14種殺菌劑對(duì)玉米藤倉鐮孢菌室內(nèi)毒力測定

馬金慧　楊克澤　吳之濤　崔凌霄　任寶倉　楊成德　高正?！￡愔緡?/p>

摘要：近年來，由藤倉鐮孢菌（Fusarium fujikuroi）引起的玉米莖腐病在甘肅發(fā)生危害，造成部分品種植株枯死，嚴(yán)重減產(chǎn)。為篩選防治玉米藤倉鐮孢莖腐病的高效低毒殺菌劑，本研究采用菌絲生長速率法測定14種殺菌劑對(duì)藤倉鐮孢菌的毒力。結(jié)果表明：10%苯醚甲環(huán)唑WG、12.5%戊唑醇EW、75%肟菌·戊唑醇WG和70%丙森鋅WP對(duì)藤倉鐮孢菌菌絲的生長均有較好的抑制作用。對(duì)該菌毒力最強(qiáng)的殺菌劑是12.5%戊唑醇EW，其EC50值為0.0831 μg/mL;較強(qiáng)的是10%苯醚甲環(huán)唑WG和75%肟菌·戊唑醇WG，其EC50值分別為0.2927 μg/mL和0.3914 μg/mL;70%丙森鋅WP和75%百菌清WP的毒力相對(duì)較強(qiáng)，EC50值分別為0.6404 μg/mL和0.7487 μg/mL;2%春雷霉素AS毒力最弱，EC50 值為45.6161 μg/mL。玉米藤倉鐮孢菌菌絲生長對(duì)75%肟菌·戊唑醇WG、0.3%四霉素AS、80%代森錳鋅WP和2%春雷霉素AS的敏感性相對(duì)較強(qiáng)，對(duì)75%百菌清WP、77%氫氧化銅WP和50%烯酰嗎啉WG的敏感性較弱。

關(guān)鍵詞：玉米莖腐病;藤倉鐮孢菌（F.fujikuroi）;生長速率法;毒力測定

中圖分類號(hào)：S482文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A文章編號(hào)：1001-4942（2020）03-0102-05

AbstractIn recent years， corn stalk rot caused by Fusarium fujikuroi occurred seriously in Gansu Province， causing some varieties to die and yield-reduction seriously. In order to screen out the high-efficiency and low-toxicity fungicides for field control of corn stalk rot， the toxicity of 14 fungicides to F. fujikuroi was determined by mycelium growth rate method. The results showed that 10% methyloxazole WG， 12.5% tebuconazole EW， 75% oxime bacteria·tebuconazole WG and 70% propineb WP had better inhibitory effects on mycelium growth of F. fujiana，in which，12.5% tebuconazole EW had the strongest toxicity to F.fujikuroi with the EC50 value as 0.0831μg/mL. The toxicity of 10% methyloxazole WG and 75% oxime bacteria·tebuconazole WG was stronger，and the corresponding EC50 values were 0.2927， 0.3914 μg/mL， respectively. 70% propineb WP and 75% chlorothalonil WP had relatively stronger toxicity with the EC50 values as 0.6404 and 0.7487 μg/mL， respectively，While that of 2% kasugamycin AS was the weakest with the EC50 value as 45.6161 μg/mL. The mycelial growth of F.fujikuroi was relatively sensitive to 75% oxime bacteria·tebuconazole WG， 0.3% tetramycin AS， 80% carmazine WP and 2% kasugamycin AS， but less sensitive to 75% chlorothalonil WP， 77% copper hydroxide WP and 50% dimethomorph WG.

KeywordsCorn stalk rot;Fusarium fujikuroi;Growth rate method;Toxicity test

玉米是重要的糧飼兼用型作物和工業(yè)原料、能源植物[1]，種植范圍廣，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和國民經(jīng)濟(jì)中占有重要地位。近年來，由于來自全國各地的雜交組合增多，加之連年種植，重茬迎茬嚴(yán)重，甘肅制種玉米病害發(fā)生呈現(xiàn)復(fù)雜性。2016年甘肅首次發(fā)現(xiàn)由藤倉鐮孢菌（Fusarium.fujikuroi）引起的玉米莖腐病[2]，發(fā)病植株通常表現(xiàn)為地上第二節(jié)以上部位發(fā)病。受害植株主要表現(xiàn)為莖基部葉鞘上呈圓形、近圓形水漬狀病斑，剝開葉鞘后可見發(fā)病部位有白色稀疏霉層，莖節(jié)部腐爛并縊縮，病重時(shí)繞莖稈一周，發(fā)病節(jié)上部青枯，造成植株矮化、倒伏、枯死和田間斷壟。該病在大喇叭口期田間呈順行連片發(fā)生，一旦發(fā)病會(huì)造成嚴(yán)重?fù)p失，甚至絕收，嚴(yán)重影響玉米產(chǎn)量，其它生育期未見發(fā)生。目前此病已在武威、張掖等地制種田發(fā)生，2018年武威大田中也已發(fā)現(xiàn)，并造成一定面積的損失。

國內(nèi)外研究表明，藤倉鐮孢菌是引起水稻惡苗病的重要致病菌[3，4]，對(duì)其研究也是作為水稻惡苗病的主要病原菌而進(jìn)行[5，6]，有關(guān)該菌對(duì)其它作物危害的研究較少。本試驗(yàn)在前人對(duì)藤倉鐮孢菌引起的玉米莖腐病癥狀、病原菌及其生物學(xué)特性研究的基礎(chǔ)上，選擇14種殺菌劑，研究其對(duì)玉米藤倉鐮孢菌的毒力，以期篩選出有效藥劑，為該病防治提供技術(shù)依據(jù)。

1材料與方法

1.1病原菌

本試驗(yàn)于2017年在甘肅省農(nóng)業(yè)工程技術(shù)研究院植物病理學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。藤倉鐮孢菌在甘肅省農(nóng)業(yè)工程技術(shù)研究院植物病理實(shí)驗(yàn)室4℃冰箱中保存。

1.2供試培養(yǎng)基

采用PDA培養(yǎng)基對(duì)病原菌進(jìn)行保存和活化。

1.3供試殺菌劑

供試殺菌劑共14種（表1）。1.4試驗(yàn)方法

菌絲生長速率抑制法：根據(jù)預(yù)試結(jié)果，將不同殺菌劑用無菌水配制成5個(gè)濃度（質(zhì)量濃度）梯度（表2）。分別將不同濃度藥劑按照體積比1∶9的比例加入到滅菌冷卻至50℃的PDA培養(yǎng)基中，充分混勻后分別倒入直徑9 cm的滅菌培養(yǎng)皿中，制成系列濃度的含藥培養(yǎng)基。每處理設(shè)3次重復(fù)，以加入無菌水的PDA培養(yǎng)基作對(duì)照。用直徑0.5 cm的無菌打孔器沿著菌種同一個(gè)圓周打孔，用滅菌鑷子將打好的菌餅接種到含藥培養(yǎng)基的正中央，菌絲面朝下，每皿一塊，于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6 d。采用十字交叉法測量菌落直徑（cm），取平均值，計(jì)算抑菌率。

抑菌率（%）=（對(duì)照菌落直徑-處理菌落直徑）/（對(duì)照菌落直徑-0.5）×100。

1.5數(shù)據(jù)處理與分析

采用Microsoft Excel和SPSS軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析。將抑菌率換算成抑制幾率值，藥劑質(zhì)量濃度轉(zhuǎn)化為對(duì)數(shù)值，并用回歸法求毒力回歸方程和相關(guān)系數(shù)，計(jì)算EC50值。

2結(jié)果與分析

2.1不同殺菌劑對(duì)藤倉鐮孢菌菌絲的抑制作用

由表2可以看出，處理后6 d，各殺菌劑不同濃度處理對(duì)藤倉鐮孢菌菌絲均有不同程度的抑制作用，同種殺菌劑隨濃度增大菌落直徑逐漸減小、抑制率逐漸增大。其中，10%苯醚甲環(huán)唑WG、12.5%戊唑醇EW（最低濃度處理除外）、75%肟菌·戊唑醇WG和70%丙森鋅WP不同濃度處理的抑菌率均達(dá)到60%以上。各殺菌劑中，75%肟菌·戊唑醇WG濃度7 μg/mL時(shí)其抑制率達(dá)到100%;10%苯醚甲環(huán)唑WG濃度152 μg/mL時(shí)其抑制率達(dá)到98.4%;0.3%四霉素AS和80%代森錳鋅WP濃度分別為111、86 μg/mL時(shí)其抑菌率分別為98.3%和99.6%，但其它濃度的抑菌率均較低;2%春雷霉素AS濃度0.78 μg/mL時(shí)其抑菌率為1.6%，幾乎對(duì)藤倉鐮孢菌菌絲沒有抑制作用。由此認(rèn)為，10%苯醚甲環(huán)唑WG、12.5%戊唑醇EW、75%肟菌·戊唑醇WG和70%丙森鋅WP對(duì)藤倉鐮孢菌菌絲的生長均有較好的抑制作用。

2.2不同殺菌劑對(duì)藤倉鐮孢菌的室內(nèi)毒力測定

由表3可知，14種殺菌劑對(duì)玉米藤倉鐮孢菌的毒力由強(qiáng)到弱依次為12.5%戊唑醇EW、10%苯醚甲環(huán)唑WG、75%肟菌·戊唑醇WG、70%丙森鋅WP、75%百菌清WP、50%多菌靈WP、80%代森錳鋅WP、47%春雷·王銅WP、62.5 g/L精甲·咯菌腈SC、70%甲基硫菌靈WP、0.3%四霉素AS、77%氫氧化銅WP、50%烯酰嗎啉WG和2%春雷霉素AS。其中12.5%戊唑醇EW的毒力最強(qiáng)，其EC50值為0.0831 μg/mL;10%苯醚甲環(huán)唑WG和75%肟菌·戊唑醇WG的毒力相對(duì)較強(qiáng)，其EC50值分別為0.2927 μg/mL 和0.3914 μg/mL;而2%春雷霉素AS的毒力最弱，其EC50 值為45.6161 μg/mL。

按照回歸方程的斜率k與殺菌劑對(duì)病原菌的敏感性成正比的關(guān)系，供試藥劑中，斜率k最大為3.2237，說明藤倉鐮孢菌對(duì)75%肟菌·戊唑醇WG最為敏感;其次斜率k相對(duì)較大時(shí)為1.8201，說明其對(duì)0.3%四霉素AS較為敏感;80%代森錳鋅WP和2%春雷霉素AS的斜率k分別為1.2606和1.2021，說明其對(duì)這兩種藥劑相對(duì)敏感;斜率k在0.5467～0.6718之間，說明其對(duì)75%百菌清WP、77%氫氧化銅WP和50%烯酰嗎啉WG的敏感性較弱。

3討論與結(jié)論

玉米莖腐病的病原菌主要有腐霉菌和鐮孢菌，其中由禾谷鐮孢菌所致該病的報(bào)道較多 [7-9]，由藤倉鐮孢菌引起的莖腐病鮮有報(bào)道。本研究以藤倉鐮孢菌為供試菌株，測定14種殺菌劑對(duì)該菌的室內(nèi)毒力。結(jié)果表明：14種供試藥劑中對(duì)玉米藤倉鐮孢菌的毒力較強(qiáng)的有12.5%戊唑醇EW、10%苯醚甲環(huán)唑WG和75%肟菌·戊唑醇WG、70%丙森鋅WP和75%百菌清WP，2%春雷霉素AS毒力最弱。玉米藤倉鐮孢菌菌絲生長對(duì)75%肟菌·戊唑醇WG、0.3%四霉素AS、80%代森錳鋅WP和2%春雷霉素AS敏感性相對(duì)較強(qiáng)，對(duì)75%百菌清WP、77%氫氧化銅WP和50%烯酰嗎啉WG的敏感性較弱。藤倉鐮孢菌作為水稻惡苗病的主要病原菌研究較多，如陳宏州等[10]室內(nèi)毒力測定表明戊唑醇對(duì)藤倉鐮孢菌的毒力最強(qiáng)，這與本研究結(jié)果一致，但在田間試驗(yàn)中戊唑醇的防治效果并不很突出。多菌靈對(duì)藤倉鐮孢菌也有一定抑制作用，但相關(guān)研究顯示該菌對(duì)多菌靈產(chǎn)生了抗藥性 [11]，生產(chǎn)中不建議推薦使用。整體來看，三唑類殺菌劑對(duì)于藤倉鐮孢菌的抑制效果較為明顯。室內(nèi)毒力測定雖然可為玉米藤倉鐮孢莖腐病的防治提供一定的理論依據(jù)，但室內(nèi)篩選的藥劑在大田中的防效可能存在差異，因此還需在探明該病發(fā)病規(guī)律和流行因素的前提下通過大田試驗(yàn)對(duì)室內(nèi)所選藥劑的效果進(jìn)一步驗(yàn)證。

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