慢性乙型肝炎患者乙肝兩對(duì)半及乙肝病毒DNA定量檢測(cè)的臨床意義

彭蘡 陳珊 徐燕 康厚純

【摘 要】 目的：探討乙肝兩對(duì)半聯(lián)合乙肝病毒DNA定量檢測(cè)診斷慢性乙型肝炎的臨床價(jià)值。方法：以2017年12月至2019年6月本院收治的133例慢性乙型肝炎患者為研究對(duì)象，全部患者均接受乙肝兩對(duì)半和乙肝病毒DNA定量檢測(cè)，回顧性分析檢驗(yàn)結(jié)果。結(jié)果：乙肝兩對(duì)半檢測(cè)示HBsAg陽(yáng)性124例（93.23%），HBsAb陽(yáng)性11例（8.27%），HBeAg陽(yáng)性42例（31.58%），HBeAb陽(yáng)性89例（66.92%），HBcAb陽(yáng)性132例（99.25%），乙肝DNA定量陽(yáng)性19例（14.29%）。經(jīng)統(tǒng)計(jì)，大三陽(yáng)33例（24.81%），小三陽(yáng)72例（54.14%），其余28例（21.05%）。結(jié)論：乙肝兩對(duì)半聯(lián)合乙肝病毒DNA定量檢測(cè)可以有效診斷慢性乙型肝炎，判斷乙肝病毒感染現(xiàn)狀與轉(zhuǎn)歸情況，對(duì)本病臨床治療及防控具有重要指導(dǎo)價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】 慢性乙型肝炎;乙肝病毒;乙肝兩對(duì)半檢測(cè);DNA定量檢測(cè)

文章編號(hào)：WHR201908082

慢性乙型肝炎是由乙肝病毒感染所引起的慢性肝臟炎癥性疾病，可通過(guò)密切生活接觸、母嬰、輸血、醫(yī)源性傳染等途徑傳播，屬我國(guó)法定乙類傳染病[1]。本病呈世界性分布，我國(guó)是高度流行地區(qū)，數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)顯示，全球約3.5億乙型肝炎表面抗原攜帶者，近30%分布于我國(guó)，其中慢性乙型肝炎患者約2000萬(wàn)例[2]。本病病程長(zhǎng)，臨床治愈困難，可進(jìn)展為肝硬化甚至誘發(fā)肝細(xì)胞癌，嚴(yán)重影響患者的健康與生存質(zhì)量[3]，因此早期診斷及干預(yù)治療十分必要，是改善預(yù)后、控制傳染的關(guān)鍵。乙肝兩對(duì)半與乙肝病毒DNA定量檢測(cè)是臨床診斷慢性乙型肝炎、評(píng)估病毒傳染性與疾病轉(zhuǎn)歸的常用方法，筆者現(xiàn)對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

以2017年12月至2019年6月為時(shí)限，擇取本院收治的133例慢性乙肝患者。全部患者均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)制定的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，接受乙肝兩對(duì)半和乙肝病毒DNA定量檢測(cè)，資料及數(shù)據(jù)齊全，對(duì)本研究知情同意。病例排除急性乙肝、合并其他類型病毒性肝炎及傳染病者。入選病例中，男92例，女41例，年齡最小21歲，最大71歲，平均49.7歲。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集及處理 使用真空采血管抽取患者靜脈血4mL，溫室靜置30min，以3000rpm速率離心5min，取上清液備用。

1.2.2 乙肝兩對(duì)半檢測(cè) 乙肝兩對(duì)半檢測(cè)采用羅氏E601全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫自動(dòng)分析儀及其配套試劑，質(zhì)控品購(gòu)自廣州邦德盛公司。指標(biāo)及正常參考值：1）乙肝表面抗原（HBsAg），參考值<1U/mL;2）乙肝表面抗體（HBsAb），參考值<10U/mL;3）乙肝e抗原（HBeAg），參考值<1U/mL;4）乙肝e抗體（HBeAb），參考值>1U/mL;5）乙肝核心抗體（HBcAb）參考值>1U/mL。本研究以指標(biāo)值超過(guò)正常參考值上限或下限為陽(yáng)性。

1.2.3 乙肝病毒DNA定量檢測(cè) 試劑與儀器：采用中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司的乙型肝炎病毒核酸定量檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ┘懊绹?guó)ABI 7500型定量PCR儀。

試劑配制：從試劑盒中取出各管試劑，室溫融化，2000rpm離心10s，設(shè)所需要的管數(shù)為n（n=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管強(qiáng)陽(yáng)性對(duì)照+1管臨界陽(yáng)性對(duì)照+4管定量標(biāo)準(zhǔn)品），每份樣本的測(cè)試反應(yīng)體系配制為PCR反應(yīng)液27μL，Taq酶3μL。

樣本處理及上樣：取1.5mL離心管，依次加入4μL內(nèi)標(biāo)IC、450μL DNA提取液、樣本上清液200μL，振蕩器劇烈震蕩混勻15s，瞬時(shí)離心。將離心管置于干式恒溫儀中，100℃下熱浴10min，12000rpm下離心5min。在n個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入處理過(guò)的樣本上清液，定量標(biāo)準(zhǔn)品，陰性、強(qiáng)陽(yáng)性及臨界陽(yáng)性對(duì)照各20μL。

設(shè)置PCR擴(kuò)增循環(huán)條件，93℃：2min;93℃：45s，55℃：1min，10個(gè)循環(huán);93℃：30s，55℃：45s，30個(gè)循環(huán);40℃：20s。選擇FAM通道和VIC通道;在55℃時(shí)電腦自動(dòng)采集熒光信號(hào)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，得出定量結(jié)果。以DNA定量檢測(cè)無(wú)數(shù)值或<1.0E+02（1.0×102IU/mL）為陰性，反之為陽(yáng)性，且指標(biāo)值越大表示病毒復(fù)制越活躍、傳染性越強(qiáng)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

以Excel 2016進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示。

2 結(jié)果

乙肝兩對(duì)半與乙肝病毒DNA定量檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。經(jīng)統(tǒng)計(jì)，HBsAg、HBeAb、HBcAb陽(yáng)性72例（54.14%），HBsAg、HBeAg、HBcAb陽(yáng)性33例（24.81%），HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb陽(yáng)性7例（5.26%），HBsAg、HBcAb陽(yáng)性7例（5.26%）;HBsAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb陽(yáng)性3例（2.26%），HBsAb、HBcAb陽(yáng)性3例（2.26%），HBeAb、HBcAb陽(yáng)性3例（2.26%），HBsAg、HBeAg陽(yáng)性1例（0.75%），HBsAg、HBsAb、HBcAb陽(yáng)性1例（0.75%），HBsAb、HBeAb、HBcAb陽(yáng)性1例（0.75%），HBcAb陽(yáng)性1例（0.75%），五項(xiàng)全陽(yáng)性1例（0.75%）。

3 討論

乙肝兩對(duì)半也稱乙肝五項(xiàng)，是臨床診斷慢性乙型肝炎的重要血清學(xué)標(biāo)志與實(shí)驗(yàn)室依據(jù)，五項(xiàng)指標(biāo)不同陽(yáng)性組合亦能用于判斷乙肝病毒感染現(xiàn)狀和疾病轉(zhuǎn)歸情況，對(duì)傳染防控具有重要參考價(jià)值[4]。本研究對(duì)133例慢性乙型肝炎患者行兩對(duì)半檢測(cè)，結(jié)果示HBsAg、HBeAg、HBcAb陽(yáng)性33例，為乙肝大三陽(yáng);HBsAg、HBeAb、HBcAb陽(yáng)性72例，為乙肝小三陽(yáng);兩者均證實(shí)為慢性乙肝，但前者傳染性強(qiáng)，后者傳染性弱，臨床診治本病應(yīng)注重加強(qiáng)對(duì)大三陽(yáng)患者病毒傳染的防控。另檢出HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb陽(yáng)性7例，提示急性乙肝感染趨向恢復(fù)或慢性攜帶;HBsAg、HBcAb陽(yáng)性7例，提示慢性HBsAg攜帶，此類患者乙肝癥狀體征均逐漸消失或已經(jīng)消失，肝功能正常，但明確乙肝病毒感染，也是主要傳染源。此外，HBsAb、HBcAb陽(yáng)性3例，提示既往感染過(guò)乙肝，現(xiàn)仍有免疫力，屬于不典型恢復(fù)期，患者體內(nèi)已形成乙肝抗體，對(duì)病毒免疫，亦無(wú)傳染性。HBeAb、HBcAb陽(yáng)性3例，提示既往有乙肝感染，屬于急性感染恢復(fù)期，有少數(shù)人仍有傳染性，仍需引起重視，加強(qiáng)傳染防控。由此可見(jiàn)，不同五項(xiàng)指標(biāo)陽(yáng)性結(jié)合者所處乙肝病程階段不同，病毒傳染性強(qiáng)弱有所差異，能夠?yàn)榛颊邆€(gè)體化疾病治療及傳染防控提供有價(jià)值的依據(jù)和指導(dǎo)。此外，聯(lián)合定量檢測(cè)乙肝病毒DNA，能夠有效反映病毒復(fù)制情況，評(píng)估乙肝病毒的活躍性與傳染性，對(duì)于檢測(cè)呈陽(yáng)性的患者，應(yīng)根據(jù)指標(biāo)結(jié)果制定個(gè)體化保護(hù)隔離方案，以預(yù)防病毒傳染擴(kuò)散，更好地保障人群的安全[5]。

綜上所述，乙肝兩對(duì)半聯(lián)合乙肝病毒DNA定量檢測(cè)可以有效診斷慢性乙型肝炎、判斷乙肝病毒的傳染性與轉(zhuǎn)歸情況，對(duì)本病臨床治療及防控具有重要指導(dǎo)價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

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[2] 羅曉慧.慢性乙型肝炎病人血清“兩對(duì)半”檢驗(yàn)結(jié)果模式與肝炎相關(guān)自身抗體的相關(guān)性研究[J].系統(tǒng)醫(yī)學(xué)，2016，01（10）：20-22.

[3] 張國(guó)順，孟冬梅，劉斌，等.乙型肝炎病毒標(biāo)志物及DNA定量檢測(cè)在慢性乙型肝炎病毒感染中的臨床意義[J].中國(guó)老年學(xué)雜志，2018，38（18）：4592-4595.

[4] 譚麗.研究慢性乙型肝炎患者血清“兩對(duì)半”檢驗(yàn)結(jié)果模式與肝炎相關(guān)自身抗體的相關(guān)性[J].吉林醫(yī)學(xué)，2017，38（05）：892-893.

[5] 花艷艷，許琳婧，李夢(mèng)華.慢性乙型肝炎患者血清HBsAg定量和HBV-DNA檢測(cè)在HBV基因型與耐藥變異中的臨床探討[J].中國(guó)醫(yī)藥指南，2018，16（32）：121-122.