白細(xì)胞群落參數(shù)在敗血癥病人中的臨床應(yīng)用價(jià)值

李光友

作者單位：蕪湖市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，安徽 蕪湖241001

敗血癥是一種由感染引起的全身炎癥反應(yīng)綜合征，全球每年報(bào)告約3 100萬例，死亡率為17%[1-3]。早期診斷和及時(shí)治療對(duì)于限制多器官衰竭和改善病人預(yù)后具有重要意義[4-5]。然而，由于敗血癥和非感染性全身性炎癥的許多臨床癥狀相互重疊，且微生物感染的證據(jù)獲得需要時(shí)間長(zhǎng)，敏感性低，因此很難對(duì)其進(jìn)行早期鑒別診斷[6]。目前廣泛用于敗血癥診斷的生物標(biāo)志物是C反應(yīng)蛋白和降鈣素原，也均存在一些局限性，如診斷性能不足，費(fèi)用高等缺陷[7-9]。因此，對(duì)敗血癥的診斷，專家建議多參數(shù)聯(lián)合使用[10]。新一代血液分析儀利用多項(xiàng)創(chuàng)新技術(shù)，擴(kuò)大了全血細(xì)胞計(jì)數(shù)的信息范圍，一些新的參數(shù)正在成為對(duì)多種疾病的診斷和預(yù)后判斷有用的指標(biāo)[11]。我們通過對(duì)白細(xì)胞群落參數(shù)（CPD）結(jié)果進(jìn)行分析，以評(píng)價(jià)CPD參數(shù)作為敗血癥診斷新的生物標(biāo)志物的臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年1月至2019年2月蕪湖市第二人民醫(yī)院疑似敗血癥住院病人91例和20例健康體檢為研究對(duì)象。敗血癥組：經(jīng)血培養(yǎng)陽性，確診為敗血癥病人59例，其中，男性31例，年齡范圍為47～94歲；女性28例，年齡范圍為47～87歲；血培養(yǎng)陰性組：經(jīng)血培養(yǎng)為陰性的病人32例，男性20例，年齡范圍為25～96歲；女性12例，年齡范圍為16～88歲；健康組：選擇20例健康體檢者，男性10例，女性10例，年齡范圍為25～77歲。本研究符合《世界醫(yī)學(xué)協(xié)會(huì)赫爾辛基宣言》相關(guān)要求，征得病人或其近親屬同意并簽署知情同意書。

1.2 儀器與試劑 BACT/ALERT 3D全自動(dòng)血培養(yǎng)儀及配套的血培養(yǎng)瓶及VITEK2全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)均由法國梅里埃公司提供；日本希森美康公司Sysmex XN9000血細(xì)胞分析儀及配套試劑。

1.3 檢測(cè)方法 血培養(yǎng)在使用抗菌藥物之前，嚴(yán)格無菌操作靜脈采血。采集EDTA-K2抗凝血2 mL，進(jìn)行血常規(guī)檢測(cè)。使用Sysmex XN9000檢測(cè)血常規(guī)并一起自動(dòng)生成CPD參數(shù)。所有操作均嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 23.0軟件進(jìn)行適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料采用表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)；多組間比較采用方差分析。用Medcalc軟件進(jìn)行受試者工作特征（Receiver Operating Characteristic，ROC）曲線分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CPD參數(shù)在不同組別中的比較 在敗血癥病人中，除了NE-SSC、LY-X、LY-WY、MO-WX、MOWY、MO-WZ外，其它的CPD值均與健康組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。其中NE-FSC、NE-WY、NEWZ、MO-Y、LY-Z、MO-X與血培養(yǎng)陰性組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 CPD參數(shù)在不同組別的比較/

表1 CPD參數(shù)在不同組別的比較/

注：CPD為白細(xì)胞群落參數(shù)，NE-SSC為中性粒細(xì)胞細(xì)胞復(fù)雜性，NE-FSC為中性粒細(xì)胞細(xì)胞大小，NE-WX為中性粒細(xì)胞的復(fù)雜性和彌散寬度，NE-WY為中性粒細(xì)胞的熒光強(qiáng)度和彌散寬度，NE-WZ為中性粒細(xì)胞的細(xì)胞大小和彌散寬度，LY-X為淋巴細(xì)胞細(xì)胞復(fù)雜性，LY-Y為淋巴細(xì)胞熒光強(qiáng)度，LY-Z為淋巴細(xì)胞細(xì)胞大小，LY-WX為淋巴細(xì)胞的復(fù)雜性和彌散寬度，LY-WY為淋巴細(xì)胞的熒光強(qiáng)度和彌散寬度，LY-WZ為淋巴細(xì)胞的細(xì)胞大小和彌散寬度，MO-X為單核細(xì)胞細(xì)胞復(fù)雜性，MO-Y為單核細(xì)胞熒光強(qiáng)度，MO-Z為單核細(xì)胞細(xì)胞大小，MO-WX為單核細(xì)胞的復(fù)雜性和彌散寬度，MO-WY為單核細(xì)胞的熒光強(qiáng)度和彌散寬度，MO-WZ為單核細(xì)胞的細(xì)胞大小和彌散寬度；與敗血癥組比較，aP＜0.05

images/BZ_160_1286_752_2240_811.png0.295 0.000 0.048 0.000 0.000 0.603 0.043 0.000 0.000 0.334 0.000 0.000 0.000 0.000 0.487 0.088 0.113例數(shù)NE-SSC NE-FSC NE-WX NE-WY NE-WZ LY-X LY-Y LY-Z LY-WX LY-WY LY-WZ MO-X MO-Y MO-Z MO-WX MO-WY MO-WZ 20 154.60±4.20 94.04±5.65a 298.65±14.25a 593.30±25.77a 709.30±24.12a 81.14±1.77 68.43±2.85a 61.63±1.09a 456.10±42.75a 870.00±104.83 616.60±21.62a 120.67±2.05a 116.52±5.57a 71.23±2.39a 264.95±31.59 626.60±99.0 699.30±71.60 32 152.73±4.32 92.94±6.18a 311.06±18.60 643.84±63.79a 753.25±90.17a 80.23±3.32 70.81±6.16 60.57±3.11a 509.21±60.08 896.34±130.68 659.40±54.76 121.95±3.45a 120.05±11.13a 67.54±3.65a 258.34±25.92 710.62±103.78 746.34±100.97 59 152.52±5.86 88.04±5.70 316.50±34.28 760.69±186.79 824.28±89.56 80.57±3.39 73.10±8.90 59.08±2.79 537.38±49.00 922.47±158.15 681.94±99.90 124.66±5.24 131.22±13.12 64.39±5.46 267.98±42.38 697.16±166.5 765.44±142.09 1.23 11.71 3.12 13.60 17.61 0.50 3.21 7.83 8.19 1.10 5.12 8.00 16.80 17.84 0.72 2.47 2.23

2.2 敗血癥病人CPD參數(shù)（NE?FSC、NE?WY、NE?WZ、MO?X、MO?Y和LY?Z）與血培養(yǎng)陰性病人的ROC曲線分析 NE-FSC、NE-WY、NE-WZ、MO-X、MO-Y和LY-Z的ROC曲線下面積（AUC）、95%CI等結(jié)果見表2。

2.3 CPD參數(shù)（NE?FSC、NE?WY、NE?WZ、MO?X、MO?Y和LY?Z）對(duì)敗血癥診斷的評(píng)價(jià) NE-FSC、NE-WY、NE-WZ、MO-X、MO-Y和LY-Z的敏感性、特異性、陽性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值等結(jié)果見表3。

3 討論

固有免疫系統(tǒng)是宿主抵御病原微生物入侵機(jī)體的第一道防線，外周血白細(xì)胞是該系統(tǒng)的主要組成部分，活化的中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞具有較強(qiáng)的變形、遷移、黏附、吞噬和釋放細(xì)胞因子等能力[12-13]。隨著全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀技術(shù)的改進(jìn)，反映特定細(xì)胞詳細(xì)狀態(tài)的各種細(xì)胞群體數(shù)據(jù)變得可用。Sysmex XN9000使用流式細(xì)胞術(shù)來測(cè)量單個(gè)細(xì)胞：以側(cè)散射光反映細(xì)胞內(nèi)的顆粒來進(jìn)行白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)；以前散射光反映細(xì)胞體積和形狀；獨(dú)特的表面活性劑及熒光染料可以穿透活化的細(xì)胞并結(jié)合細(xì)胞質(zhì)和核酸的細(xì)胞器來反映細(xì)胞核酸/蛋白含量。這些白細(xì)胞差異的光學(xué)信號(hào)在WDF散點(diǎn)圖的三個(gè)軸上顯示，形成CPD參數(shù)[14]。CPD參數(shù)反應(yīng)有關(guān)中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的形態(tài)學(xué)及功能特征的定量信息，可以更詳細(xì)地研究細(xì)胞在各種刺激（如感染）下的形態(tài)學(xué)發(fā)生變化，從而提供有關(guān)細(xì)胞激活狀態(tài)的有價(jià)值的信息[10]。

表2 NE-FSC、NE-WY、NE-WZ、MO-X、MO-Y和LY-Z的ROC曲線分析

表3 NE-FSC、NE-WY、NE-WZ、MO-X、MO-Y和LY-Z的敗血癥診斷評(píng)價(jià)

本研究結(jié)果顯示，NE-FSC、NE-WY、NE-WZ、MO-Y、LY-Z和MO-X在敗血癥病人變化顯著。這些結(jié)果表明，敗血癥的發(fā)展可引起造血系統(tǒng)的變化[15-16]，導(dǎo)致外周血白細(xì)胞形態(tài)及功能特征改變。中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)的復(fù)雜性隨著敗血癥的發(fā)生而增加。兩者的體積在敗血癥病人中較正常人相比，顯得更為不均勻[17]。類似地，核酸的增加對(duì)感染刺激，可激活細(xì)胞因子的產(chǎn)生[10]。ROC曲線分析顯示，NE-FSC、NE-WY、NE-WZ和MO-Y的ROC曲線下面積（AUC）均高于0.7，其中NE-WY的AUC為0.75，與文獻(xiàn)報(bào)道相近（0.71）[18]，表明這些CPD參數(shù)在敗血癥診斷中具有較高的價(jià)值。在最佳Youden指數(shù)（Youden指數(shù)＝敏感性+特異性-1）時(shí)，中性粒細(xì)胞相關(guān)CPD參數(shù)NE-FSC（0.42）、NE-WY（0.39）和 NE-WZ（0.44）具有較好的敏感度，其中NE-WY敏感性為83.05%，與文獻(xiàn)相近（86.20%）[19]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，單核細(xì)胞相關(guān)CPD參數(shù)MO-X和MO-Y在敗血癥診斷方面具有較好的特異性?？紤]到本研究尚存在的缺陷，一方面樣本量較少和敗血癥感染類型選擇不全面，從而使得研究結(jié)果在某些方面發(fā)生一定程度的偏倚；另一方面未能反映CPD參數(shù)與敗血癥嚴(yán)重程度之間的關(guān)系。

綜上所述，Sysmex XN-9000提供的CPD參數(shù)在敗血癥的診斷方面具有一定的價(jià)值。同樣值得注意的是，CPD參數(shù)不需要額外的血液樣本，因?yàn)槠渑c血常規(guī)參數(shù)一起在Sysmex XN-9000上自動(dòng)生成的，因此便于臨床醫(yī)生對(duì)敗血癥的早期診治。