guó)METTLER TOLEDO公司)。

1.2 材料

新綠原酸(批號(hào)：wkq18030107，純度98.0%)、隱綠原酸(批號(hào)：wkq16081903，純度98.0%)對(duì)照品均購(gòu)自四川省維克奇生物科技有限公司；綠原酸(批號(hào)：110753-201817，純度96.8%)、金絲桃苷(批號(hào)：111521-201708，純度95.1%)、槲皮苷(批號(hào)：111538-201606、純度90.6%)對(duì)照品均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院。色譜級(jí)甲醇、乙腈(德國(guó)默克股份兩合公司)；磷酸色譜純(天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司)；甲醇分析純(西隴科學(xué)股份有限公司)。

16批鮮魚(yú)腥草藥材經(jīng)廣東一方制藥有限公司魏梅主任藥師鑒定為三白草科植物蕺菜(HouttuyniacordataThunb.)的新鮮全草。藥材來(lái)源見(jiàn)表1。

表1 16批鮮魚(yú)腥草藥材來(lái)源

2 方法

2.1 指標(biāo)成分含量測(cè)定

2.1.1 對(duì)照品溶液的制備

取新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、金絲桃苷、槲皮苷對(duì)照品適量，精密稱定，加90%甲醇溶解、定容，制成質(zhì)量濃度分別為0.097 12、0.102 87、0.052 04、0.095 14、0.141 88 mg/mL混合對(duì)照品溶液，備用。

2.1.2 供試品溶液的制備

取鮮魚(yú)腥草藥材約2.0 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入90%甲醇50 mL，密塞，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用90%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，過(guò)0.22 μm微孔濾膜，取續(xù)濾液，即得。

2.1.3 色譜條件

Waters ACQUITY HSS T3(2.1 mm×100 mm，1.8 μm)色譜柱；流動(dòng)相為乙腈(A):0.1%磷酸水溶液(B)，梯度洗脫(0～7 min，5%→11% A；7～10 min，11%→11.5% A；10～13 min，11.5%→20% A；13～20 min，20%→25% A)；0～13 min檢測(cè)波長(zhǎng)為326 nm，13～20 min檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm；流速0.3 mL/min；柱溫30 ℃；進(jìn)樣量1 μL。

2.1.4 方法學(xué)考察

2.1.4.1 線性關(guān)系考察

精密吸取混合對(duì)照品溶液適量，分別加90%甲醇稀釋2、5、10、20、50倍，搖勻。分別按“2.1.3”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行分析。以峰面積為縱坐標(biāo)(Y)，質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)(X)，繪制各標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性回歸方程和線性范圍，結(jié)果見(jiàn)表2，新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、金絲桃苷、槲皮苷在各濃度范圍內(nèi)的線性關(guān)系良好。

表2 5種指標(biāo)成分的標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性范圍

圖1 混合對(duì)照品(A)、鮮魚(yú)腥草藥材樣品(B)、陰性對(duì)照(C)的UPLC色譜圖

2.1.4.2 精密度試驗(yàn)

取Y1號(hào)樣品按照“2.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.1.3”項(xiàng)下色譜條件，連續(xù)進(jìn)樣6次，計(jì)算5種化合物峰面積RSD 值，分別為0.45%、0.56%、1.38%、0.54%、0.54%，表明儀器精密度良好。

2.1.4.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取Y1號(hào)樣品按照“2.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.1.3”項(xiàng)下色譜條件，分別在制備后0、2、4、8、16、24 h進(jìn)行檢測(cè)，計(jì)算5 種化合物峰面積RSD 值，分別為1.27%、1.67%、2.62%、1.46%、1.47%，表明樣品在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.1.4.4 重復(fù)性試驗(yàn)

分別取Y1號(hào)樣品6份，按照“2.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液6份，按“2.1.3”項(xiàng)下色譜條件，分別進(jìn)樣檢測(cè)，計(jì)算5種化合物含量的RSD 值，分別為1.99%、2.99%、2.36%、2.19%、2.94%，表明重復(fù)性良好。

2.1.4.5 加樣回收率試驗(yàn)

取Y1號(hào)樣品6份，每份為1.0 g，精密稱定，置于具塞錐形瓶中，分別精密加入一定量的對(duì)照品溶液，按“2.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.1.3”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣檢測(cè)，計(jì)算5種成分的加樣回收率，平均回收率依次為97.22%、99.15%、97.43%、100.96%、97.03%，RSD分別為3.78%、3.51%、4.38%、3.24%、3.15%，表明回收率良好。

2.2 特征圖譜建立

2.2.1 對(duì)照品溶液的制備

同“2.1.1”項(xiàng)下。

2.2.2 供試品溶液的制備

同“2.1.2”項(xiàng)下。

2.2.3 色譜條件

同“2.1.3”項(xiàng)下。

2.2.4 質(zhì)譜條件

氮?dú)庾鳛橘|(zhì)譜離子源的霧化、錐孔氣；電噴霧電離正離子模式；毛細(xì)管電壓：3.0 kV；錐孔電壓：25 V；離子源溫度：100 ℃；脫溶劑氣溫度：300 ℃；脫溶劑氣流速：800 L/h；掃描時(shí)間：0.5 s；掃描時(shí)間間隔：0.02 s；掃描范圍m/z100～600。

2.2.5 方法學(xué)考察

2.2.5.1 精密度試驗(yàn)

取Y1號(hào)樣品按照“2.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.2.3”項(xiàng)下色譜條件，連續(xù)進(jìn)樣6次，以綠原酸(2號(hào)峰)作為參照峰，計(jì)算各共有峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積。各共有峰相對(duì)保留時(shí)間RSD在0.00%～0.65%范圍內(nèi)，相對(duì)峰面積RSD在0.11%～1.00%范圍內(nèi)，表明儀器精密度良好。

2.2.5.2 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取Y1號(hào)樣品按照“2.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.2.3”項(xiàng)下色譜條件，分別在制備后0、2、4、8、16、24 h進(jìn)行檢測(cè)，以綠原酸(2號(hào)峰)作為參照峰，計(jì)算各共有峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積。各共有峰相對(duì)保留時(shí)間RSD在0.05%～0.60%范圍內(nèi)，相對(duì)峰面積RSD在0.31%～1.14%范圍內(nèi)，表明穩(wěn)定性良好。

2.2.5.3 重復(fù)性試驗(yàn)

分別取Y1號(hào)樣品6份，按照“2.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液6份，按“2.2.3”項(xiàng)下色譜條件，分別進(jìn)樣檢測(cè)，以綠原酸(2號(hào)峰)作為參照峰，計(jì)算各共有峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積。各共有峰相對(duì)保留時(shí)間RSD在0.05%～0.12%范圍內(nèi)，相對(duì)峰面積RSD在0.94%～2.58%范圍內(nèi)，表明重復(fù)性良好。

3 結(jié)果與分析

3.1 樣品含量測(cè)定

取16批鮮魚(yú)腥草藥材，按“2.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.1.3”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣檢測(cè)，測(cè)定各批鮮魚(yú)腥草藥材新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、金絲桃苷、槲皮苷的含量。結(jié)果表明不同批次的鮮魚(yú)腥草藥材中5種化合物的含量均有不同程度的差異。

表3 16批鮮魚(yú)腥草藥材中5種指標(biāo)成分的含量

續(xù)表3(Continued Tab.3)

編號(hào)No.含量Content(mg/g)新綠原酸Neochlorogenicacid綠原酸Chlorogenicacid隱綠原酸Cryptochlorogenicacid金絲桃苷Hyperoside槲皮苷QuercetinY80.3590.1090.0240.1570.607Y90.5350.1630.0250.1720.869Y100.4070.1110.0410.1700.745Y110.5990.1910.0380.4201.210Y120.2460.1270.0640.2550.311Y130.3880.1280.0480.3200.644Y140.3510.1180.0510.2290.540Y150.2670.0650.0250.2920.556Y160.4310.5340.3380.5220.615

3.2 特征圖譜的建立及共有峰的鑒定

取16批鮮魚(yú)腥草藥材，按照“2.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.2.3”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣檢測(cè)，采用“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)2012 版”軟件對(duì)16批鮮魚(yú)腥草藥材UPLC特征圖譜進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，建立鮮魚(yú)腥草藥材的對(duì)照特征圖譜(如圖2所示)，確定共有峰7個(gè)，其中采用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(UPLC-MS)以及與對(duì)照品對(duì)照指認(rèn)了1、2、3、5、7號(hào)峰分別為新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、金絲桃苷、槲皮苷。以綠原酸(2號(hào)峰)作為峰1、峰3的參照峰S1，金絲桃苷(5號(hào)峰)作為峰4、峰6、峰7的參照峰S2，分別計(jì)算各共有峰的保留時(shí)間和相對(duì)峰面積，結(jié)果見(jiàn)表5和6。

表4 基于UPLC-MS的鮮魚(yú)腥草特征圖譜共有峰的歸屬

圖2 16批鮮魚(yú)腥草疊加UPLC特征圖譜

圖3 鮮魚(yú)腥草藥材UPLC特征圖譜

共有峰相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積的結(jié)果顯示，各色譜峰相對(duì)保留時(shí)間的RSD值范圍為0.00%～0.76%，說(shuō)明7個(gè)共有峰在不同鮮魚(yú)腥草樣品間的重現(xiàn)性較好，建立的UPLC特征圖譜方法較為穩(wěn)定可行；各色譜峰的相對(duì)峰面積的RSD值范圍為17.82%～66.73%，波動(dòng)范圍較大，說(shuō)明不同產(chǎn)地鮮魚(yú)腥草中各成分含量存在差異。

表5 鮮魚(yú)腥草藥材共有峰相對(duì)保留時(shí)間

表6 鮮魚(yú)腥草藥材共有峰相對(duì)峰面積

3.3 鮮魚(yú)腥草特征圖譜的效果評(píng)價(jià)

3.3.1 相似度評(píng)價(jià)

采用“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)2012 版”軟件計(jì)算16批鮮魚(yú)腥草藥材之間以及相對(duì)于對(duì)照特征圖譜(R)的相似度。結(jié)果顯示，16批鮮魚(yú)腥草樣品間的相似度介于0.798～0.999之間；除Y16樣品外，其余批次鮮魚(yú)腥草藥材樣品相對(duì)于對(duì)照特征圖譜的相似度均>0.900，說(shuō)明鮮魚(yú)腥草藥材樣品與對(duì)照特征圖譜間的相似度較好。

表7 鮮魚(yú)腥草特征圖譜相似度評(píng)價(jià)

續(xù)表7(Continued Tab.7)

編號(hào)No.Y1Y2Y3Y4Y5Y6Y7Y8Y9Y10Y11Y12Y13Y14Y15Y16RY110.9950.8470.9140.9770.9940.9690.9920.9950.9880.9951.0000.9420.9930.9910.9900.8490.991Y120.9350.8970.9890.9430.9350.9380.9500.9330.9200.9190.9421.0000.9740.9730.9560.9480.966Y130.9850.8810.9530.9790.9860.9720.9910.9870.9780.9820.9930.9741.0000.9980.9920.8850.995Y140.9800.8990.9550.9880.9900.9830.9950.9910.9840.9850.9910.9730.9981.0000.9840.8940.999Y150.9900.8220.9270.9510.9720.9420.9740.9740.9600.9730.9900.9560.9920.9841.0000.8530.977Y160.8540.8270.9420.8660.8510.8550.8610.8440.8320.8280.8490.9480.8850.8940.8531.0000.890R0.9780.9060.9490.9940.9940.9890.9980.9940.9900.9880.9910.9660.9950.9990.9770.8901.000

3.3.2 聚類分析

將16批鮮魚(yú)腥草藥材特征圖譜中的7個(gè)共有峰的峰面積相對(duì)于稱樣量進(jìn)行量化(峰面積/稱樣量)，形成7×16階數(shù)據(jù)矩陣，導(dǎo)入SPSS 20.0軟件，以離均差平方和法(Ward’s method)為聚類方法、歐氏距離平方法(squared Euclidean distance)為測(cè)量距離方法，進(jìn)行聚類分析。聚類結(jié)果如圖4所示。

16批鮮魚(yú)腥草大致可聚為3類。廣東(Y1和Y2)、湖北(Y3)、四川彭州(Y4)、什邡(Y6、Y8、Y9)、宜賓(Y12、Y13、Y14、Y15)等地的鮮魚(yú)腥草基本可聚為一類；四川廣漢(Y5和Y7)、綿陽(yáng)(Y10、Y11)的鮮魚(yú)腥草可聚為一類；浙江金華(Y16)的鮮魚(yú)腥草單獨(dú)聚為一類。結(jié)果表明，同一產(chǎn)地不同居群的鮮魚(yú)腥草藥材質(zhì)量較為一致，不同產(chǎn)地鮮魚(yú)腥草藥材質(zhì)量存在一定差異。

圖4 鮮魚(yú)腥草藥材特征圖譜聚類分析

3.3.3 主成分分析

利用SPSS 20.0軟件對(duì)量化后的共有峰峰面積(峰面積/稱樣量)進(jìn)行數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化處理，標(biāo)準(zhǔn)化后數(shù)據(jù)見(jiàn)表8。對(duì)16批鮮魚(yú)腥草藥材的7個(gè)共有峰進(jìn)行主成分分析，計(jì)算相關(guān)矩陣的方差和特征值，結(jié)果見(jiàn)表9、表10。前3個(gè)因子累計(jì)方差貢獻(xiàn)率達(dá)到95.797%，特征根大于1，可以代表鮮魚(yú)腥草藥材特征圖譜中7個(gè)共有峰的大部分信息。

對(duì)主成分載荷值進(jìn)行計(jì)算，得出各主成分的線型模型，各主成分解析表達(dá)式分別為F1=0.131ZX1+0.189ZX2+0.112ZX3+0.214ZX4+0.233ZX5+0.256ZX6+0.209ZX7；F2=-0.210ZX1+0.302ZX2+0.498ZX3-0.160ZX4+0.185ZX5-0.111ZX6-0.314ZX7；F3=0.605ZX1+0.368ZX2+0.081ZX3-0.391ZX4-0.311ZX5-0.119ZX6+0.137ZX7；主成分綜合得分函數(shù)F=(51.909%×F1+25.809%×F2+18.079%×F3)/95.797%，各批次綜合得分結(jié)果見(jiàn)表11。

表8 數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化

表9 主成分特征值及方差

表10 主成分載荷及得分系數(shù)矩陣

續(xù)表10(Continued Tab.10)

共有峰Commonpeak載荷Loadmatrix得分系數(shù)Scoringcoefficient主成分1Principalcomponent1主成分2Principalcomponent2主成分3Principalcomponent3主成分1Principalcomponent1主成分2Principalcomponent2主成分3Principalcomponent3峰6Peak60.932-0.200-0.1510.256-0.111-0.119槲皮苷Quercetin0.761-0.5670.1730.209-0.3140.137

圖5 16批鮮魚(yú)腥草主成分得分散點(diǎn)圖

主成分得分結(jié)果顯示，根據(jù)主成分分析基本可將不同產(chǎn)地種植的鮮魚(yú)腥草分為3大類。浙江金華的鮮魚(yú)腥草(Y16)單獨(dú)分為一類；廣東(Y1和Y2)、湖北(Y3)、四川彭州(Y4)、什邡(Y6、Y8、Y9)、宜賓(Y12、Y15、Y14、Y15)的鮮魚(yú)腥分為一類；四川廣漢(Y5和Y7)、綿陽(yáng)(Y10和Y11)的鮮魚(yú)腥草分為一類。由此可見(jiàn)，相同產(chǎn)地不同居群的鮮魚(yú)腥草均聚在同一類，16批鮮魚(yú)腥草主成分分析與聚類分析描述的結(jié)果基本一致。

利用主成分綜合得分函數(shù)計(jì)算16批鮮魚(yú)腥草的綜合得分，結(jié)果顯示浙江金華種植鮮魚(yú)腥草綜合得分遠(yuǎn)高于其他產(chǎn)地，其次是四川彭州、廣漢、綿陽(yáng)等地，廣東、湖北、四川宜賓的鮮魚(yú)腥草綜合得分較低，說(shuō)明不同產(chǎn)地鮮魚(yú)腥草的質(zhì)量存在較大的差異。

4 討論

本研究建立了鮮魚(yú)腥草藥材質(zhì)量綜合評(píng)價(jià)的方法，在同一色譜條件下，在20 min內(nèi)同時(shí)完成了鮮魚(yú)腥草5種指標(biāo)成分含量及特征圖譜的測(cè)定，極大的縮短了檢測(cè)時(shí)間，降低了分析成本，對(duì)于樣品的高通量分析具有顯著優(yōu)勢(shì)，便于推廣使用。

本研究分別考察了提取溶劑(50%甲醇、90%甲醇、甲醇、70%乙醇、乙醇)、提取方式(加熱回流提取、超聲提取)及提取時(shí)間(15、30、45、60 min)，對(duì)鮮魚(yú)腥草藥材中5種指標(biāo)成分提取效率以及特征圖譜的影響，結(jié)果表明，加入90%甲醇回流提取30 min，提取效率高、效果好。

本研究分別考察了乙腈-0.1%磷酸水溶液、乙腈-0.1%甲酸水溶液、乙腈-0.2%醋酸水溶液3個(gè)不同的流動(dòng)相系統(tǒng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)采用乙腈-0.1%磷酸水溶液為流動(dòng)相，各色譜峰分離效果最好。利用PDA檢測(cè)器對(duì)供試品溶液進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，并結(jié)合已有的文獻(xiàn)研究[6,13,14]，分別在254、326、280 nm以及程序波長(zhǎng)(0～13 min為326 nm，13～25 min為254 nm)下采集供試品溶液的色譜圖，對(duì)采集的色譜圖進(jìn)行比較。結(jié)果表明，采用程序波長(zhǎng)檢測(cè)方式，色譜峰峰型好，且主要色譜峰吸收強(qiáng)度高，因此選擇程序波長(zhǎng)檢測(cè)方式。

表11 16批鮮魚(yú)腥草藥材綜合得分情況

目前，特征圖譜相似度評(píng)價(jià)法、歐氏距離聚類分析法和主成分分析法等化學(xué)模式識(shí)別方法在中藥材質(zhì)量、產(chǎn)地差異以及品種鑒別等研究領(lǐng)域的應(yīng)用已較為廣泛[15-17]。本研究引入特征圖譜相似度分析、聚類分析以及主成分分析，可以直觀衡量不同產(chǎn)地鮮魚(yú)腥草樣品間特征圖譜變化模式的相似性及親疏程度。魚(yú)腥草廣泛分布在我國(guó)南方諸省，市場(chǎng)上以四川、重慶、湖北等地的魚(yú)腥草較為常見(jiàn)，多成分含量測(cè)定及特征圖譜結(jié)果均顯示不同產(chǎn)地的鮮魚(yú)腥草藥材存在一定差異，引入主成分綜合得分函數(shù)，可直觀且客觀地判斷各產(chǎn)地鮮魚(yú)腥草藥材的整體質(zhì)量。本研究通過(guò)對(duì)特征圖譜數(shù)據(jù)進(jìn)行聚類分析和主成分分析，可將16批鮮魚(yú)腥草分為3類，主成分綜合得分結(jié)果表明浙江金華種植的鮮魚(yú)腥草質(zhì)量最優(yōu)。因此，利用本研究開(kāi)發(fā)的鮮魚(yú)腥草UPLC特征圖譜及多指標(biāo)成分測(cè)定的方法，結(jié)合綜合質(zhì)量評(píng)價(jià)函數(shù)，可以更全面、直觀地評(píng)估各產(chǎn)地鮮魚(yú)腥草的質(zhì)量，規(guī)范鮮魚(yú)腥草藥材的質(zhì)量控制。

本研究旨在建立鮮魚(yú)腥草UPLC特征圖譜及5種指標(biāo)成分含量測(cè)定的方法，同時(shí)結(jié)合相關(guān)化學(xué)識(shí)別模式構(gòu)建鮮魚(yú)腥草藥材質(zhì)量綜合評(píng)價(jià)函數(shù)，為鮮魚(yú)腥草質(zhì)量評(píng)價(jià)和控制提供參考。由于魚(yú)腥草新鮮樣品采集和存儲(chǔ)存在一定的困難，本研究收集的鮮魚(yú)腥草樣品未能覆蓋全國(guó)各地，因此關(guān)于各產(chǎn)區(qū)鮮魚(yú)腥草藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)的結(jié)果是否具有更廣泛的代表性，還有待于后續(xù)進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量系統(tǒng)深入的研究。