口服復(fù)方甘草酸苷片聯(lián)合靜脈注射川芎嗪對酒精性肝病病人T淋巴細(xì)胞的影響

張建集，白格蘭，邊緩緩，劉振中，吳月紅，任飛

作者單位：1石家莊市第五醫(yī)院急診科，河北，石家莊050021；

2河北省兒童醫(yī)院重癥監(jiān)護(hù)室，河北，石家莊050021

酒精性肝病是因長時間大量飲酒而誘發(fā)的一種肝臟疾病。有研究表明，在重度飲酒者中，約80%左右患有不同程度的脂肪肝，其中約10%～35%將進(jìn)一步發(fā)展為酒精性肝病，還有部分病人很有可能進(jìn)展為肝硬化[1-3]。此外，酗酒可導(dǎo)致廣泛肝細(xì)胞壞死，嚴(yán)重時還可能導(dǎo)致肝功能衰竭，危及生命安全[4]?，F(xiàn)階段，臨床除協(xié)助病人戒酒以及對癥治療外，尚無特效治療方案。酒精性肝病其發(fā)病主要與乙醇、乙醛、還原型輔酶A以及自由基有密切關(guān)系，被乙醇損害的肝細(xì)胞可釋放永久性刺激物—Mallory小體，而Mallory是指肝細(xì)胞玻璃樣變時，胞質(zhì)中細(xì)胞中間絲前角蛋白變性，是完全抗原，可在肝內(nèi)形成免疫復(fù)合物，引起機(jī)體的免疫反應(yīng)從而導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)肝壞死和纖維化。T淋巴細(xì)胞亞群的測定是檢測機(jī)體細(xì)胞免疫功能的重要指標(biāo)，基于此，本研究進(jìn)一步探討復(fù)方甘草酸苷片對酒精性肝病病人T淋巴細(xì)胞亞群與細(xì)胞因子的影響，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2016年9月至2018年9月在石家莊市第五醫(yī)院治療的酒精性肝病病人116例，按照隨機(jī)數(shù)字表法分為兩組，各58例。本研究符合《世界醫(yī)學(xué)協(xié)會赫爾辛基宣言》相關(guān)要求，病人及其近親屬均自愿簽署知情同意書。兩組一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可對比性。見表1。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn) ①符合《酒精性肝病診療指南（2010年1月修訂）》[5]內(nèi)相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)者；②存在乏力、肝區(qū)不適等癥狀者；③經(jīng)肝臟B超、CT等檢查確診者；④每日酒精攝入量≥80 g者；⑤對本研究使用的復(fù)方甘草酸苷片等藥物無過敏史者。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn) ①自身免疫性肝炎、藥物性肝炎、病毒性肝炎、中毒性肝損傷、肝癌者；②凝血功能障礙者；③合并代謝性疾病、內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病者；④嚴(yán)重器質(zhì)性病變者；⑤表達(dá)障礙或精神疾病者；⑥慢性心衰者。

1.3 方法 對照組：將120 mg川芎嗪（貴州拜特制藥有限公司，生產(chǎn)批號20181005）加入至250 mL葡萄糖注射液中，靜脈滴注，1次/日。觀察組：川芎嗪滴注方式、劑量與對照組相同，并且飯后口服復(fù)方甘草酸苷片（北京凱因科技股份有限公司，生產(chǎn)批號180408），每次50 mg，3次/日。兩組均需接受為期28 d的連續(xù)治療，用藥劑量可依據(jù)病人年齡、癥狀等酌情加減。

1.4 評價指標(biāo) 治療前與治療28 d后，經(jīng)索尼SP6800型流式細(xì)胞分析儀測定成熟T淋巴細(xì)胞（CD3+）、誘導(dǎo)性T細(xì)胞/輔助性T細(xì)胞（CD4+）、抑制性T細(xì)胞/細(xì)胞毒性T細(xì)胞（CD8+）；經(jīng)北京華夏遠(yuǎn)洋科技有限公司提供的對應(yīng)試劑盒測定層粘連蛋白（LN）與透明質(zhì)酸（HA），上海廣銳生物科技有限公司提供的試劑盒測定Ⅳ型膠原（CL-Ⅳ）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β1）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、瘦素（LP）；雷杜Chemray240型全自動生化分析儀與對應(yīng)試劑盒測定天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、γ-谷氨?；D(zhuǎn)移酶（GGT）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 18.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，以表示計(jì)量資料，組間用非獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，組內(nèi)用配對樣本t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 酒精性肝病116例一般資料比較/

表1 酒精性肝病116例一般資料比較/

組別對照組觀察組t（χ2）值P值例數(shù)58 58性別/例男52 50（0.325）0.569女6 8年齡/（歲，images/BZ_32_1661_866_1724_899.png）49.13±3.46 48.92±3.38 0.331 0.742飲酒年限/（年，images/BZ_32_1661_866_1724_899.png）18.61±2.23 18.43±2.10 0.448 0.655平均酒精攝入/（g/d，images/BZ_32_1661_866_1724_899.png）191.62±51.32 183.41±50.92 0.865 0.389疾病類型/例酒精性肝硬化9 10（0.180）0.914酒精性肝炎19 17酒精性脂肪肝30 31

2 結(jié)果

表2 酒精性肝病116例治療前后兩組T淋巴細(xì)胞亞群對比/（%，）

表2 酒精性肝病116例治療前后兩組T淋巴細(xì)胞亞群對比/（%，）

注：CD3+為成熟T淋巴細(xì)胞，CD4+為誘導(dǎo)性T細(xì)胞/輔助性T細(xì)胞，CD8+為抑制性T細(xì)胞/細(xì)胞毒性T細(xì)胞

images/BZ_190_238_1008_1192_1067.png0.162，0.872 2.482，0.015對照組治療前治療后t值P值觀察組治療前治療后t值P值兩組比較 t，P值治療前治療后58 55.63±8.72 59.37±9.68 5.916 0.000 32.31±7.63 35.75±6.12 5.470 0.000 33.95±4.76 31.35±6.17 5.387 0.000 58 55.39±8.31 63.71±9.92 9.005 0.000 31.79±7.25 38.99±8.26 8.739 0.000 34.12±6.78 28.63±5.62 9.928 0.000 0.153，0.879 2.384，0.019 0.378，0.706 2.399，0.018

2.2 肝纖維化指標(biāo) 治療前，兩組LN、HA與CL-Ⅳ水平對比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療28 d后，觀察組LN、HA與CL-Ⅳ水平均低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

表3 酒精性肝病116例治療前后兩組病人肝纖維化指標(biāo)對比/（μg/L，）

表3 酒精性肝病116例治療前后兩組病人肝纖維化指標(biāo)對比/（μg/L，）

注：LN為層粘連蛋白，HA為透明質(zhì)酸，CL-Ⅳ為Ⅳ型膠原

images/BZ_190_238_2391_1192_2450.png對照組治療前治療后t值P值觀察組治療前治療后t值P值兩組比較 t，P值治療前治療后58 140.85±29.17 79.45±19.82 13.392 0.000 173.52±24.67 82.61±17.83 22.276 0.000 149.88±30.29 105.13±25.34 12.096 0.000 58 138.68±28.65 52.44±13.65 22.094 0.000 178.09±25.13 39.75±10.69 39.214 0.000 151.86±30.21 69.88±14.55 18.892 0.000 0.352，0.725 9.188，0.000 0.403，0.688 8.550，0.000 0.989，0.325 15.701，0.000

2.3 細(xì)胞因子 治療前，兩組TNF-α、TGF-β1、IL-6與LP水平對比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療28 d后，觀察組TNF-α、TGF-β1、IL-6與LP水平均低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表4。

表4 酒精性肝病116例治療前后兩組細(xì)胞因子水平對比/（）

表4 酒精性肝病116例治療前后兩組細(xì)胞因子水平對比/（）

注：TNF-α為腫瘤壞死因子-α，TGF-β1為轉(zhuǎn)化生長因子-β，IL-6為白細(xì)胞介素-6，LP為瘦素

0.306，0.760 7.056，0.000組別對照組治療前治療后t值P值觀察組治療前治療后t值P值兩組比較 t，P值治療前TNF-α/（pg/L）TGF-β1/（mg/L）IL-6/（pg/L）LP/（μg/L）例數(shù) 5 8 379.81±102.35 287.51±72.36 9.000 0.000 358.73±83.09 153.82±36.85 17.761 0.000 179.83±35.92 83.09±12.37 18.607 0.000 15.18±4.22 6.82±2.11 13.612 0.000 58 388.62±92.83 235.95±67.28 11.783 0.000 367.89±80.25 94.35±20.76 25.721 0.000 182.67±38.15 54.99±12.08 23.711 0.000 14.96±3.52 4.38±1.59 21.318 0.000治療后0.486，0.628 3.974，0.000 0.604，0.547 10.707，0.000 0.412，0.681 12.375，0.000

2.4 肝功能指標(biāo) 治療前，兩組AST、GGT與ALT水平對比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療28 d后，觀察組AST、GGT與ALT水平均低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表5。

表5 酒精性肝病病人116例治療前后兩組肝功能指標(biāo)對比/（U/L，）

表5 酒精性肝病病人116例治療前后兩組肝功能指標(biāo)對比/（U/L，）

注：AST為天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶，γ-GGT為γ-谷氨?；D(zhuǎn)移酶，ALT為丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶

images/BZ_190_1286_2280_2240_2343.png0.835，0.406 15.487，0.000對照組治療前治療后t值P值觀察組治療前治療后t值P值兩組比較 t，P值治療前治療后58 287.65±35.87 83.39±23.15 34.372 0.000 237.65±40.83 81.33±19.16 28.381 0.000 276.19±25.73 79.18±16.29 53.475 0.000 58 285.39±38.62 40.96±12.08 49.521 0.000 240.19±41.08 36.28±14.53 35.919 0.000 272.28±24.67 39.24±10.97 64.284 0.000 0.326，0.745 12.374，0.000 0.334，0.739 14.267，0.000

3 討論

酒精性肝病為嚴(yán)重威脅人類肝功能水平的疾病之一，其病理改變包括酒精性肝炎、肝纖維化以及肝硬化[6-7]。目前，臨床對酒精性肝病的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，可能與性別、種族差異、遺傳多態(tài)性、免疫因素等多種因素存在密切關(guān)聯(lián)，為多種因素共同作用的結(jié)果[8-9]?，F(xiàn)階段，臨床治療酒精性肝病的方法包括改善營養(yǎng)、促進(jìn)肝細(xì)胞增生、戒酒、逆轉(zhuǎn)肝纖維化等，但治療效果并不理想[10-11]。

川芎嗪是由川芎中提取出的一種生物堿性單體，且該藥品具有抗脂質(zhì)過氧化損傷、保護(hù)肝細(xì)胞、抑制肝纖維化以及控制儲脂細(xì)胞的效果，酒精性肝病病人肝纖維化的形成為其慢性化的重要環(huán)節(jié)，分析其實(shí)質(zhì)可能與細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)等因素不斷激活肝星狀細(xì)胞，致使細(xì)胞外基質(zhì)出現(xiàn)異常沉淀現(xiàn)象有關(guān)[12-13]。TGF-β1可有效促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)沉淀以及合成，且可抑制其降解，易誘導(dǎo)纖維化形成；LP的增高同樣為致使肝纖維化的重要使動因子。本研究結(jié)果顯示，TNF-α、TGF-β1、IL-6與LP水平均低于對照組，提示酒精性肝病病人在川芎嗪治療基礎(chǔ)上，采用復(fù)方甘草酸苷片治療，具有控制細(xì)胞因子水平的積極作用。T細(xì)胞亞群處于穩(wěn)定狀態(tài)為維持人體細(xì)胞免疫功能的關(guān)鍵所在，故T淋巴細(xì)胞亞群的檢測在臨床研究疾病的發(fā)病機(jī)理、療效觀察以及預(yù)后判斷等方面均有重要意義[14-16]。其中，CD3+為成熟T細(xì)胞的標(biāo)志，可有效代表總T細(xì)胞；CD4+主要表達(dá)于輔助T細(xì)胞；CD8+為協(xié)同受體的T細(xì)胞受體的跨膜糖蛋白，正常生理狀態(tài)下，CD4+與CD8+之間可相互制約與協(xié)調(diào)，以處于動態(tài)平衡狀態(tài)[12-17]。本研究中，觀察組CD3+與CD4+高于對照組，CD8+水平低于對照組，提示該治療方案可有效調(diào)節(jié)細(xì)胞因子水平。此外，觀察組LN、HA與CL-Ⅳ水平均低于對照組，AST、GGT與ALT水平均低于對照組，提示復(fù)方甘草酸苷片具有控制肝纖維化，提高肝功能水平的效果。推測這可能是因?yàn)閺?fù)方甘草酸苷片的相關(guān)成分包括鹽酸半胱氨酸、甘氨酸、甘草酸等。研究發(fā)現(xiàn)甘草酸苷能夠抑制花生四烯酸代謝酶的活性，進(jìn)而可起到免疫抑制以及控制炎癥反應(yīng)的效果[18]。甘草酸苷在機(jī)體體內(nèi)代謝產(chǎn)物能夠在機(jī)體內(nèi)競爭性抑制類固醇激素的滅活并減緩其代謝，從而發(fā)揮其類固醇樣作用。甘草酸苷代謝產(chǎn)物還可以選擇性地抑制補(bǔ)體系統(tǒng)的激活途徑，降低循環(huán)免疫復(fù)合物水平，從而發(fā)揮抗補(bǔ)體活性的作用，從而起到改善肝功能，發(fā)揮保護(hù)肝細(xì)胞膜作用[19]。

綜上所述，在川芎嗪治療基礎(chǔ)上，酒精性肝病病人采用復(fù)方甘草酸苷片治療，效果較為顯著，可有效控制炎癥，抑制肝纖維化，利于保護(hù)肝功能，改善免疫功能，促使病人疾病轉(zhuǎn)歸。