BECKMAN PK7300全自動(dòng)血型檢測(cè)系統(tǒng)可疑及錯(cuò)誤結(jié)果的原因分析

陳潔

[摘要] 目的 探討B(tài)ECKMAN PK7300 全自動(dòng)血型檢測(cè)分析系統(tǒng)可疑及錯(cuò)誤結(jié)果的原因。方法 回顧長(zhǎng)沙血液中心2018年6—9月的31 816例經(jīng)BECKMAN PK7300檢測(cè)的全血樣本的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，分析其一次性判斷成功率及失敗率和可疑結(jié)果的原因分析。結(jié)果 對(duì)于RHD血型一次性判讀正確率99.93%;ABO 血型一次性判讀成功率為99.04% ;失敗率為0.95%?？梢山Y(jié)果原因分析以標(biāo)本脂血為主要原因，其次還有凝血、有雜質(zhì)和加樣失敗、有氣泡等其他因素影響。結(jié)論 BCEKMAN PK700全自動(dòng)血型儀具有全自動(dòng)、高通量等優(yōu)點(diǎn)，檢測(cè)前的樣本質(zhì)量對(duì)檢測(cè)的結(jié)果影響尤為重要，做好檢測(cè)前、檢測(cè)中、檢測(cè)后的質(zhì)量控制是對(duì)實(shí)驗(yàn)質(zhì)量保證的關(guān)鍵因素。

[關(guān)鍵詞] 全自動(dòng)血型儀;一次性判讀成功率;質(zhì)量控制;血液安全

[中圖分類號(hào)] R446.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1672-5654（2020）02（b）-0172-03

[Abstract] Objective To investigate the causes of suspicious and erroneous results of the BECKMAN PK7300 automatic blood group detection and analysis system. Methods The results of 31，816 whole blood samples tested by BECKMAN PK7300 from June to September 2018 in Changsha Blood Center were reviewed for statistical analysis of the one-time judgment of success rate， failure rate， and cause analysis of suspicious results. Results The correct rate of one-time interpretation of RHD blood group was 99.93%; the success rate of one-time interpretation of ABO blood group was 99.04%; the failure rate was 0.95%. The main cause of the suspicious result analysis is the lipemia of the specimen， followed by other factors such as coagulation， impurities and sample failure， and air bubbles. Conclusion BCEKMAN PK700 automatic blood group meter has the advantages of full-automatic， high-throughput， etc. The quality of the sample before the test has a particularly important impact on the test results. Quality control before， during， and after the test is a key factor in ensuring the quality of the experiment.

[Key words] Automatic blood type meter; One-time interpretation success rate; Quality control; Blood safety

為保證臨床用血安全，血型的準(zhǔn)確鑒定是其首要前提。目前血型的臨床檢測(cè)方法主要有紙片法、試管法，微量微板法和全自動(dòng)血型儀檢測(cè)法，其中以試管法仍舊作為血型檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)，然而在血站的血液檢查工作中，由于標(biāo)本數(shù)量大，因而無(wú)法作為常規(guī)檢測(cè)方法，微量微板法對(duì)于大批量的樣本檢測(cè)時(shí)同樣存在費(fèi)時(shí)費(fèi)力的缺點(diǎn)，且其結(jié)果需要人工判讀，無(wú)法保存，結(jié)果回溯性差。BECKMAN PK7300全自動(dòng)血型分析儀集自動(dòng)加樣、孵育、判讀、數(shù)據(jù)保存及全過(guò)程監(jiān)控為一體，具有全自動(dòng)、高通量等優(yōu)點(diǎn)外，其在不規(guī)則抗體和亞型篩選、測(cè)定 ABO血型抗體效價(jià)等方面也體現(xiàn)出較為卓越的性能[1]。但在其使用過(guò)程中會(huì)遇到無(wú)法判讀或者錯(cuò)誤判讀血型結(jié)果的情況，這對(duì)于血液安全有著重大影響，現(xiàn)將該中心于2018年6—9月采集的31 816標(biāo)本進(jìn)行回溯性分析，報(bào)道如下。

1? 材料與方法

1.1? 材料來(lái)源

長(zhǎng)沙血液中心無(wú)償獻(xiàn)血者的全血樣本共計(jì)31 816例，均為EDTA-K2抗凝標(biāo)本。

1.2? 儀器與試劑

BECKMAN PK7300全自動(dòng)血型檢測(cè)系統(tǒng);白洋600 A型離心機(jī);單克隆抗-A/B血清（長(zhǎng)春博德）;抗-D血清（上海血液生物）;標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞懸液3%～5%（上海血液生物）;0.9%生理鹽水。

1.3? 方法

采用全自動(dòng)血型儀進(jìn)行操作。

1.3.1 試劑配制? ABO標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞用生理鹽水稀釋為濃度為 1.6%～2.7%的細(xì)胞懸液;標(biāo)準(zhǔn)抗血清用生理鹽水做1：40稀釋。

1.3.2 結(jié)果判讀? 根據(jù)梯度板小孔中心的血細(xì)胞邊緣的光通量的變化率以及與周邊部分的光通量和中心部分的光通量的比例關(guān)系等滿足設(shè)定參數(shù)的范圍則判斷陰性和陽(yáng)性結(jié)果。

1.3.3 操作步驟? 根據(jù)BECKMAN PK7300全自動(dòng)血型儀操作手冊(cè)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，當(dāng)儀器法鑒定無(wú)法判讀樣本時(shí)加做試管法以輔助鑒定。試管法按全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程進(jìn)行ABO正/反定型、RHD血型測(cè)定。兩種方法都無(wú)法檢測(cè)則送長(zhǎng)沙血液中心輸血研究室做進(jìn)一步鑒定。

1.4? 實(shí)驗(yàn)室參數(shù)設(shè)置

SPC表示位于小孔中心的血細(xì)胞邊緣的光通量的變化率。該設(shè)備賦予SPC更高的優(yōu)先權(quán)，是判斷凝集和非凝集狀態(tài)的主要參數(shù)。P/C表示小孔周邊部分和中心部分的光通量的比例關(guān)系。LIA表示非凝集狀態(tài)圖像中聚集在小孔中心的細(xì)胞區(qū)域的面積[2]。見(jiàn)表1。

表1? BECKMAN PK7300 主要參數(shù)設(shè)置

1.5? 統(tǒng)計(jì)方法

應(yīng)用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)和百分比（%）表示。

2? 結(jié)果

2.1? 31 816例的樣本判讀率與成功率分析統(tǒng)計(jì)

該次統(tǒng)計(jì)31 816例的樣本中，對(duì)于RHD血型一次性判讀正確率為99.93%;ABO血型一次性判讀成功31 512 例，成功率為99.04%;錯(cuò)誤判讀76例;可疑標(biāo)本228 例，失敗率為0.95%。

2.2? 228例ABO血型結(jié)果可疑標(biāo)本分析統(tǒng)計(jì)

通過(guò)回溯性觀察實(shí)驗(yàn)保存的圖片可統(tǒng)計(jì)到以上出現(xiàn)可疑結(jié)果的原因。其中加樣失敗表現(xiàn)為結(jié)果空白或者結(jié)果為溶血從而影響正定型的結(jié)果判讀。正反不符僅為該實(shí)驗(yàn)室結(jié)果顯示的正反定型不一致，最終結(jié)果有賴于追溯至Shinow 9.0系統(tǒng)中報(bào)告生成為準(zhǔn)。見(jiàn)表2。

2.3? 20例RHD血型結(jié)果可疑標(biāo)本分析統(tǒng)計(jì)

通過(guò)回溯性觀察實(shí)驗(yàn)保存的圖片可統(tǒng)計(jì)到以上出現(xiàn)可疑結(jié)果的原因。其中加樣失敗表現(xiàn)為結(jié)果空白或者結(jié)果為溶血從而影響RHD血型的結(jié)果判讀。見(jiàn)表3。

3? 討論

該中心由2018年4月正式啟動(dòng)BCEKMAN PK700全自動(dòng)血型儀，較以往采用微板法檢測(cè)，在試劑用量、人員操作上大幅度減少了成本付出，在檢測(cè)通量、結(jié)果準(zhǔn)確性上都有了很大的提高，而且整個(gè)過(guò)程人為干預(yù)減少，結(jié)果可保存追溯，對(duì)于血站檢驗(yàn)科的工作效率有了顯著的提高。

該次討論中，不管是RHD血型還是ABO血型的判讀，該中心的BECKMAN PK7300全自動(dòng)血型儀的結(jié)果正確率均在99%以上，其失敗率均符合儀器設(shè)定的可容許1%～2%的失敗率，其結(jié)果可靠。值得注意的是在該次228例可疑結(jié)果原因分析中，樣本因素占了66.22%，其中尤其以脂血標(biāo)本對(duì)反定型結(jié)果影響最大。樣本存在凝塊，反映了標(biāo)本前處理時(shí)抗凝劑顛倒混勻不夠，離心不夠充分。加樣失敗的原因主要反映在溶血和檢測(cè)量不夠的情況。而以上的因素提示對(duì)于全自動(dòng)血型儀的檢測(cè)中樣本因素起了關(guān)鍵的作用，包括了質(zhì)和量的影響。有氣泡和有雜質(zhì)的影響主要?dú)w結(jié)于儀器的維護(hù)和保養(yǎng)，儀器管道的沖洗是維護(hù)儀器日常所必需，實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前就應(yīng)該注意觀察管道內(nèi)是否有氣泡，而實(shí)驗(yàn)結(jié)束后梯形板的清潔對(duì)于下一次實(shí)驗(yàn)有很大的影響[3]。目前該實(shí)驗(yàn)室采用的是超聲波振蕩清洗儀，只需要人為將梯形板置于超聲波振蕩清洗儀中清洗40 min后，置于干燥箱中風(fēng)干待用，其清潔力度仍有待改善。在RHD血型檢測(cè)中加樣失敗是其影響結(jié)果的主要因素，標(biāo)本凝塊，雜質(zhì)也對(duì)實(shí)驗(yàn)有很大的影響。在156例RHD陰性結(jié)果中，送至輸血研究室經(jīng)過(guò)確認(rèn)為陰性的有151例，其中變異型4例，RHD陽(yáng)性1例。BCEKMAN PK700全自動(dòng)血型儀在RHD陰性鑒定上的準(zhǔn)確度為96.79%，由于RHD血型的復(fù)雜性和檢測(cè)的局限性，變異型的檢出仍舊有賴于血清學(xué)實(shí)驗(yàn)和基因鑒定[4]。該次討論中檢出的16例正反不符的樣本，送至長(zhǎng)沙血液中心輸血研究室鑒定后，其中6例為亞型，4例為不規(guī)則抗體陽(yáng)性，6例為血型抗體減弱。全自動(dòng)血型分析儀用于不規(guī)則抗體篩查的靈敏度較之前微板法有了很大的提高，從而保障血液更安全[5-7]。然而全自動(dòng)血型儀對(duì)于正反不符的原因并不能有效區(qū)分，存在其自身的局限性。而且全自動(dòng)血型儀的結(jié)果圖片還是需要人工核對(duì)，所以在使用血型儀過(guò)程中仍需工作人員嚴(yán)格按照SOP操作，認(rèn)真核對(duì)結(jié)果，提高責(zé)任心，從而能避免因血型錯(cuò)誤而造成的輸血事故。

綜上所述，BCEKMAN PK700全自動(dòng)血型儀的投入使用，對(duì)于血站檢驗(yàn)科的工作效率有了極大地提高和改善的同時(shí)，在檢測(cè)前、檢測(cè)中、檢測(cè)后的質(zhì)量控制仍是檢測(cè)質(zhì)量上的有力保證。

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（收稿日期：2019-11-19）