苗藥鐵筷子不同炮制品中4種成分含量及毒性的比較研究

王雪 王麗 廖秀 王海波 楊娟 李齊激 楊小生

中圖分類號(hào) R927.2;R283.3;R285.5 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號(hào) 1001-0408（2020）12-1475-06

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.12.13

摘 要 目的：比較苗藥鐵筷子陰干、烘干、蒸制、炒炭制品中4種成分的含量及其毒性。方法：采用高效液相色譜法（HPLC）同時(shí)測(cè)定鐵筷子炮制品中東莨菪苷、秦皮苷、東莨菪內(nèi)酯、異嗪皮啶的含量。色譜柱為Welch-C18，流動(dòng)相為乙腈-水（梯度洗脫），流速為1 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為214 nm，柱溫為30 ℃，進(jìn)樣量為10 μL。采用改良寇氏法測(cè)定鐵筷子不同加工炮制品對(duì)小鼠的半數(shù)致死量（LD50）及其95%置信區(qū)間（CI），并評(píng)價(jià)其急性毒性。結(jié)果：東莨菪苷、秦皮苷、東莨菪內(nèi)酯、異嗪皮啶檢測(cè)質(zhì)量的線性范圍分別為0.019～1.856、0.016～1.616、0.009～0.920、0.006～0.624 μg（R 2均不低于0.999 5），精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性試驗(yàn)的RSD均小于2.0%（n=6）;平均加樣回收率分別為104.49%、102.22%、101.45%、99.26%（RSD均小于2%，n=6）;陰干、烘干、蒸制、炒炭品中，東莨菪苷含量分別為1.119 0%、0.904 3%、1.068 4%、0.036 4%，秦皮苷含量分別為0.867 8%、0.453 9%、0.423 7%、0.020 5%，東莨菪內(nèi)酯含量分別為0.077 1%、0.155 5%、0.084 4%、0.290 8%，異嗪皮啶含量分別為0.110 2%、0.202 1%、0.208 1%、0.249 4%;4種炮制品的LD50分別為4 118.13、3 733.36、1 643.61、>10 000 mg/kg，95%CI分別為（3 748.87，4 523.76）、（3 422.16，4 072.86）、（1 520.90，1 776.23）、（>10 000）mg/kg。結(jié)論：HPLC法重復(fù)性、精密度較好，可用于同時(shí)測(cè)定鐵筷子不同炮制品中4種成分的含量;不同炮制品中4種成分均有所差異，2個(gè)糖苷類毒性成分的含量明顯下降;4種炮制品均為低毒或無毒。

關(guān)鍵詞 鐵筷子;炮制;含量;急性毒性;糖苷類成分;小鼠

Comparative Study on the Contents of Four Compounds from Different Processed Products of Miao Medicine Chimonanthus nitens and Its Toxicity

WANG Xue1，2，3，WANG Li1，2，LIAO Xiu1，2，WANG Haibo4，YANG Juan1，2，LI Qiji1，2，YANG Xiaosheng1，2[1. State Key Laboratory for Efficacy and Utilization of Medicinal Plants， Guizhou Medical University， Guiyang 550014，China; 2. Guizhou Provincial Key Laboratory for Natural Product Chemistry， Chinese Academy of Sciences， Guiyang 550014， China; 3. College of Pharmacy， Guizhou Medical University， Guiyang 550016， China; 4. Sunflower Pharmaceutical Group （Guizhou） Hongqi Co.， Ltd.， Guizhou Liupanshui 553400， China]

ABSTRACT ? OBJECTIVE： To compare the contents ?of 4 components and toxicity from Miao medicine Chimonanthus nitens samples after drying in the shade，oven drying， steam， charring. METHODS： The contents of scopolin， fraxin， scopoletin and isofraxin were simultaneously determined by HPLC. The separation was performed on Welch-C18 column with mobile phase consisted of acetonitrile-water （gradient elution） at the flow rate of 1 mL/min. The detection wavelength was set at 214 nm， and column temperature was 30 ℃， and the sample size was 10 μL. Modified Karber method was used to determine the LD50 and its 95%CI of different processed C. nitens to mice and evaluate its acute toxicity. RESULTS： The linear range of scopolin， fraxin， scopoletin and isofraxin were 0.019-1.856， 0.016-1.616， 0.009-0.920， 0.006-0.624 μg （R2 were all not lower than 0.999 5）. RSDs of precision， stability and reprodu-cibility tests were all lower than 2.0%（n=6）. The average recoveries were 104.49%， 102.22%， 101.45%， 99.26% （all RSDs were lower than 2%， n=6）. The contents of scopolin were 1.119 0%， 0.904 3%， 1.068 4%and 0.036 4%; those of fraxin were 0.867 8%， 0.453 9%， 0.423 7%and 0.020 5%; those of scopoletin were 0.077 1%， 0.155 5%， 0.084 4%and 0.290 8%; those of isofraxidin were 0.110 2%， 0.202 1%， 0.208 1%and 0.249 4%in samples after drying in the shade， oven drying， steam， charring. The LD50 of 4 processed products were 4 118.13， 3 733.36， 1 643.61， >10 000 mg/kg samples; 95%CI were （3 748.87， 4 523.76）， ?（3 422.16， 4 072.86 ）， （1 520.90，1 776.23），（>10 000）mg/kg. CONCLUSIONS：HPLC method is reproducible and precise. It can be used to determine the contents of 4 components in different processed products of C. nitens. The contents of 4 components in different processed products， and the contents of glycosides toxicity components are decreased significantly. All the 4 processed products were low or non-toxic.

KEYWORDS ? Chimonanthus nitens; Processing; Content; Acute toxicity; Glycosides; Mice

鐵筷子又名山蠟梅、臭蠟梅、巖馬桑和野蠟梅等，為蠟梅科植物山蠟梅（Chimonanthus nitens Oliv.）的干燥細(xì)根，全年均可采挖，洗凈，陰干，為常用苗藥，主要分布于我國(guó)貴州省鎮(zhèn)遠(yuǎn)、龍里和貴陽地區(qū)[1]。該藥收載于2003年版《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》《中華本草苗藥卷》等專著，具有活血解毒、祛風(fēng)止痛的功效，可用于治療瘡癤腫毒、跌打損傷、哮喘、勞傷咳嗽、胃痛及風(fēng)濕痹痛等癥[2-4]。鐵筷子化學(xué)成分主要有揮發(fā)油類、生物堿類、黃酮類、香豆素類等[5-6]，藥理作用主要集中在止咳化痰、抑菌、抗炎、鎮(zhèn)痛、抗腫瘤、清除自由基等方面[7-10]。

中藥大多對(duì)人體有一定的毒副作用，通過炮制可以達(dá)到減毒增效的目的。不同的炮制方法，其解毒原理不同，包括使有毒成分減少、利用輔料解毒、使毒性成分發(fā)生轉(zhuǎn)變等。中藥加工炮制的歷史悠久，產(chǎn)地加工是中藥材生產(chǎn)的第一個(gè)環(huán)節(jié)，也是最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)，而炮制是藥材成為飲片最重要的一步，合理的產(chǎn)地采收加工及炮制方法是影響藥材品質(zhì)的關(guān)鍵[11]。中藥材的產(chǎn)地加工和炮制多遵循古法;時(shí)至今日，中藥材生產(chǎn)規(guī)模加大，其產(chǎn)地加工和炮制也需要產(chǎn)業(yè)化，在保證中藥材安全有效的前提下，著力提高加工效率。因此，加強(qiáng)對(duì)產(chǎn)地加工和炮制技術(shù)的研究尤為重要[12-13]。 鐵筷子性涼、味辛，有毒，鮮品外用時(shí)，可引起皮炎或發(fā)皰，服用過量可引起嘔吐、腹瀉、驚厥，且有中毒案例報(bào)道[14]。鐵筷子為民間用藥，現(xiàn)能查到的炮制方法僅有在《中國(guó)民族藥炮制集成》中記載的“取鐵筷子片置鍋中炒黃，加入蜂蜜拌勻炒干，取出晾干”[15]，但該炮制工藝較復(fù)雜，操作技術(shù)難度大，故有必要尋找新的加工炮制方法，以提高其生產(chǎn)效率，并保證用藥安全。本課題組前期對(duì)鐵筷子化學(xué)成分進(jìn)行了研究[16]，并通過查閱相關(guān)文獻(xiàn)證實(shí)，東莨菪苷、秦皮苷、東莨菪內(nèi)酯、異嗪皮啶是其主要活性及質(zhì)量控制標(biāo)志成分[17-22]?；诖耍狙芯恳澡F筷子不同炮制品（陰干、烘干、蒸制、炒炭）為對(duì)象，通過高效液相色譜法（HPLC）比較不同炮制品中東莨菪苷、秦皮苷、東莨菪內(nèi)酯、異嗪皮啶等4種成分的含量差異，并探討其毒性變化，為該苗藥的質(zhì)量控制和臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料

1.1 儀器

1260 Infinity型HPLC儀（美國(guó)Agilent公司）;FA2004N型萬分之一電子分析天平（上海菁海儀器儀表有限公司）;SB25-12DT型超聲波清洗機(jī)（寧波新芝生物科技股份有限公司）;OSB-2100型水浴鍋（上海愛朗儀器有限公司）;101型電熱鼓風(fēng)干燥箱（北京科偉永興儀器有限公司）。

1.2 藥品與試劑

苗藥鐵筷子陰干品（為專著[2-3]收錄品種，批號(hào)：20181108-1，編號(hào)：S1）、烘干品（批號(hào)：20181108-2，編號(hào)：S2）、蒸制品（批號(hào)：20181108-3，編號(hào)：S3）、炒炭品（批號(hào)：20181108-4，編號(hào)：S4）均由葵花藥業(yè)集團(tuán)（貴州）宏奇有限公司提供，經(jīng)貴州中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院陳德媛教授鑒定為蠟梅科蠟梅屬植物山蠟梅（C. nitens Oliv.）的根。

東莨菪苷對(duì)照品（批號(hào)：D-062-180229，純度：≥98%）、秦皮苷對(duì)照品（批號(hào)：Q-033-181015，純度：≥98%）均購(gòu)自成都瑞芬思生物科技有限公司;異嗪皮啶對(duì)照品（批號(hào)：110837-201608，純度：≥98%）、東莨菪內(nèi)酯對(duì)照品（批號(hào)：110768-200504，純度：≥98%）均由中國(guó)食品藥品檢定研究院提供;以0.9%氯化鈉溶液作生理鹽水用;乙腈為色譜純，甲醇為分析純，水為純凈水。

1.3 動(dòng)物

初成年未交配的SPF級(jí)昆明種小鼠，雌雄各半，體質(zhì)量（20±2）g，購(gòu)自遼寧長(zhǎng)生生物技術(shù)股份有限公司，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK （遼）2015-0001。明暗周期為 12 h;所有小鼠均自由飲水和進(jìn)食，適應(yīng)性飼養(yǎng)觀察 1 周后開始試驗(yàn)。

2 方法與結(jié)果

2.1 鐵筷子不同炮制品中4個(gè)主成分的含量測(cè)定

采用HPLC法測(cè)定。

2.1.1 色譜條件 色譜柱：Welch -C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）;流動(dòng)相：乙腈（A）-水（B），梯度洗脫（0～10 min，7%A→9%A;10～20 min，9%A→12%A;20～30 min，12A%→20%A;30～40 min，20%A→30%A;40～50 min，30%A→55%A;50～60 min，55%A→75%A;60～70 min，75%A→95%A）;流速：1 mL/min;柱溫：30 ℃;檢測(cè)波長(zhǎng)：214 nm;進(jìn)樣量：10 μL。

2.1.2 混合對(duì)照品溶液的配制 取東莨菪苷、秦皮苷、東莨菪內(nèi)酯、異嗪皮啶對(duì)照品各適量，精密稱定，加80%甲醇溶解，制得每1 mL含東莨菪苷0.185 6 mg、秦皮苷0.161 6 mg、東莨菪內(nèi)酯0.092 0 mg、異嗪皮啶0.062 4 mg的混合對(duì)照品溶液，備用。

2.1.3 供試品和空白對(duì)照溶液的配制 精密稱定“1.2”項(xiàng)下鐵筷子不同加工炮制品，粉碎。取上述粉末1 g，置于250 mL圓底燒瓶中，精密加入80%甲醇100 mL，稱定質(zhì)量，回流提取2 h，放冷，再次稱定質(zhì)量，用80%甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。以80%甲醇作為空白對(duì)照溶液。

2.1.4 系統(tǒng)適用性考察 精密吸取“2.1.2”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液、“2.1.3”項(xiàng)下供試品和空白對(duì)照溶液各10 μL，按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖，見圖1。結(jié)果，各待測(cè)成分的分離度均大于 1.5，理論板數(shù)以秦皮苷計(jì)不小于 40 000。

2.1.5 線性關(guān)系考察 分別取“2.1.2”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液2 mL，置于2、5、10、25、50、100、200 mL量瓶中，用80%甲醇稀釋至刻度，混勻。取上述溶液各適量，按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖，以進(jìn)樣量（x，μg）為橫坐標(biāo)、峰面積（y）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸。結(jié)果見表1。

2.1.6 精密度試驗(yàn) 取“2.1.2”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液適量，按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣測(cè)定6次，記錄峰面積。結(jié)果，東莨菪苷、秦皮苷、東莨菪內(nèi)酯、異嗪皮啶峰面積的RSD分別為0.84%、0.62%、0.52%、0.58%（n=6），表明儀器精密度良好。

2.1.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取“2.1.3”項(xiàng)下鐵筷子藥材陰干品供試品溶液，分別于室溫下放置0、2、4、8、12、24 h時(shí)按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。結(jié)果，東莨菪苷、秦皮苷、東莨菪內(nèi)酯、異嗪皮啶峰面積的RSD分別為1.39%、1.39%、0.54%、1.84%（n=6），表明供試品溶液在室溫下放置24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.1.8 重復(fù)性試驗(yàn) 取鐵筷子藥材陰干品粉末適量，按“2.1.3”項(xiàng)下方法平行制備6份供試品溶液，再按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積，并按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算含量。結(jié)果，東莨菪苷、秦皮苷、東莨菪內(nèi)酯、異嗪皮啶含量的RSD分別為0.59%、0.41%、1.37%、0.69%（n=6），表明本方法重復(fù)性良好。

2.1.9 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取已知含量鐵筷子藥材陰干品粉末0.5 g，共6份，加入與已知含量等量的東莨菪苷、秦皮苷、東莨菪內(nèi)酯、異嗪皮啶對(duì)照品，按“2.1.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積并計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見表2。

2.1.10 樣品含量測(cè)定 精密稱取“1.2”項(xiàng)下鐵筷子不同炮制品各適量，粉碎，按“2.1.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，記錄峰面積并按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算各樣品中4種成分的含量。每樣品平行操作3次。結(jié)果，與陰干品比較，烘干品、蒸制品、炒炭品中東莨菪苷、秦皮苷含量均下降，而東莨菪內(nèi)酯、異嗪皮啶含量均升高;炒炭品中4種成分含量的變化較明顯，詳見表3。

2.2 鐵筷子不同炮制品急性毒性實(shí)驗(yàn)

2.2.1 小鼠急性毒性預(yù)實(shí)驗(yàn) 根據(jù)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)》[23]進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，藥物劑量參考文獻(xiàn)方法[24-25]。取昆明小鼠130只，隨機(jī)分為空白組，陰干1、2、3組，烘干1、2、3組，蒸制1、2、3組，炒炭1、2、3組，每組 10 只，雌、雄各半。禁食不禁水12 h后，空白組小鼠灌胃生理鹽水0.4 mL/10 g;各給藥組小鼠單次灌胃相應(yīng)藥物，組間劑量比為 1 ∶ 0.5。給藥后，常規(guī)飼養(yǎng)，連續(xù)觀察 7 d，記錄各組小鼠死亡情況，結(jié)果見表4。由表4可見，陰干、烘干、蒸制組鐵筷子引起昆明小鼠100%死亡的劑量（Dm值）分別為6 000、6 000、2 353 mg/kg;當(dāng)給藥劑量>10 000 mg/kg時(shí)，炒炭組小鼠未出現(xiàn)死亡。

2.2.2 鐵筷子不同炮制品急性毒性實(shí)驗(yàn) 選取小鼠240只，隨機(jī)分為空白組、陰干1～7組、烘干1～7組、蒸制1～6組、炒炭1～3組，每組10只，雌雄各半。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)中陰干、烘干、蒸制組鐵筷子引起昆明小鼠100%死亡的劑量，參考文獻(xiàn)[24-25]及按改良寇氏法[26]設(shè)置藥物劑量，陰干組、烘干組、蒸制組組間劑量比值確定為1.0 ∶ 0.85;炒炭組在預(yù)實(shí)驗(yàn)中未出現(xiàn)死亡，故將該組組間劑量比值確定為1.0 ∶ 0.5。禁食不禁水12 h 后，空白組小鼠灌胃生理鹽水0.4 mL/10 g，陰干1～7組小鼠分別單次灌胃2 263、2 662、3 132、3 685、4 335、5 100、6 000 mg/kg，烘干1～7組小鼠分別單次灌胃 2 263、2 662、3 132、3 685、4 335、5 100、6 000 mg/kg，蒸制1～6組小鼠分別單次灌胃1 044、1 228、1 445、1 700、2 000、2 353 mg/kg，炒炭1～3組小鼠分別單次灌胃2 500、5 000、10 000 mg/kg。連續(xù)觀察14 d，記錄各組小鼠的死亡情況，結(jié)果見表5。根據(jù)14 d內(nèi)各組小鼠死亡率，按改良寇氏法[26]基本公式（公式①）計(jì)算半數(shù)致死量（LD50）;按公式②③計(jì)算小鼠LD50的95%置信區(qū)間（CI）。根據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）外源性化學(xué)物毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)鐵筷子不同加工炮制品相對(duì)毒性[23]。

式中，Xm表示最大劑量組劑量的對(duì)數(shù)，i表示相鄰兩組給藥高劑量與低劑量之比的對(duì)數(shù)，p表示各組小鼠的死亡率（用小數(shù)表示），∑p表示各組小鼠死亡率的總和，F(xiàn)L是LD50的95%CI，Sx50是LD50的標(biāo)準(zhǔn)誤，q表示每組小鼠的存活率，n表示每組小鼠數(shù)。

結(jié)果，鐵筷子陰干、烘干、蒸制、炒炭品的LD50分別為4 118.13、3 733.36、1 643.61、>10 000 mg/kg，與陰干品比較，烘干、蒸制處理后，鐵筷子的毒性略增加，但都屬于低毒;而炒炭后，鐵筷子為實(shí)際無毒，詳見表6。

3 討論

3.1 提取方法與色譜條件的選擇

本研究采用超聲、加熱回流進(jìn)行提取，并考察了不同體積分?jǐn)?shù)甲醇的提取效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，以80%甲醇加熱回流提取2 h時(shí)，4種待測(cè)成分的提取率均較高。本研究對(duì)不同流動(dòng)相（乙腈-水、乙腈-0.1%甲酸水溶液、乙腈-0.1%磷酸水溶液、甲醇-水）的分離效果進(jìn)行考察。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，采用乙腈-水進(jìn)行梯度洗脫時(shí)，各待測(cè)成分的分離度良好，峰形較佳。另外，將樣品進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，最終選擇214 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

3.2 鐵筷子經(jīng)不同方法炮制后4種成分含量的變化

鐵筷子陰干、烘干、蒸制、炒炭品中東莨菪苷、秦皮苷、東莨菪內(nèi)酯、異嗪皮啶含量有所不同。與陰干品比較，烘干、蒸制、炒炭品中東莨菪苷、秦皮苷含量均有不同程度下降，東莨菪內(nèi)酯、異嗪皮啶含量均有所升高。其中，以炒炭法含量變化最為明顯，東莨菪苷下降96.75%，秦皮苷下降97.64%，東莨菪內(nèi)酯增加277.17%，異嗪皮啶增加126.32%。研究顯示，單糖苷的熱穩(wěn)定性差，經(jīng)過加工炮制（如烘干、蒸制、炒炭等）后單糖苷苷鍵會(huì)發(fā)生斷裂，苷含量會(huì)降低 [27]。東莨菪苷、秦皮苷系單糖苷，加工炮制后，含量降低。東莨菪內(nèi)酯是東莨菪苷的苷元，經(jīng)加工炮制后苷鍵斷裂，苷元增加;而異嗪皮啶含量增加，可能是由于秦皮苷發(fā)生苷鍵斷裂后接上了甲基有關(guān)。

3.3 炮制對(duì)鐵筷子急性毒性的影響

根據(jù)WHO外源性化學(xué)物毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，鐵筷子陰干品、烘干品、蒸制品屬于低毒，而炒炭品屬于實(shí)際無毒。有文獻(xiàn)報(bào)道，東莨菪苷對(duì)神經(jīng)細(xì)胞具有一定毒性，且隨著劑量增加而增強(qiáng)[17];秦皮苷可致鎮(zhèn)靜、驚厥、昏迷，甚至呼吸麻痹而死[19]。炒炭后鐵筷子毒性降低或與糖苷類的含量有一定關(guān)聯(lián)，但具體原因有待進(jìn)一步研究。

綜上所述，本研究建立的HPLC法重復(fù)性、精密度較好，可用于測(cè)定鐵筷子不同炮制品中4種成分的含量;與陰干品比較，經(jīng)烘干、蒸制、炒炭后，鐵筷子中4種成分含量有所變化，2個(gè)糖苷類毒性成分含量明顯下降;炒炭品無毒。

參考文獻(xiàn)

[ 1 ] 鐘琛聰，馮育林.高效液相色譜指紋圖譜結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)方法評(píng)價(jià)苗藥鐵筷子的質(zhì)量[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2017，52（21）：1944-1947.

[ 2 ] 國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì).中華本草苗藥卷[M]. 貴陽：貴州科技出版社，2006：457-458.

[ 3 ] 貴州省藥品監(jiān)督管理局.貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[M].貴陽：貴州科技出版社，2003：236.

[ 4 ] 唐秀勝，靳鳳云，章譽(yù)，等. HPLC法測(cè)定貴州苗藥鐵筷子中東莨菪內(nèi)酯的含量[J].貴陽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2015，37（6）：24-27.

[ 5 ] 張晶，溫泉，徐旭，等.基于UHPLC-QTOF-MS/MS技術(shù)的鐵筷子中3個(gè)香豆素在大鼠體內(nèi)代謝研究[J].中國(guó)中藥雜志，2018，43（21）：4330-4338.

[ 6 ] 周夢(mèng)穎，鐘琛聰.鐵筷子化學(xué)成分及藥理研究進(jìn)展[J].食品保健，2018，5（2）：288-289.

[ 7 ] 李夢(mèng)，錢海兵.鐵筷子醇提物對(duì)佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠HIF-1α、VEGF和MMP-3表達(dá)的影響[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2016，32（9）：1326-327.

[ 8 ] HUANG WP，WEN ZQ ，WANG MM，et al. Anticomplement and antitussive activities of major compound extracted from Chimonanthus nitens Oliv. leaf[J]. Biomedical Chromatography，2020，34（2）：1-12.

[ 9 ] SUN Q，ZHU JJ，CAO FW，et al. Anti-inflammatory properties of extracts from Chimonanthus nitens Oliv. leaf[J]. PLoS One，2017. DOI：10.1371/journal.pone.0181094.

[10] 李雪斐，魯尚德，陳銘，等.苗藥鐵筷子醇提物對(duì)心肌缺血性大鼠模型病理改變，血脂及TNF-α、IL-6和IL-18的影響[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥，2019，28（22）：22-27.

[11] 馬冬妮，李蕓，楊秀娟，等.肉蓯蓉產(chǎn)地采收加工及炮制方法的研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥房，2019，30（6）：124-126.

[12] 王亞琦，葛秀允.板藍(lán)根飲片產(chǎn)地加工炮制技術(shù)研究[J]. 中國(guó)藥房，2018，29（5）：656-658.

[13] 龍全江.論中藥材采收與產(chǎn)地加工技術(shù)的研究與教育[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2011，18（11）：3-4.

[14] 王錦鴻，陳仁壽.臨床實(shí)用中藥辭典[M].北京：金盾出版社，2005：633.

[15] 田華詠.中國(guó)民族藥炮制集成[J].北京：中醫(yī)古籍出版社，2000：368.

[16] 王明麗.貴州山蠟梅化學(xué)成分研究[D].貴陽：貴陽醫(yī)學(xué)院，2010.

[17] 李娟.東莨菪苷在制備抑制神經(jīng)炎癥藥物中的應(yīng)用：中國(guó)，CN108186657A[P]. 2018-6-22.

[18] 李在留，李鳳蘭，鄭永唐，等.文冠果種皮中的香豆素類化合物及抗HIV-1活性研究[J].北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，29 （5）：73-83.

[19] 方蓮花，呂揚(yáng)，杜冠華.秦皮的藥理作用研究進(jìn)展[J].中國(guó)中藥雜志，2008，33（23）：272-276.

[20] 褚子璇，盧敏，熊山.東莨菪內(nèi)酯的藥理活性及藥代動(dòng)力學(xué)研究進(jìn)展[J].化學(xué)研究，2019，30（4）：434-440.

[21] TAN T，LOU Y，ZHONG CC，et al. Comprehensive profiling and characterization ?of coumarins fromroots，stems，leaves，branches，and seeds of Chimonanthus nitens Oliv. using ultra-performance liquid chromatography quadr uhplc-time-of-flight mass spectrometry combined with modified mass defect filter[J]. J Pharm Biomed Anal，2017.DOI：10.1016 /j.jpba.2017.04.016.

[22] 黃文平，溫芝琪，王萌萌，等.山臘梅葉中8種成分含量測(cè)定及主成分分析[J].中藥新藥與臨床藥理，2018，29（6）：799-803.

[23] 國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委.食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)[S]. 2014-12-24.

[24] 周勇，溫佳穎，林琪勝，等.千里光超微粉的急性毒性及其鎮(zhèn)痛機(jī)制研究[J].中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，2019，38（4）：46-49.

[25] 李亭，黃詩淇.急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)方法研究進(jìn)展[J].吉林化工學(xué)院學(xué)報(bào)，2019，36（1）：11-14.

[26] 黃小秋，楊其波，黃小玉，等.四數(shù)九里香不同提取液的急性毒性試驗(yàn)研究[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥，2017，26（21）：33-35.

[27] 岳超，高杰，石上梅，等. HPLC測(cè)定地黃炮制前后3種苷類物質(zhì)的含量[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2015，21（4）：71-74.

（收稿日期：2019-12-19 修回日期：2020-04-22）

（編輯：段思怡）