4種微生物殺蟲劑對(duì)甜菜夜蛾的室內(nèi)毒力及田間防效評(píng)價(jià)

張秀霞　白婷婷　毛曉紅　周仙紅　張安盛

摘要：本研究采用浸漬法測(cè)定4種微生物殺蟲劑對(duì)甜菜夜蛾的室內(nèi)毒力，并進(jìn)行防治大蔥甜菜夜蛾的田間藥效試驗(yàn)。室內(nèi)測(cè)定結(jié)果表明，4種微生物殺蟲劑對(duì)甜菜夜蛾的毒力順序?yàn)椋禾鸩艘苟旰诵投嘟求w病毒>金龜子綠僵菌CQMa421>蘇云金桿菌>球孢白僵菌，其中甜菜夜蛾核型多角體病毒、金龜子綠僵菌CQMa421對(duì)甜菜夜蛾的室內(nèi)毒力較高，LC50值分別為11.145、128.249 mg/L。田間試驗(yàn)結(jié)果表明，666.7m2 80億孢子/毫升金龜子綠僵菌CQMa421可分散油懸浮劑用量50、60 mL，16 000 IU/mg蘇云金桿菌可濕性粉劑用量80、100 g，300億PIB/克甜菜夜蛾核型多角體病毒水分散粒劑用量3.5、5.0 g，藥后10 d的校正防效均可達(dá)90%以上，持效性較好。

關(guān)鍵詞：微生物殺蟲劑;甜菜夜蛾;室內(nèi)毒力;田間防效

中圖分類號(hào)：S482.3+9：S433.4文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A文章編號(hào)：1001-4942（2020）04-0141-05

Abstract The toxicity of four microbial insecticides to Spodoptera exigua in laboratory was determined by impregnation method， and their field control efficacy test was also carried out. The results showed that the indoor toxicity of the four tested insecticides to Spodoptera exigua was ranked as Spodoptera exigua nucleopolyhedrovirus>Metarhizium anisopliae CQMa421>Bacillus thuringiensis>Beauveria bassiana. Among them， the Spodoptera exigua nucleopolyhedrovirus and Metarhizium anisopliae CQMa421 had higher indoor toxicity to Spodoptera exigua with the LC50 value as 11.145 and 128.249 mg/L， respectively. The field control efficacy test results showed that 50 and 60 mL per 666.7m2of 8 billion spores per milliliter of Metarhizium anisopliae CQMa421 dispersible oil suspension agent， 80 and 100 g per 666.7m2of 16 000 IU/mg of Bacillus thuringiensis wettable powder preparation， 3.5 and 5.0 g per 666.7m2of 30 billion PIB per grams of Spodoptera exigua nucleopolyhedrovirus water dispersible granule agent preparation had higher long-last toxicity with the corrected control efficacy more than 90% after treated for 10 days.

Keywords Microbial insecticide; Spodoptera exigua; Indoor toxicity; Field control efficacy

甜菜夜蛾（Spodoptera exigua Hübner）又名貪夜蛾、玉米夜蛾，屬鱗翅目夜蛾科[1，2]，是一種分布廣、食性雜、寄主范圍廣的害蟲，為害35科108屬170多種植物，包括十字花科、茄科、葫蘆科、豆類等多種蔬菜，還嚴(yán)重為害大蔥等百合科作物[3，4]。該害蟲在大蔥上為害形式主要以幼蟲群集葉背，吐絲結(jié)網(wǎng)，嚼食蔥葉，啃食并鉆入蔥管內(nèi)隱藏，取食管內(nèi)葉肉形成缺刻、孔洞或網(wǎng)狀蔥葉，暴食期后可吃光蔥葉等[5，6]。

近年來(lái)，山東省大蔥主產(chǎn)區(qū)甜菜夜蛾發(fā)生面積大且為害嚴(yán)重，部分地區(qū)毀產(chǎn)絕收，嚴(yán)重影響大蔥產(chǎn)量和質(zhì)量，但隨著農(nóng)藥的頻繁使用以及不合理用藥，甜菜夜蛾對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥、氨基甲酸酯類農(nóng)藥產(chǎn)生較高抗性，這對(duì)山東省大蔥安全生產(chǎn)造成重大威脅[7-9]。為了篩選控制大蔥上甜菜夜蛾的有效藥劑，本研究測(cè)定了4種微生物殺蟲劑對(duì)甜菜夜蛾的室內(nèi)毒力及其在大蔥甜菜夜蛾上的田間防治效果，以期為生產(chǎn)上安全控制甜菜夜蛾及藥劑的合理使用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試藥劑微生物殺蟲劑：80億孢子/毫升金龜子綠僵菌CQMa421可分散油懸浮劑（重慶聚立信生物工程有限公司產(chǎn)品），16 000 IU/mg蘇云金桿菌可濕性粉劑（武漢科諾生物科技股份有限公司產(chǎn)品），100億孢子/克球孢白僵菌可分散油懸浮劑（山西綠海農(nóng)藥科技有限公司產(chǎn)品），300億PIB/克甜菜夜蛾核型多角體病毒水分散粒劑（河南省濟(jì)源白云實(shí)業(yè)有限公司產(chǎn)品）。對(duì)照化學(xué)藥劑：15%高效氯氟氰菊酯可溶液劑（山東省聯(lián)合農(nóng)藥工業(yè)有限公司產(chǎn)品）。均為市場(chǎng)購(gòu)買。

1.1.2 供試蟲源[HTSS] 甜菜夜蛾蛹購(gòu)自河南省濟(jì)源白云實(shí)業(yè)有限公司，室內(nèi)人工飼料飼養(yǎng)，建立穩(wěn)定種群。飼養(yǎng)條件：（25±2）℃，相對(duì)濕度70%左右，光周期為16 h∶8 h（L∶D）。挑選體長(zhǎng)一致且健康的2齡幼蟲備用。

1.2 主要儀器設(shè)備

RXZ型人工氣候箱（寧波江南儀器廠產(chǎn)品）;養(yǎng)蟲盒，由直徑6 cm、高7 cm的塑料食品盒改造而成，盒蓋上有15 mm×15 mm十字型通氣孔。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 室內(nèi)毒力測(cè)定采用浸漬法。將各藥劑分別用蒸餾水按等比配制成7個(gè)系列質(zhì)量濃度備用。將新鮮甘藍(lán)菜葉剪成直徑為6 cm圓片，清洗干凈，各藥液梯度均浸泡4個(gè)圓片，每個(gè)圓片浸泡10 s，取出，用濾紙吸除多余藥液并晾干，然后放入墊有濕潤(rùn)濾紙的養(yǎng)蟲盒中，以浸清水為空白對(duì)照。各取40頭甜菜夜蛾2齡幼蟲放入浸蟲籠中，置于對(duì)應(yīng)梯度藥液中浸漬10 s，每重復(fù)10頭幼蟲，以清水浸漬為對(duì)照。用毛筆將2齡幼蟲挑入養(yǎng)蟲盒中，盒蓋封口，置于26℃、相對(duì)濕度70%、光周期為16 h∶8 h（L∶D）的光照培養(yǎng)箱中，48 h后統(tǒng)計(jì)幼蟲死亡數(shù)量。

1.3.2 田間藥效試驗(yàn)在山東省濟(jì)南市章丘區(qū)繡惠鎮(zhèn)綠竹園村的蔥地中進(jìn)行。大蔥品種為‘百脈泉，2018年5月26日定植，種植密度為666.7m2 22 000～25 000株。試驗(yàn)設(shè)計(jì)每666.7 m2 80億孢子/毫升金龜子綠僵菌CQMa421可分散油懸浮劑用量分別為40、50、60 mL，16 000 IU/mg蘇云金桿菌可濕性粉劑用量分別為50、80、100 g，300億PIB/克甜菜夜蛾核型多角體病毒水分散粒劑用量分別為2.0、3.5、5.0 g，以15%高效氯氟氰菊酯可溶液劑10 mL為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照，以清水為空白對(duì)照。每處理重復(fù)4次，小區(qū)面積40 m2。于7月15日噴藥，用水量為900 kg/hm2，此時(shí)甜菜夜蛾2～3齡幼蟲占85%左右。

于藥前調(diào)查小區(qū)蟲口基數(shù)，藥后1、3、7、10 d調(diào)查殘存活蟲數(shù)。采用5點(diǎn)取樣法取樣，每點(diǎn)4株大蔥。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用Microsoft Excel 2007及SPSS 19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析，計(jì)算LC50值及95%置信區(qū)間、斜率等，并采用鄧肯氏新復(fù)極差法對(duì)田間試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行多重比較，計(jì)算蟲口減退率及校正防效。

蟲口減退率（%）=（施藥前活蟲數(shù)-施藥后活蟲數(shù)）/施藥前活蟲數(shù)×100 ;

校正防效（%）=（處理區(qū)蟲口減退率-對(duì)照區(qū)蟲口減退率）/（100-對(duì)照區(qū)蟲口減退率）×100。

2 結(jié)果與分析

2.1 供試藥劑對(duì)甜菜夜蛾的室內(nèi)毒力測(cè)定

由表1可以看出，各藥劑對(duì)甜菜夜蛾LC50的95%置信區(qū)間均不重疊，表明它們對(duì)甜菜夜蛾的毒力存在顯著差異。4種微生物殺蟲劑中以甜菜夜蛾核型多角體病毒的毒力最高，藥后48 h的LC50值為11.145 mg/L;其次為金龜子綠僵菌CQMa421，藥后48 h的LC50值為128.249 mg/L;蘇云金桿菌的毒力較低，藥后48 h的LC50值為1 978.474 mg/L;球孢白僵菌的毒力最低，藥后48 h的LC50值為4747.436 mg/L（表1）;而高效氯氟氰菊酯藥后48 h的LC50值為0.407 mg/L ，顯著高于4種微生物殺蟲劑的室內(nèi)毒力。通過(guò)室內(nèi)毒力測(cè)定，甜菜夜蛾核型多角體病毒、金龜子綠僵菌CQMa421、蘇云金桿菌對(duì)甜菜夜蛾毒力較高，可進(jìn)行田間藥效試驗(yàn)驗(yàn)證。

2.2 供試藥劑對(duì)大蔥甜菜夜蛾的田間防治效果

由表2可以看出，藥后1～10 d，不同用量的300億PIB/克甜菜夜蛾核型多角體病毒水分散粒劑的校正防效為29.13%～92.43%，藥后10 d的校正防效達(dá)85%以上。藥后1～3 d，300億PIB/克甜菜夜蛾核型多角體病毒水分散粒劑的校正防效均極顯著低于15%高效氯氟氰菊酯可溶液劑;藥后7 d與15%高效氯氟氰菊酯可溶液劑的無(wú)顯著差異（2.0 g用量的除外）;藥后10 d的校正防效均極顯著高于15%高效氯氟氰菊酯可溶液劑。因此，300億PIB/克甜菜夜蛾核型多角體病毒水分散粒劑的持效性相對(duì)較高，666.7m2用量3.5、5.0 g 10 d的校正防效高達(dá)90%以上，可用于甜菜夜蛾的田間防治。

由表3可以看出，藥后1～10 d，不同用量80億孢子/毫升金龜子綠僵菌CQMa421可分散油懸浮劑的校正防效為33.86%～93.22%，藥后10 d的校正防效達(dá)到87.01%～93.22%。藥后1～7 d，80億孢子/毫升金龜子綠僵菌CQMa421可分散油懸浮劑的校正防效均極顯著低于15%高效氯氟氰菊酯可溶液劑;藥后10 d，則極顯著高于15%高效氯氟氰菊酯可溶液劑。因此，該微生物殺蟲劑具有較高的持效性，666.7m2用量50、60 mL 10 d的校正防效高達(dá)90%以上，適用于田間防治甜菜夜蛾。

由表4可以看出，藥后1～10 d，不同用量16 000 IU/mg蘇云金桿菌可濕性粉劑的校正防效為32.32%～92.85%，藥后10 d的校正防效最好，均達(dá)86%以上。藥后1～7 d，16 000 IU/mg蘇云金桿菌可濕性粉劑的校正防效均極顯著低于15%高效氯氟氰菊酯可溶液劑;藥后10 d的則極顯著高于15%高效氯氟氰菊酯可溶液劑。該微生物殺蟲劑的持效性也較高，666.7m2用量80、100 g 10 d的校正防效達(dá)到90%以上，田間防治效果更好。

3 討論與結(jié)論

生物防治已成為甜菜夜蛾綜合防治中的一項(xiàng)重要措施。甜菜夜蛾核型多角體病毒、金龜子綠僵菌CQMa421、蘇云金桿菌等可通過(guò)病毒復(fù)制或真菌侵染產(chǎn)生大量菌體并釋放毒素，使害蟲中毒并停止取食，導(dǎo)致害蟲因饑餓及血液和神經(jīng)中毒死亡[10-13]。該類微生物殺蟲劑具有持效期長(zhǎng)、防效好、對(duì)天敵無(wú)傷害、害蟲不易產(chǎn)生抗性、不污染環(huán)境、對(duì)人畜安全等特點(diǎn)，是當(dāng)前蔬菜、水果及其它農(nóng)作物上較為理想的一類綠色生物農(nóng)藥?[14]。但在使用過(guò)程中存在成本較高、持續(xù)作用和穩(wěn)定性較差等弊端，嚴(yán)重阻礙其廣泛應(yīng)用。本研究發(fā)現(xiàn)，甜菜夜蛾核型多角體病毒、金龜子綠僵菌CQMa421對(duì)甜菜夜蛾的室內(nèi)毒力較高，這與羅冰[13]、劉琴[15]等對(duì)甜菜夜蛾核型多角體病毒的研究報(bào)道一致。此外，田間藥效試驗(yàn)中甜菜夜蛾核型多角體病毒藥后10 d的防效達(dá)85%以上，與徐愛(ài)仙[16]、楊妮娜[17]等在花椰菜上防治甜菜夜蛾的研究結(jié)果一致;蘇云金桿菌對(duì)大蔥甜菜夜蛾的防治藥后10 d的防效達(dá)86%以上，與祝延力[18]、張興國(guó)[19]等在甜菜、西蘭花上的防效有差異，這可能與甜菜夜蛾防治時(shí)期的蟲齡有關(guān);對(duì)于金龜子綠僵菌CQMa421在甜菜夜蛾上的防治尚未見(jiàn)報(bào)道，但彭國(guó)雄等[20]報(bào)道了金龜子綠僵菌CQMa421可侵染鱗翅目害蟲，本研究中其藥后10 d防效可達(dá)87%以上。

防治時(shí)，室內(nèi)與自然環(huán)境之間有一定差距，主要是因?yàn)樯餁⑾x劑的作用效果易受紫外線照射、光照、氣溫等環(huán)境條件影響。實(shí)際應(yīng)用中可結(jié)合甜菜夜蛾幼蟲的習(xí)性及為害特點(diǎn)，選擇傍晚施藥，同時(shí)建議在甜菜夜蛾卵孵化盛期至低齡幼蟲高峰期施藥防治，以阻止幼蟲鉆入蔥葉內(nèi)為害。此外，還要嚴(yán)格按照試驗(yàn)劑量施藥，以免產(chǎn)生藥害[21]。田間防治過(guò)程中，微生物殺蟲劑還應(yīng)盡量與其它化學(xué)藥劑交替使用，減少用藥次數(shù)，避免長(zhǎng)期、單一用藥。

甜菜夜蛾核型多角體病毒、金龜子綠僵菌CQMa421、蘇云金桿菌等微生物殺蟲劑具有低毒、安全、對(duì)環(huán)境無(wú)污染等優(yōu)點(diǎn)，代表了當(dāng)今害蟲防治和抗性治理的一個(gè)新方向，應(yīng)用前景廣闊。后續(xù)還需深入進(jìn)行微生物殺蟲劑對(duì)甜菜夜蛾的毒力等研究來(lái)驗(yàn)證其在生產(chǎn)中的應(yīng)用效果，以便于更好地指導(dǎo)生產(chǎn)者科學(xué)用藥。

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