變形蟲對鹽生杜氏藻生長的控制研究

唐淑萍，祁世英，杜建軍

(內蒙古蘭太實業(yè)股份有限公司，內蒙古 阿拉善 750333)

鹽湖生物是大鹽湖產業(yè)的重要組成部分，鹽生杜氏藻(簡稱鹽藻)在鹽湖生物中占有重要地位。近幾十年來，國內外工業(yè)化生產的鹽藻生物技術產業(yè)發(fā)展速度之快、產品之多在微藻產業(yè)領域異軍突起，令世人注目。鹽藻大規(guī)模工業(yè)化生產蘊藏著巨大的經濟潛力，開發(fā)鹽藻資源不僅有利于開發(fā)新型營養(yǎng)源、緩解能源危機，而且有助于促進傳統(tǒng)農業(yè)向現(xiàn)代化農業(yè)的轉化。內蒙古自治區(qū)荒漠、鹽堿地區(qū)(湖泊)眾多，如能在大力發(fā)展鹽湖生物產業(yè)中因地制宜地有效利用自然及廢棄資源發(fā)展鹽藻產業(yè)，并開展進一步深加工，如有效成分蛋白質、多種天然類胡蘿卜素、鹽藻多糖、維生素、氨基酸、色素、不飽和脂肪酸等的提取和應用，其前景是廣闊的。但在大規(guī)模養(yǎng)殖中，常常伴有變形蟲的出現(xiàn)，大變形蟲(Amoeba proteus)變形蟲，真核生物，又音譯為“阿米巴”。屬于肉足亞門裸變亞綱變形目。裸露，常為單核(有些種類多核)，有線粒體，無鞭毛期，核分裂為核內有絲分裂，常為無性生殖。細胞膜纖薄，由于原生質層的流動，使身體表面生出無定形的指狀、葉狀或針狀的突起，稱為“偽足”，身體即借此而移動。身體的形狀輪廓也會隨偽足的伸縮而形成變化。偽足間可自由包圍融合，借此包裹食物進行消化。主要生活在清水池塘，或在水流緩慢藻類較多的淺水中進行吞噬藻細胞。文章探討了變形蟲對鹽生杜氏藻大規(guī)模養(yǎng)殖生長的影響。

1 材料和方法

1.1 材料

藻種，內蒙古微藻良種培育中心；培養(yǎng)液，來自鹵水(25 °Be′)與淡水配制的培養(yǎng)液；培養(yǎng)條件，智能光照，氣候培養(yǎng)箱培養(yǎng)，溫度26 ℃，光照,二級(5 680 lx)。

培養(yǎng)液組成見表1。

表1 培養(yǎng)液組成Tab.1 Composition of culture medium

1.2 方法

1.2.1 變形蟲對鹽藻細胞密度的影響

實驗設6組,每組均為3個平行樣。統(tǒng)一用250 mL錐形瓶,每瓶培養(yǎng)藻液150 mL，接種藻液密度43萬個/mL，鹽度12°Be′，變形蟲平均密度3.0個/mL。實驗期每天早、午搖瓶兩次,隔2 d觀察計數,藻液密度及變形蟲密度從培養(yǎng)第3 d開始計數,培養(yǎng)周期12 d。實驗結果見表2。

表2 變形蟲對鹽藻細胞密度的影響數據分析Tab.2 Data analysis of the effect of amoeba on cell density of Dunaliella Salina 萬個·mL-1

1.2.2 變形蟲在不同鹽度對鹽藻密度的影響

藻種,藻液中藻種密度32.5萬個/mL，變形蟲的數量25個/mL;培養(yǎng)液,來自鹵水(25 °Be′)與淡水配制的不同鹽度的培養(yǎng)液；培養(yǎng)條件，露天養(yǎng)殖，實驗時間7 d。實驗結果見表3、表4。

表3 變形蟲在不同鹽度對鹽藻個數的影響Tab.3 The effect of amoeba on the number of Dunaliella Salinain different salinity 萬個·mL-1

表4 變形蟲在不同鹽度中存活的個數情況Tab.4 The number of amoeba surviving in different salinity 萬個·mL-1

1.2.3 變形蟲對鹽藻在不同培養(yǎng)模式下生長的影響

培養(yǎng)液：23#、18#均為1 500 m2養(yǎng)殖池，藻液均來自44#養(yǎng)殖池，變形蟲個數25個/mL;19#、24#均為1 500 m2養(yǎng)殖池，藻液均來自38#養(yǎng)殖池，變形蟲個數30個/mL。

培養(yǎng)方式： 18#、23#為半連續(xù)培養(yǎng)，19#、24#為連續(xù)培養(yǎng)。

培養(yǎng)條件：露天養(yǎng)殖、培養(yǎng)時間7 d。

實驗結果見表5、圖1。

表5 變形蟲對鹽藻在不同培養(yǎng)方式下影響Tab.5 Effect of amoeba on Dunalliella Salina in different culture ways 個·mL-1

圖1 實驗結果示意圖Fig.1 Schematic diagram of test results

2 結果

在大規(guī)模鹽藻養(yǎng)殖過程中，隨著室外溫度的增高變形蟲生長速度較快，大量吞噬著鹽藻的細胞，使鹽藻密度急劇下降，由43.0萬個/mL減少到11.4萬個/mL。影響了鹽藻的養(yǎng)殖。

通過調整藻液鹽度，將養(yǎng)殖鹽度提高5°Be′，致使變形蟲生存環(huán)境驟變、破碎，鹽藻密度增加。變形蟲由原來的45個/mL減少到6個/mL。

變形蟲對鹽藻生長過程中，連續(xù)培養(yǎng)較半連續(xù)培養(yǎng)變形蟲個數明顯減少。連續(xù)培養(yǎng)與半連續(xù)培養(yǎng)對比見圖2。

圖2 連續(xù)培養(yǎng)與半連續(xù)培養(yǎng)的對比圖Fig.2 Comparison of continuous culture and semi continuous culture

3 討論

目前，國內各有關單細胞藻類培養(yǎng)的企業(yè)，對敵害生物的殺滅治理方面，尚無有效的方法和措施，雖然個別采用半封閉式通氣培養(yǎng)方法，但仍然不能徹底解決敵害生物的污染和危害，也沒有做過相關課題研究。

在生物養(yǎng)殖行業(yè)，應用此方法在鹽藻養(yǎng)殖中對變形蟲進行控制，取得一定效果，在持續(xù)高溫養(yǎng)殖過程使變形蟲數量減少86.7%，確保鹽藻正常生長。