菊芋全粉對(duì)高溫脅迫下仿刺參免疫及消化功能的影響

朱曉振，孟現(xiàn)堯，賈晨晨，于殿江，張美超，衣悅濤

（1.中國(guó)科學(xué)院煙臺(tái)海岸帶研究所，山東煙臺(tái) 264003；2.中國(guó)科學(xué)院大學(xué)，北京 100049；3.煙臺(tái)大學(xué)海洋學(xué)院，山東煙臺(tái) 264005）

仿刺參（Apostichopus japonicas）屬于棘皮動(dòng)物門（Echinodermata），海參綱（Holothurooidea），是我國(guó)北方水產(chǎn)養(yǎng)殖中的重要經(jīng)濟(jì)物種之一 （李成林等，2010）。仿刺參具有豐富的營(yíng)養(yǎng)組成，同時(shí)也具有很高的藥用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，自古以來(lái)就享有“海八珍”的美稱。但近年來(lái)受氣候變化影響，夏季持續(xù)高溫和降雨，對(duì)刺參池塘養(yǎng)殖造成嚴(yán)重影響。高溫導(dǎo)致水體溶解氧降低，影響仿刺參生理行為及代謝，同時(shí)會(huì)導(dǎo)致厭氧細(xì)菌大量繁殖并對(duì)有機(jī)物進(jìn)行厭氧分解，產(chǎn)生大量氨氮、硫化氫、亞硝酸鹽等有害物質(zhì)，損傷仿刺參的非特異性免疫系統(tǒng)，增加對(duì)病原菌的易感性（霍達(dá)等，2017；徐松濤等，2017）。另外，持續(xù)性的高溫會(huì)導(dǎo)致刺參出現(xiàn)消化道萎縮，消化功能減弱，體重減輕的現(xiàn)象。當(dāng)環(huán)境溫度發(fā)生變化時(shí)，仿刺參腸道中的消化酶活性也會(huì)發(fā)生相應(yīng)的改變，在適宜的溫度范圍內(nèi)，適當(dāng)?shù)臏囟壬邥?huì)提高仿刺參腸道內(nèi)消化酶的活力，對(duì)消化能力起到促進(jìn)的作用，但一旦突破了臨界溫度，消化酶活性就會(huì)受到抑制甚至失活，進(jìn)而對(duì)仿刺參的消化能力與生長(zhǎng)產(chǎn)生影響，嚴(yán)重時(shí)會(huì)出現(xiàn)大面積死亡（楊秀生等，2009）。

益生元是一種不可被消化的食物組成部分，一些功能性低聚糖類、多糖類、天然植物提取物、蛋白質(zhì)水解物、多元醇等均屬于益生元。益生元的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)為： 能選擇性地刺激腸道中有益菌群的生長(zhǎng)繁殖和激活其代謝功能；使腸道菌群向有利于寄主健康的方向轉(zhuǎn)化；刺激免疫，提高機(jī)體免疫力；改善腸道內(nèi)環(huán)境，還富有多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)生長(zhǎng)。益生元作為一種新型綠色功能性飼料添加劑逐漸成為了動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與研究的新方向，已有各種各樣的益生元作為飼料添加劑應(yīng)用于畜禽、水產(chǎn)的養(yǎng)殖生產(chǎn)中（鄧紫艷等，2015）。菊芋全粉作為一種富含益生元的植物多糖，其主要成分菊粉是一種水溶性果聚糖益生元，可調(diào)節(jié)動(dòng)物機(jī)體腸道微生物組成、改善腸胃功能、增強(qiáng)免疫功能，被廣泛應(yīng)用于食品和動(dòng)物飼料中（陳佳億等，2018）。本試驗(yàn)旨在探究菊芋全粉作為仿刺參飼料添加劑對(duì)高溫脅迫下仿刺參的消化能力及免疫力的影響，為生產(chǎn)實(shí)踐提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 試驗(yàn)用仿刺參選用山東東方海洋科技股份有限公司育苗車間1 齡以上的刺參。挑選質(zhì)量與活力較好的仿刺參，分別暫養(yǎng)于8 個(gè)容量為40 L 的養(yǎng)殖水箱中，每個(gè)水箱中隨機(jī)投放50 頭仿刺參。每日下午15 點(diǎn)定時(shí)投喂飼料，飽食投喂，投喂量一般為仿刺參體重的3%，投喂前及時(shí)清理殘餌及糞便，換水量為養(yǎng)殖水箱總水體的1/3。暫養(yǎng)1 周后用于試驗(yàn)。

1.2 試驗(yàn)分組 暫養(yǎng)結(jié)束后，選擇體格健壯、質(zhì)量較好的仿刺參320 頭，隨機(jī)分為8 組，飼喂基礎(chǔ)飼料一個(gè)月；一個(gè)月后設(shè)置4 個(gè)溫度梯度，分別為18、23、28、32 ℃，每個(gè)溫度下設(shè)置 2 組，其中基礎(chǔ)組投喂基礎(chǔ)飼料，試驗(yàn)組投喂添加15‰菊芋全粉的試驗(yàn)飼料（分組情況見表1），暫養(yǎng)7 d，能正常攝食后進(jìn)行分組試驗(yàn)，試驗(yàn)開始時(shí)稱重一次并記錄。

表1 仿刺參分組情況

1.3 高溫脅迫試驗(yàn) 基礎(chǔ)溫度為18 ℃，升溫幅度為1 ℃（24 h），達(dá)到試驗(yàn)溫度后進(jìn)行恒溫飼養(yǎng)，當(dāng)所有試驗(yàn)組都到達(dá)預(yù)定溫度后，再按照其當(dāng)前溫度恒溫飼養(yǎng)兩周，在高溫脅迫下將基礎(chǔ)飼料和添加菊芋全粉的飼料喂養(yǎng)的仿刺參進(jìn)行對(duì)比研究，觀察仿刺參生長(zhǎng)狀態(tài)，記錄成活率，高溫脅迫結(jié)束后，取仿刺參體腔液和腸道樣品，測(cè)定仿刺參體腔液中的各種免疫酶活性和消化酶活性。

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.4.1 成活率測(cè)定 分別對(duì)不同試驗(yàn)組仿刺參每日的死亡情況進(jìn)行記錄，飼養(yǎng)階段結(jié)束后，計(jì)算不同試驗(yàn)組仿刺參的存活率（SR）。

SR/%=Ni/No×100%。

式中：Ni 是飼養(yǎng)結(jié)束后仿刺參數(shù)量，No 是飼養(yǎng)開始時(shí)仿刺參數(shù)量。

1.4.2 免疫因子活力測(cè)定 在兩周高溫脅迫試驗(yàn)結(jié)束后，分別從每組取出9 只健康仿刺參在冰盤上取體腔液樣品，于 4 ℃、3000×g 離心 10 min，取上清液保存在-80 ℃冰箱中備用，用作體腔液免疫指標(biāo)的測(cè)定。體腔液樣品中過氧化氫酶（CAT）、酸性磷酸酶（ACP）、堿性磷酸酶（AKP）、溶菌酶（LSZ）、一氧化氮合酶（NOS）活性均采用試劑盒（南京建成生物科技有限公司）測(cè)定。

1.4.3 消化酶活力的測(cè)定 在兩周高溫脅迫試驗(yàn)結(jié)束后，分別從每組取出9 只健康仿刺參在冰盤上取腸道樣品，并且除去仿刺參腸道上黏附的呼吸樹及其他不相干成分，用無(wú)菌濾紙去除多余水分，置于凍存管內(nèi)，-80 ℃下保存，用于消化酶的測(cè)定。測(cè)定前，將冷凍的腸道樣品取出解凍，準(zhǔn)確稱取待測(cè)腸道重量，加入9 倍體積生理鹽水，在4 ℃的冰水浴條件下進(jìn)行勻漿。勻漿結(jié)束后將樣品2500×g 離心10 min，然后取上清液放入凍存管待用。蛋白酶測(cè)定采用福林-酚法，淀粉酶測(cè)定采用碘-淀粉比色法，脂肪酶測(cè)定采用滴定法（樊英等，2017）。仿刺參腸道樣品蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性采用試劑盒（南京建成生物科技有限公司）測(cè)定。

1.5 數(shù)據(jù)處理與分析 數(shù)據(jù)用SPSS 16.0 軟件進(jìn)行單素方差分析 （One-way AN0VA），結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，當(dāng)P ＜0.05 時(shí)為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 菊芋全粉對(duì)高溫脅迫仿刺參成活率的影響由圖1 可知，在18 ℃及23 ℃的生長(zhǎng)環(huán)境下，菊芋全粉組相較于普通飼料組，在存活率方面表現(xiàn)的更優(yōu)。當(dāng)溫度達(dá)到28 ℃，菊芋全粉組仿刺參成活率 （88.75±1.25）%明顯高于普通飼料組 （85.25±2.75%，P ＜ 0.05）。這說明通過添加 15 g/kg 菊芋全粉能在一定程度上改善高溫脅迫下仿刺參的成活率。32 ℃時(shí)，菊芋全粉組成活率顯著下降，機(jī)理需要進(jìn)一步研究。

圖1 菊芋全粉對(duì)高溫脅迫下仿刺參成活率的影響

2.2 菊芋全粉對(duì)高溫脅迫下仿刺參免疫因子變化的影響

2.2.1 菊芋全粉對(duì)仿刺參體液中過氧化氫酶（CAT）活力的影響 由圖2 可知，在同一溫度下，普通飼料組和菊芋全粉組CAT 活力差異不顯著。隨著溫度升高，與18 ℃和23 ℃相比，在28 ℃和32 ℃刺激下，仿刺參 CAT 活力顯著升高（P ＜ 0.05），其中普通飼料組和菊芋全粉組沒有顯著性差異。

圖2 菊芋全粉對(duì)仿刺參體液中過氧化氫酶（CAT）活力的影響

2.2.2 菊芋全粉對(duì)仿刺參體液中酸性磷酸酶（ACP）活力的影響 由圖3 可知，在 18 ℃和 28 ℃溫度下，相較于普通飼料組 （2.74±0.26、0.18±0.19 U/100 mL），菊芋全粉組 （3.11±0.53、2.59±0.29 U/100 mL）的仿刺參ACP 活力明顯提高 （P ＜0.05），23 ℃和32 ℃干預(yù)下，普通飼料組和菊芋全粉組仿刺參的ACP 活力沒有顯著性差異。

2.2.3 菊芋全粉對(duì)仿刺參體液中堿性磷酸酶（AKP）活力的影響 由圖4 可知，在同一溫度下，菊芋全粉組和普通飼料組無(wú)顯著差異；28 ℃菊芋全粉組（8.86±0.20 U/100 mL）與 18 ℃和 23 ℃菊芋全粉組（7.82±0.24、8.39±0.47 U/100 mL）相比具有顯著性差異（P ＜0.05）。普通飼料組和菊芋全粉組的AKP 活力均呈現(xiàn)先增長(zhǎng)后下降的趨勢(shì)，但是各個(gè)試驗(yàn)組的差異并不顯著，其中28 ℃菊芋全粉組AKP 活力最高。

圖3 菊芋全粉對(duì)仿刺參體液中酸性磷酸酶（ACP）活力的影響

圖4 菊芋全粉對(duì)仿刺參體液中堿性磷酸酶（AKP）活力的影響

2.2.4 菊芋全粉對(duì)仿刺參體液中溶菌酶（LSZ）含量的影響 由圖5 可知，隨著脅迫溫度的升高，普通飼料組與菊芋全粉組的仿刺參體液中LSZ 含量都處于上升趨勢(shì)。而且28 ℃普通飼料組 （1.72±0.53 μg/mL）與菊芋全粉組（2.82±0.50 μg/mL） LSZ活力具有顯著性差異（P ＜ 0.05）。32 ℃干預(yù)下，與各組相比，菊芋全粉組LSZ 活力呈現(xiàn)最大值。

圖5 菊芋全粉對(duì)仿刺參體腔液中溶菌酶（LSZ）含量的影響

2.2.5 菊芋全粉對(duì)仿刺參體液中一氧化氮合酶（NOS） 活力的影響 由圖6 可知，在 18 ℃條件下，與普通飼料組相比，菊芋全粉組NOS 活力升高，說明在正常仿刺參養(yǎng)殖環(huán)境下，通過在飼料中添加菊芋全粉，可以改善NOS 活力。23 ℃普通飼料組NOS 活力顯著高于32 ℃普通飼料組；其次，在 18 ℃和 32 ℃條件下，菊芋全粉組（5.41±0.21、4.71±0.80 U/mL）NOS 活力明顯高于普通飼料組（4.90±0.79、3.79±0.67 U/mL）；而在 23 ℃條件下普通飼料組與菊芋全粉組差別很大。隨著溫度升高，普通飼料組NOS 活力呈現(xiàn)先增高后降低的趨勢(shì)，添加菊芋全粉組呈現(xiàn)先降低后升高趨勢(shì)。

圖6 菊芋全粉對(duì)仿刺參體腔液中一氧化氮合酶（NOS）活力的影響

2.3 菊芋全粉對(duì)高溫脅迫下仿刺參消化酶活力的影響

2.3.1 菊芋全粉對(duì)對(duì)高溫脅迫下仿刺參腸道蛋白酶活力的影響 由圖7 可知，隨著溫度的升高，普通飼料組和菊芋全粉組蛋白酶活力均升高，普通飼料組 （72.22±12.64 U/mL） 與菊 芋全 粉組（58.47±13.54 U/mL） 在 32 ℃時(shí)有顯著差異，并且蛋白酶活力明顯高于其他溫度組，其他溫度下添加菊芋全粉的飼料對(duì)蛋白酶活力沒有顯著影響。

圖7 菊芋全粉對(duì)高溫脅迫下仿刺參腸道蛋白酶活力的影響

2.3.2 菊芋全粉對(duì)高溫脅迫下仿刺參腸道脂肪酶活力的影響 由圖8 可知，隨著溫度升高，仿刺參腸道脂肪酶活力下降，在28 ℃時(shí)，菊芋全粉組（2.82±0.50 U/mL）脂肪酶活力顯著高于普通飼料組（1772±0.53 U/mL；P ＜ 0.05）。

圖8 菊芋全粉對(duì)高溫脅迫下仿刺參腸道脂肪酶活力的影響

2.3.3 菊芋全粉對(duì)高溫脅迫下仿刺參腸道淀粉酶活力的影響 由圖9 可知，在普通飼料組和菊芋全粉組中淀粉酶活力隨著溫度升高而降低，相比18 ℃，當(dāng)溫度升高至32 ℃時(shí)，與菊芋全粉組（0.20±0.08 U/mL） 相比，普通飼料組 （0.10±0.02 U/mL） 淀粉酶活力下降更顯著 （P ＜ 0.05）。在 18 ℃與 32 ℃時(shí)，普通飼料組 （0.37±0.05、0.10±0.02 U/mL） 與菊芋全粉組 （0.31±0.05、0.20±0.08 U/mL） 的淀粉酶活力在組內(nèi)存在顯著差異（P ＜ 0.05），其他試驗(yàn)組變化不顯著。在高溫脅迫下，通過在飼料中添加菊芋全粉，有減緩高溫脅迫下淀粉酶活力降低的作用。

圖9 菊芋全粉對(duì)高溫脅迫下仿刺參腸道淀粉酶活力的影響

3 討論

3.1 菊芋全粉對(duì)仿刺參成活率的影響 益生元在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中的作用越來(lái)越受到重視，研究表明益生元不僅可改善水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng)性能（Guerreiro 等，2015），還可有效降低患病率和死亡率。本研究表明，在18、23 ℃和28 ℃溫度下，菊芋全粉組成活率明顯高于普通飼料組，說明在高溫脅迫下通過添加菊芋全粉可以降低仿刺參死亡率，添加菊芋全粉在一定高溫范圍內(nèi)可以增強(qiáng)仿刺參在高溫脅迫下抵抗疾病和應(yīng)激的能力，促使其成活率提高。有研究發(fā)現(xiàn)，在雜交羅非魚養(yǎng)殖過程中，在飼料中添加不同比例的甘露寡糖和低聚果糖可以提高動(dòng)物成活率，增強(qiáng)非特異性免疫（何四旺等，2003）。溫度超過 32 ℃時(shí)，菊粉全粉組與普通飼料組成活率沒有差異，這時(shí)溫度已經(jīng)超過刺參的耐受溫度值，導(dǎo)致仿刺參死亡。仿刺參隨體重的增加對(duì)高溫的耐受逐漸下降，小于25 g/頭的稚參在28 ℃仍可正?；顒?dòng)，而體重在160 g/頭左右的仿刺參在 22 ℃左右會(huì)進(jìn)入夏眠狀態(tài)。此時(shí)仿刺參停止攝食，代謝水平較低，當(dāng)水溫超過夏眠承受溫度時(shí)，仿刺參會(huì)出現(xiàn)吐腸、化皮等應(yīng)激反應(yīng)；當(dāng)水溫升至 31 ℃以上時(shí)，會(huì)化皮死亡 （賀加貝等，2019）。

3.2 菊芋全粉對(duì)仿刺參免疫因子變化的影響溫度是影響仿刺參生長(zhǎng)和發(fā)育的重要因素，夏季高溫，養(yǎng)殖水體中硫化物及氨氮含量超標(biāo)，影響仿刺參存活，破壞仿刺參機(jī)體非特異性免疫防御系統(tǒng)，降低免疫力，導(dǎo)致對(duì)病原菌的易感性增加（徐松濤等，2017；臧元奇等，2012）。益生元作為功能性成分，目前已有較多研究表明其可改善水產(chǎn)動(dòng)物腸道健康，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，高溫脅迫環(huán)境中體內(nèi)產(chǎn)生的大量活性氧會(huì)造成機(jī)體氧化損傷和免疫機(jī)能破壞，此時(shí)機(jī)體抗氧化防御酶系統(tǒng)（如 CAT等）啟動(dòng)免疫應(yīng)答。研究發(fā)現(xiàn)，在溫度由16 ℃上升至 26 ℃時(shí)，仿刺參機(jī)體的CAT 活力上升，持續(xù)26 ℃脅迫下又回落至較低水平（田相利等，2014；Ji 等，2008）。本研究中普通飼料組與菊芋全粉組CAT 活力都隨著溫度的升高而升高，在28 ℃高溫脅迫下，菊芋全粉組 （16.15±0.96 U/mL） CAT 活力高于普通飼料組 （15.81±0.53 U/mL），但沒有顯著性差異。ACP 和AKP 是兩種重要水解酶，可催化各種含磷化合物的水解過程。ACP 是巨噬細(xì)胞溶酶體的標(biāo)志酶，其活性反映吞噬細(xì)胞清除異物的能力（劉云等，2008）。在 18 ℃和 28 ℃溫度下，菊芋全粉組 （3.11±0.53、2.59±0.29 U/100 mL） 的ACP 活力明顯提高。說明菊芋全粉在一定程度上可以緩解高溫脅迫下對(duì)仿刺參造成的機(jī)體免疫力下降。隨著脅迫溫度的升高和時(shí)間的延長(zhǎng)，普通飼料組和菊芋全粉組的 ACP 活力呈現(xiàn)降低趨勢(shì)，研究結(jié)果顯示菊芋全粉可抑制ACP 活力降低的程度，這與刺參在干露和夏眠等脅迫條件下酶活力變化基本一致 （田相利等，2014；Du 等，2013）。AKP 是一種對(duì)底物專一性要求較低的磷酸單脂水解酶，可以起到解毒的功能，有改善機(jī)體免疫力的作用（Zhang 等，2000）。本研究中，AKP 活力在普通飼料組和菊芋全粉組均呈現(xiàn)先升后降低的趨勢(shì)，在脅迫溫度達(dá)到28 ℃時(shí)，菊芋全粉組 （8.86±0.20 U/100 mL） AKP 活力顯著高于普通飼料組（8.62±0.37 U/100 mL），同時(shí)當(dāng)溫度高于 28 ℃時(shí)，菊芋全粉組可以減緩AKP 活力降低程度。說明在高溫脅迫下，通過在飼料中添加菊芋全粉可以使仿刺參保持較強(qiáng)的免疫防御能力。LSZ 是吞噬細(xì)胞殺菌的物質(zhì)基礎(chǔ)，是非特異性免疫的重要組成部分，擔(dān)負(fù)著機(jī)體防御的功能。研究發(fā)現(xiàn)隨著溫度升高，LSZ 活力會(huì)升高，溫度超過 32 ℃，動(dòng)物機(jī)體免疫系統(tǒng)受損，LSZ 活力也逐漸降低；同樣有研究發(fā)現(xiàn)在 32 ℃下處理 6～12 h 的仿刺參體腔液LSZ 活力顯著降低（Wang 等，2008）。在本研究中，隨著溫度升高，普通飼料組和菊芋全粉組LSZ 活力均升高，且在28℃高溫脅迫下，菊芋全粉組（2.82±0.50 μg/mL） LSZ 活力具有顯著性差異，說明在高溫刺激下，菊芋全粉可以增強(qiáng)刺參機(jī)體LSZ 活力，使得刺參在高溫脅迫能夠更有效地做出免疫調(diào)節(jié)反應(yīng)，保護(hù)機(jī)體免受損傷。NOS 可以催化底物中L -精氨酸，在動(dòng)物機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生NO，NO 可殺傷病毒、細(xì)菌，抑制感染，在免疫中起著重要的作用，NOS 活性影響NO 含量，從而體現(xiàn)免疫應(yīng)激反應(yīng)的情況（王廣軍等，2005）。隨著溫度升高，普通飼料組NOS 活力明顯下降，32 ℃時(shí)下降最明顯（3.79±0.67 U/mL）；相反，菊芋全粉的添加，降低了NOS 活力下降程度，在32 ℃高溫脅迫下，菊芋全粉組 （4.71±0.80 U/mL） NOS 活力顯著高于普通飼料組 （3.79±0.67 U/mL）。這說明，通過在飼料中添加菊芋全粉，使得仿刺參表現(xiàn)出對(duì)高溫脅迫的較強(qiáng)適應(yīng)性。通過在飼料中添加菊芋全粉，在高溫脅迫下，能一定程度上增強(qiáng)刺參免疫因子活力，使得仿刺參在高溫脅迫下具有更好的耐受能力。

3.3 菊芋全粉對(duì)仿刺參消化酶活性的影響 消化酶是機(jī)體多種酶中的一部分，仿刺參腸道消化酶種類很多，主要是蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等。仿刺參為低溫性變溫物種，環(huán)境溫度是影響酶活性的重要因素，在夏眠過程中，仿刺參體內(nèi)與代謝和免疫相關(guān)的酶活性會(huì)發(fā)生變化。消化酶（淀粉酶、脂肪酶）活性會(huì)下降，只有蛋白酶在此期間顯著升高（任慶印等，2013）。本研究中，隨著溫度升高，普通飼料組和菊芋全粉組蛋白酶活性均升高，淀粉酶活力和脂肪酶活力均下降。研究發(fā)現(xiàn)，仿刺參蛋白質(zhì)含量豐富，需要依賴高活性蛋白酶攝取食物中的蛋白質(zhì)，以合成自身蛋白，因此在刺參中蛋白酶活力最高（姜令緒等，2007）。在高溫脅迫下，32 ℃時(shí)普通飼料組 （72.22±12.64 U/mL） 蛋白酶活性顯著升高，通過在飼料中添加菊芋全粉（58.47±13.54 U/mL），為維持機(jī)體穩(wěn)定，高溫脅迫下降低了蛋白酶活性的升高趨勢(shì)。脂肪酶與淀粉酶同屬內(nèi)源性消化酶，在刺參消化酶中活力最低（姜令緒等，2007）。隨著溫度升高，普通飼料組和菊芋全粉組脂肪酶活性都降低，菊芋全粉對(duì)脂肪酶活力沒有顯著影響。消化酶活性與仿刺參的營(yíng)養(yǎng)吸收和生長(zhǎng)關(guān)聯(lián)密切，消化酶活性的降低，影響著仿刺參的生長(zhǎng)狀態(tài)與成活率。仿刺參腸道中淀粉酶也是主要的消化酶，在消化道不同部位的活性不同（袁成玉等，2007）。隨著脅迫溫度的升高，普通飼料組淀粉酶活性顯著降低，相反，菊芋全粉明顯降低了淀粉酶活性降低趨勢(shì)，說明在高溫脅迫下，添加菊芋全粉可維持仿刺參淀粉酶活性相對(duì)穩(wěn)定。研究表明，在飼料中添加益生元能夠增加腸道褶皺、腸上皮細(xì)胞以及微絨毛的高度，進(jìn)而改變胃腸道的吸收區(qū)（Dimitroglou 等，2010）。在高溫脅迫下，通過補(bǔ)充菊芋全粉，淀粉酶活力降低趨勢(shì)得到改善，使得動(dòng)物處于應(yīng)激狀態(tài)時(shí)表現(xiàn)得更為突出。

4 結(jié)論

與普通飼料相比，高溫脅迫下，在飼料中添加菊芋全粉，在28 ℃以下，可以顯著提高仿刺參成活率；高溫脅迫下仿刺參免疫因子ACP 和AKP在菊芋全粉的影響下，可以維持相對(duì)穩(wěn)定，隨著脅迫溫度的升高，菊芋全粉組LSZ 活力顯著升高；高溫脅迫下，菊芋全粉對(duì)蛋白酶和脂肪酶的影響不大，但是可以顯著降低高溫刺激下淀粉酶活力降低趨勢(shì)。本試驗(yàn)條件下，在飼料中添加15 g/kg菊芋全粉，在高溫脅迫下對(duì)于仿刺參成活率、免疫因子以及消化酶活性有一定改善作用。