薛瑞婷,李 棟
(呂梁學院,山西呂梁 033000)
單寧是一組多酚類化合物,可分為水解單寧和不水解單寧濃縮單寧。可水解的單寧以碳水化合物為中心的核心,其羥基被酯化為酚羧酸,如沒食子酸和六羥基二苯酸(石閃閃和何國慶,2012)。沒食子酸酯被稱為沒食子安寧素,單寧酸是一種五倍子鞣質(zhì),每分子葡萄糖中含有8~10個沒食子酸分子。濃縮單寧是黃烷-3-醇、黃烷-4-二醇或相關黃烷醇殘基的聚合物,通過碳-碳鍵連接,但濃縮單寧沒有碳水化合物核心(Marzo等,2002)。單寧酸廣泛分布于植物界,如大麥、高粱、油菜籽、小米和蠶豆的單寧含量特別豐富,主要以濃縮單寧的形式存在。許多抗營養(yǎng)的作用被認為是由于水解和濃縮單寧的緣故。以前的研究表明,單寧對動物生長性能的影響是通過使用從飼料中分離的單寧或與商業(yè)單寧類添加劑一起進行的(Marzo等,2002)。單寧酸對非反芻動物飼料的適口性、飼料效率、生長速度、營養(yǎng)物質(zhì)消化率及內(nèi)源性礦物質(zhì)和氨基酸損失增加的影響已由Jansman(1993)進行了廣泛的綜述。單寧在體外對致病菌具有抑菌和殺菌特性,包括大腸桿菌、沙門氏菌和梭菌。但關于單寧酸對體內(nèi)腸道菌群數(shù)量影響的研究尚不多見。因此,我們推測飼料中添加單寧酸可能會影響斷奶仔豬腸道菌群、血液生化指標和生長性能。
1.1 試驗分組與飼養(yǎng)管理 試驗選擇360頭(21±3)d斷奶的杜×長×大公豬,平均體重為(6.48±0.65)kg,隨機分為 5組,每組4個重復,每個重復18頭豬。對照組飼喂基礎日糧,處理組在基礎日糧中分別添加120、240、480和960 mg/kg單寧酸,試驗為期28 d。斷奶后仔豬在試驗1~14 d和15~28 d的飼料配方見表1。
1.2 樣品采集與分析 試驗期間每隔7 d對每個重復的仔豬進行稱重,并按周統(tǒng)計飼料用量。根據(jù)這些數(shù)據(jù),計算1~14 d、15~28 d和1~28 d仔豬的平均日增重、平均日采食量和飼料報酬。每個重復選擇2頭豬取新鮮糞便樣本(14和28 d),稱重后用含0.05%半胱氨酸的無菌PBS懸液浸泡,用于好氧微生物種群計數(shù)。對于厭氧微生物的計數(shù),糞便樣品在CO2流動下轉(zhuǎn)移,在厭氧條件下運輸?shù)綄嶒炇?。另外,在試驗最? d,每個重復選擇2頭仔豬糞便,用于分析微量元素含量(原子吸收光譜法)。采用頸靜脈穿刺法定期(7、14、21和28 d)從每個重復隨機抽取2頭豬的血液,其中一部分血液用于血液學指標分析(紅細胞、白細胞數(shù)量、血紅蛋白濃度、平均血紅蛋白濃度和血球容積)。另外一部分血液離心后分離血漿,用于測定血漿鐵含量(試劑盒法)。
1.3 統(tǒng)計分析 使用SAS軟件的一般線性模型程序,通過回歸分析比較日糧單寧酸濃度對各指標的影響。以重復為單位,對所有參數(shù)進行分析。P<0.05表示差異顯著,0.05<P<0.10表示有差異顯著趨勢。
表1 試驗基礎日糧原料及營養(yǎng)水平
2.1 單寧酸對1~28 d斷奶仔豬生長性能的影響 由表2可知,日糧的鐵含量從190 mg/kg~205 mg/kg不等。在試驗第0~14天內(nèi),日糧中單寧酸濃度從0~480 mg/kg增加,導致斷奶仔豬平均日增重和平均日采食量呈顯著線性降低(P<0.05),而單寧酸濃度從0升高至240 mg/kg時,斷奶仔豬飼料報酬表現(xiàn)為顯著線性降低(P<0.05)。日糧單寧酸濃度對15~28 d斷奶仔豬的生長性能無顯著影響(P>0.05)。在整個試驗期間(1~28 d),隨著日糧單寧酸添加水平的升高,日增重和飼料報酬表現(xiàn)為顯著線性降低(P<0.05),而平均日采食有顯著降低的趨勢(P=0.09)。
表2 單寧酸對斷奶仔豬生長性能的影響
2.2 單寧酸對1~28 d斷奶仔豬糞中微量元素及血漿鐵水平的影響 日糧單寧酸添加水平對斷奶仔豬14和28 d糞中總厭氧菌、雙歧桿菌、乳酸菌和梭狀芽胞桿菌數(shù)量無顯著影響(P>0.05)。但隨著日糧單寧酸添加水平的升高,大腸桿菌數(shù)量表現(xiàn)為顯著線性降低(P<0.05,數(shù)據(jù)未列出)。由表3可知,隨著日糧單寧酸添加水平的升高,糞中錳、銅和鋅的含量無顯著差異(P>0.05),但糞中鐵含量隨日糧單寧酸添加水平的升高表現(xiàn)為顯著線性升高(P<0.05)。在第7、14和28天,斷奶仔豬血漿鐵濃度與日糧相當,但第21天,日糧補充單寧酸后血漿鐵濃度顯著降低(P<0.05),同時在14 d時,單寧酸組血漿鐵濃度有降低趨勢(P=0.09)。
表3 單寧酸對斷奶仔豬糞中微量元素及血漿鐵含量的影響
2.3 單寧酸對1~28 d斷奶仔豬血液學狀態(tài)的影響 由表4可知,在試驗的第7和14天,日糧處理對血液學指標(如紅細胞和白細胞計數(shù)、血紅蛋白濃度、平均血紅蛋白濃度及血球容積)無顯著影響(P>0.05)。隨著日糧單寧酸添加水平的升高,21和28 d血漿血紅蛋白和血球容積表現(xiàn)為顯著線性降低(P<0.05)。
本研究中使用的微量礦物預混料是在不含任何鐵元素的情況下制備的。盡管如此,所分析的日糧中鐵濃度為190~205 mg/kg,這是因為大多數(shù)飼料成分(包括磷酸氫鈣和石粉)含鐵量較高。日糧添加單寧酸使日增重分別降低2%、21%、28%和25%,與對照組相比,其采食量減少0.4%、9%、16%和15%。眾所周知,單寧酸有一種苦味或澀味,會降低適口性,從而降低飼料采食量。Monteleone等(2004)在人身上研究了單寧酸的澀味強度評級,報告稱,單寧酸濃度從0.32 g/L增加到1.63 g/L,感知到的澀味強度急劇增加。本研究結(jié)果表明,單寧酸可能只降低斷奶后前期(1~14 d)仔豬的適口性,而在15~28 d豬可能適應了日糧中的單寧酸的存在。
斷奶時仔豬受到各種應激,這也是導致腸道微生物波動的原因。Akiyama等(2001)發(fā)現(xiàn),從綠茶中提取的單寧酸可以有效減少有害細菌數(shù)量,增加豬乳酸菌數(shù)量。單寧酸與鐵的結(jié)合使鐵無法被吸收,這解釋了單寧酸日糧組豬糞便中鐵排泄量升高的原因。但由于添加了單寧酸,豬日糧中錳、銅鋅含量影響不受顯著。試驗結(jié)束時,日糧中添加單寧酸對糞大腸菌群沒有顯著影響,目前這種作用的原因尚不清楚,但這可能是由于微生物在胃腸道中降解了單寧酸。
表4 單寧酸對斷奶仔豬血液生化指標的影響
各項血液學指標均在正常范圍內(nèi)。直到第14天,在豬飼料中添加單寧酸對血液指標和血漿鐵值無顯著影響。血紅蛋白濃度在8.0 g/dL時被認為是邊緣性貧血,而7.0 g/dL或更低是貧血的指標。試驗第7天血紅蛋白水平為13.6 g/dL,而第21天,飼喂960 mg/kg單寧酸組豬的血紅蛋白水平低于邊緣性貧血的閾值水平,這與Afsana等(2004)的研究結(jié)果一致。補充單寧酸組的豬血液指標和血漿鐵含量較低,可能與單寧酸與鐵的相互作用有關。單寧酸含有8個沒食子酸分子,而每個沒食子酸分子有1個沒食子醇基,這些基團與鐵具有高親和力,從而阻止鐵從腸道吸收(Torrallardona等,2003)。
日糧中添加單寧酸對豬生產(chǎn)性能、血液學指標和血漿鐵狀態(tài)有一定的負面影響。此外,單寧酸僅在第14天對大腸桿菌有抗菌活性,但在第28天時無抗菌作用,很可能是由于單寧酸被降解。