口腔厭氧菌牙髓感染患者血清免疫球蛋白和炎癥介質(zhì)檢測(cè)的臨床意義

封黎明，趙西珍

(1.三門(mén)峽市中醫(yī)院 口腔科，河南 三門(mén)峽472000;2.三門(mén)峽市中心醫(yī)院 口腔科，河南 三門(mén)峽472000)

牙髓感染是牙髓病的主要類(lèi)型，表現(xiàn)為比較劇烈的牙痛，多是由齲齒等原因?qū)е卵辣举|(zhì)缺損，致病菌進(jìn)入髓腔引起感染的發(fā)生，厭氧菌是主要的致病菌。研究發(fā)現(xiàn)，機(jī)體的免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)與病原菌感染后的進(jìn)展過(guò)程密切相關(guān)[1,2]，體液免疫中的免疫球蛋白如IgA、IgM及IgG水平能夠反映機(jī)體的免疫功能。炎癥介質(zhì)是導(dǎo)致炎癥反應(yīng)發(fā)生的直接因素，機(jī)體發(fā)生感染時(shí)機(jī)體釋放和分泌大量的促炎因子，引起炎癥反應(yīng)的發(fā)生[3]，并且參與機(jī)體的防御及組織損傷過(guò)程。牙髓感染往往反復(fù)發(fā)作，在牙髓感染的發(fā)生及進(jìn)展過(guò)程中機(jī)體的免疫功能、炎癥反應(yīng)與感染的發(fā)生及進(jìn)展密切相關(guān)。為進(jìn)一步探討免疫功能、炎癥反應(yīng)在牙髓厭氧菌感染中的作用，本文針對(duì)免疫球蛋白和炎癥介質(zhì)的表達(dá)情況進(jìn)行研究，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2014年1月-2016年6月三門(mén)峽市中醫(yī)院口腔科診治的56例口腔厭氧菌牙髓感染患者為觀察組，其中男性30例，女性26例，平均年齡(31.5±6.5)歲；分期：急性牙髓炎36例，慢性牙髓炎20例；感染病原菌種類(lèi)：產(chǎn)黑色素普雷沃菌者25例，脆弱擬桿菌者18例，其他病原菌者13例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡18歲及以上；②口腔厭氧菌導(dǎo)致的牙髓感染者，均經(jīng)菌培養(yǎng)明確致病菌；③對(duì)本研究知情及簽署同意書(shū)者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①近期進(jìn)行抗感染治療者、應(yīng)用免疫抑制劑者或糖皮質(zhì)激素；②合并免疫系統(tǒng)疾病或結(jié)締組織病；③合并糖尿病等代謝性疾病；④合并惡性腫瘤或重要臟器嚴(yán)重功能障礙；⑤精神異常、不能配合診斷治療者。選取同時(shí)期的56名體檢健康人員為對(duì)照組，其中男性31例，女性25例，平均年齡(31.7±6.2)歲。兩組對(duì)象性別、年齡等資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。研究?jī)?nèi)容經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，符合醫(yī)學(xué)倫理學(xué)要求。

1.2 檢測(cè)方法

1.2.1標(biāo)本采集

清晨采集空腹靜脈血，低溫離心，離心速率為3 000 r/min，離心時(shí)間5 min，分離血清，深低溫保存，分批檢測(cè)。

1.2.2免疫球蛋白檢測(cè)

免疫球蛋白IgA、IgM及IgG采用透射免疫比濁法，檢測(cè)儀器為AU640型全自動(dòng)生化分析儀(奧林巴斯公司)，由本院檢驗(yàn)科完成檢測(cè)。

1.2.3炎癥介質(zhì)的檢測(cè)

血清炎性介質(zhì)為IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、抗炎介質(zhì)為IL-2、IL-4、IL-10,檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附法，檢測(cè)試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所，檢測(cè)儀器為4700型酶標(biāo)儀(塞默飛世爾公司)，多孔板室溫平衡，標(biāo)本解融，多孔板設(shè)定空白對(duì)照孔、標(biāo)準(zhǔn)品孔及樣品孔，標(biāo)準(zhǔn)品及樣品梯度稀釋，各孔1抗包被后依次滴加稀釋液、標(biāo)準(zhǔn)品及樣品，充分溫育后滴加山羊血清，溫育后滴加生物素標(biāo)記二抗，充分反應(yīng)后加入終止液終止反應(yīng)，顯色，酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品濃度。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)檢驗(yàn)軟件方面采用SPSS19.0，其中計(jì)量資料的表示方式為均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差，采用t檢驗(yàn)分析，計(jì)數(shù)資料的表示方式為率，采用卡方檢驗(yàn)分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者的血清免疫球蛋白水平比較

觀察組患者的血清免疫球蛋白指標(biāo)IgA、IgM、IgG水平均低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，觀察組中不同分期牙髓感染患者的血清免疫球蛋白水平檢測(cè)結(jié)果也存在顯著性差異(P<0.05)，見(jiàn)表1。

2.2 兩組患者血清炎癥介質(zhì)水平比較

觀察組患者血清促炎指標(biāo)IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平高于對(duì)照組，抗炎指標(biāo)IL-2水平低于對(duì)照組，其他抗炎指標(biāo)IL-4、IL-10水平高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；不同分期牙髓感染患者血清炎癥介質(zhì)水平檢測(cè)結(jié)果也存在顯著性差異(P<0.05)，見(jiàn)表2。

2.3 觀察組不同感染病原菌者的血清免疫球蛋白水平比較

觀察組中不同病原菌感染者的血清免疫球蛋白指標(biāo)IgA、IgM、IgG水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，表3。

表1 兩組患者的血清免疫球蛋白比較

注：a與對(duì)照組比較，P<0.05；b與急性牙髓炎比較，P<0.05。

表2 兩組患者的血清炎癥介質(zhì)水平比較

注：a與對(duì)照組比較，P<0.05；b與急性牙髓炎比較，P<0.05。

表3 觀察組不同感染病原菌者的血清免疫球蛋白水平比較

2.4 觀察組不同感染病原菌者的血清炎癥介質(zhì)水平比較

觀察組不同感染病原菌者的血清促炎指標(biāo)IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平和抗炎指標(biāo)IL-2、IL-4、IL-10水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表4。

表4 觀察組不同感染病原菌者的血清炎癥介質(zhì)水平比較

3 討論

牙髓感染是最常見(jiàn)的牙髓疾病，包括急性和慢性牙髓炎，是致病菌感染髓腔組織引起的感染性疾病，牙髓組織位于牙齒內(nèi)部的牙髓腔中，被堅(jiān)硬的牙本質(zhì)和牙釉質(zhì)所包圍，正常情況下不會(huì)受到病源菌的侵襲，但當(dāng)牙本質(zhì)受到損害并累及髓腔或反復(fù)發(fā)生牙周感染導(dǎo)致根尖發(fā)生病變時(shí)，牙髓的天然屏障的完整性受損，病原微生物伺機(jī)侵入感染牙髓，導(dǎo)致牙髓炎的發(fā)生，甚至反復(fù)感染、遷延不愈，導(dǎo)致致病菌的定植，發(fā)生慢性牙髓炎[4,5]。此外，牙髓炎的發(fā)生與機(jī)體的免疫能力密切相關(guān)，當(dāng)機(jī)體免疫能力下降時(shí)，能夠引起致病菌的入侵或者定植菌的大量繁殖，引起牙髓感染的急性發(fā)作。既往的研究也顯示[7-9]，當(dāng)口腔局部免疫屏障受損時(shí)，病原菌侵襲，能夠?qū)е卵浪韪腥镜陌l(fā)生，其中厭氧菌是主要的致病菌[10,11]。此外，在牙髓發(fā)生感染時(shí)，免疫應(yīng)答及炎癥反應(yīng)介導(dǎo)的炎癥介質(zhì)釋放，能夠?qū)е陆M織的損害和臨床癥狀的產(chǎn)生[12]。

在既往的研究中發(fā)現(xiàn)，在牙髓感染時(shí)能夠通過(guò)多種機(jī)制對(duì)牙周免疫功能產(chǎn)生影響，牙髓炎能夠引起牙周組織的炎癥反應(yīng)，上皮細(xì)胞分泌細(xì)胞因子P.gingivalis,P.gingivalis能夠誘白細(xì)胞介素-33等炎癥介質(zhì)的表達(dá)，促進(jìn)Th2相關(guān)炎性細(xì)胞因子的表達(dá)，抑制Th1細(xì)胞因子的表達(dá)，進(jìn)而引起局部免疫功能的抑制[13]、促進(jìn)炎癥反應(yīng)的加劇[14],不僅引起臨床癥狀的產(chǎn)生，也能夠?qū)е卵乐苘浗M織的損害及牙周骨質(zhì)的吸收，提示免疫功能的調(diào)節(jié)及炎性介質(zhì)的釋放在牙髓感染的發(fā)生及進(jìn)展過(guò)程中具有重要的作用。

免疫球蛋白在黏膜及上皮組織相關(guān)的免疫屏障作用中具有重要的作用，同時(shí)對(duì)免疫應(yīng)答具有調(diào)節(jié)作用[15-17]，外周血免疫球蛋白水平的變化，能夠反應(yīng)機(jī)體粘膜免疫功能及整體的免疫平衡狀態(tài)[18]。在對(duì)本組資料的分析發(fā)現(xiàn)，牙髓厭氧菌感染患者的血清IgA、IgM及IgG水平均明顯降低，而且在急性牙髓炎患者，IgA、IgM及IgG水平下降的更為明顯，提示在牙髓感染過(guò)程中，機(jī)體的免疫功能下降，其可能護(hù)為與因果關(guān)系，而在急性牙髓感染的患者，免疫功能受損的更為明顯[19]。同時(shí)患者的抗炎與促炎指標(biāo)也發(fā)生明顯變化，炎癥介質(zhì)IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的表示水平升高，而具有炎癥抑制作用的細(xì)胞因子IL-2、IL-4、IL-10的表達(dá)水平降低。病原菌侵入感染后，機(jī)體的局部免疫屏障發(fā)揮作用，處于激活狀態(tài)，因此免疫應(yīng)答失衡，表現(xiàn)為免疫球蛋白表達(dá)的失衡，同時(shí)感染導(dǎo)致的機(jī)體炎癥反應(yīng)穩(wěn)態(tài)失衡，體現(xiàn)為抗炎與促炎指標(biāo)表達(dá)的失衡，炎癥調(diào)節(jié)反應(yīng)的失衡進(jìn)一步作用于機(jī)體免疫，表現(xiàn)出免疫球蛋白的表達(dá)異常。而急性期患者，免疫調(diào)節(jié)與炎癥反應(yīng)的失衡狀態(tài)加重，至慢性期，失衡修復(fù)，故在急慢性牙髓炎中也表現(xiàn)出明顯的差異，說(shuō)明炎性介質(zhì)不僅參與牙髓感染的病理生理過(guò)程，且對(duì)急慢性感染的評(píng)估也可能具有重要的臨床意義[20,21]。在對(duì)不同菌株感染的患者比較發(fā)現(xiàn)，不同菌株導(dǎo)致的牙髓感染患者免疫球蛋白水平及炎性介質(zhì)水平無(wú)明顯差異，提示在厭氧菌導(dǎo)致的牙髓感染患者，免疫功能及炎性介質(zhì)水平的變化是厭氧菌感染時(shí)發(fā)生的普遍現(xiàn)象。

綜上所述，厭氧菌牙髓感染時(shí)患者免疫球蛋白及炎性介質(zhì)水平發(fā)生明顯變化，并且在不同的感染時(shí)期表現(xiàn)出明顯的差異，提示免疫功能調(diào)節(jié)及炎性介質(zhì)的釋放參與牙髓厭氧菌感染的發(fā)生及進(jìn)展過(guò)程，對(duì)其進(jìn)行監(jiān)測(cè)也有助于牙髓急、慢性感染的評(píng)估，具有重要的臨床價(jià)值。