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    萊鮑迪苷M及其復(fù)配甜味劑在無(wú)糖酸奶中的應(yīng)用

    2020-06-17 13:12:02葉玉穩(wěn)胡國(guó)華
    關(guān)鍵詞:黏稠度羅漢果三氯

    葉玉穩(wěn), 王 璐, 胡國(guó)華,,*

    (1.華東理工大學(xué) 生物工程學(xué)院, 上海 200237; 2.華東理工大學(xué) 蘇州工業(yè)技術(shù)研究院/食品技術(shù)研究中心, 江蘇 蘇州 215011)

    酸奶受消費(fèi)者歡迎,因?yàn)樗哂胸S富的營(yíng)養(yǎng)和特殊的保健功能,是優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)的極好來(lái)源,促進(jìn)飽腹感,有助于保持健康的體重及肌肉和骨骼的生長(zhǎng),并預(yù)防乳糖不耐受癥[1]。傳統(tǒng)酸奶生產(chǎn)中添加的蔗糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)通常為8%至12%,含糖量過(guò)高,不利于健康飲食。流行病學(xué)研究表明蔗糖的過(guò)度攝取與代謝綜合征發(fā)生密切相關(guān),臨床和實(shí)驗(yàn)表明,蔗糖可以誘導(dǎo)胰島素抵抗、脂肪異位沉積、異常血糖及尿酸代謝紊亂[2]。隨著人們健康意識(shí)的增強(qiáng),人們?cè)絹?lái)越重視自己的飲食搭配,在選購(gòu)酸奶時(shí)更傾向于選購(gòu)無(wú)糖酸奶,乳品企業(yè)紛紛推出無(wú)糖酸奶,如天潤(rùn)無(wú)糖酸奶、伊利益消SABL 無(wú)糖酸奶等,無(wú)糖酸奶正成為乳品企業(yè)銷(xiāo)售增長(zhǎng)的新引擎,豐富無(wú)糖酸奶的品種及改善其口感可以增大對(duì)顧客購(gòu)買(mǎi)的吸引力。

    萊鮑迪苷M(Rebaudioside M, Reb-M)、三氯蔗糖以及羅漢果甜苷作為新一代甜味劑具有良好的穩(wěn)定性,不容易與其他物質(zhì)反應(yīng),熱值為零,不會(huì)引起肥胖,也不會(huì)被口腔內(nèi)的微生物代謝,因此不會(huì)引起齲齒[3-5]。Reb-M是甜菊糖中的一種單體甜味劑,甜度是蔗糖的300倍,甜菊糖中Reb-M含量只有1%,采用發(fā)酵法制備的Reb-M純度可達(dá)95%。甜菊糖中的主要成分萊鮑迪苷A具有后苦味,Reb-M相比其他的萊鮑迪苷擁有更接近蔗糖的口感,且后苦味較弱,在無(wú)糖食品中有廣泛的應(yīng)用空間[6]。羅漢果甜苷甜度是蔗糖的150倍,有清熱潤(rùn)肺鎮(zhèn)咳、潤(rùn)腸通便的功效,對(duì)肥胖、便秘、糖尿病等具有防治作用[7]。三氯蔗糖具有和蔗糖相近的口感,甜度是蔗糖的600倍。據(jù)GB 2760—2014要求,在酸奶中Reb-M的使用限量為0.2 g/kg,三氯蔗糖為0.3 g/kg,羅漢果甜苷可按生產(chǎn)需要適量使用。甜味劑的復(fù)配,能夠起到協(xié)同作用,并改善感官品質(zhì),與單一甜味劑相比,多種甜味劑復(fù)配使用可以減輕甜味劑的不良口感,單一甜味劑在食品中的應(yīng)用往往存在后味較持久的問(wèn)題,復(fù)配甜味劑可以解決這一問(wèn)題[8]。本研究將通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)得出Reb-M、三氯蔗糖以及羅漢果甜苷在酸奶中單獨(dú)使用的較佳用量,對(duì)其復(fù)配比例進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化并應(yīng)用于酸奶的生產(chǎn),為生產(chǎn)一種口感細(xì)膩?lái)樆臒o(wú)蔗糖酸奶提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    Reb-M(食品級(jí)),美國(guó)SweeGen公司;羅漢果甜苷V55(食品級(jí)),桂林萊恩天然成分公司;三氯蔗糖(食品級(jí)),鹽城捷康三氯蔗糖制造有限公司;發(fā)酵劑(食品級(jí)),安琪酵母股份有限公司;市售蔗糖,符合GB1445—2000優(yōu)選級(jí)標(biāo)準(zhǔn);純牛奶(食品級(jí)),內(nèi)蒙古伊利實(shí)業(yè)集團(tuán)股份有限公司;明膠(食品級(jí)),九江福美泰生物科技有限公司。

    1.2 儀器與設(shè)備

    FA1204B型電子天平,上海精科天美科學(xué)儀器有限公司;HHS- 21- 4型數(shù)顯恒溫水浴鍋,上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠;PHS- 3C型pH計(jì),上海佑科儀器儀表有限公司;XW- 80A型旋渦混合器,上海精科實(shí)業(yè)有限公司;TDZ4- WS型臺(tái)式高速離心機(jī),湘儀離心機(jī)儀器有限公司;CT3 LFRA 4500型質(zhì)構(gòu)儀,美國(guó)博勒飛公司;HH- B11- 60型恒溫培養(yǎng)箱,天津?qū)嶒?yàn)儀器廠;AH- BASICATS型高壓均質(zhì)機(jī),ATS工業(yè)系統(tǒng)有限公司;SYQ- DSX- 280B型高壓滅菌鍋,上海申安設(shè)備有限公司。

    1.3 實(shí)驗(yàn)方法

    1.3.1酸奶的制作工藝

    酸奶的制作工藝見(jiàn)圖1[9]。

    圖1 酸奶的制作工藝Fig.1 Process chart for yogurt production

    1.3.2制作酸奶的操作要點(diǎn)

    1)均質(zhì)。在60~65 ℃下將0.2%明膠加入到鮮牛奶中,同時(shí)加入甜味劑并在20 MPa壓力下均質(zhì)。2)殺菌、冷卻。將均質(zhì)乳均勻加熱并在95 ℃下巴氏殺菌5 min,然后冷卻至42 ℃并轉(zhuǎn)移至發(fā)酵燒瓶中。3)接種發(fā)酵。加入酸奶發(fā)酵劑(按1 L鮮牛奶加1 g),在42 ℃下恒溫培養(yǎng)箱中發(fā)酵約6 h。4)冷藏后熟。將發(fā)酵后的酸奶快速冷卻至10 ℃以下,置于約4 ℃的冰箱中,后熟24 h,隨后進(jìn)行測(cè)試[9]。

    1.3.3酸奶持水率的測(cè)定

    將空離心管稱重,質(zhì)量記為m,每個(gè)離心管中分別加入10 g左右的酸奶樣品,并精確稱量總質(zhì)量m1,常溫下4 000 r/min離心30 min,靜置10 min后,棄去上清液,稱量總質(zhì)量m2。持水率w計(jì)算見(jiàn)式(1)[10]。

    (1)

    1.3.4pH值的測(cè)定

    在攪拌酸奶的同時(shí)用pH計(jì)直接測(cè)定。

    1.3.5酸奶質(zhì)構(gòu)測(cè)定

    使用質(zhì)構(gòu)儀測(cè)定酸奶的硬度、黏附性和黏稠度。測(cè)定方法:將樣品置于測(cè)定平臺(tái)上,并使用TA4/1000(38.1 mm)有機(jī)玻璃圓柱形探頭進(jìn)行測(cè)試。放置樣品時(shí),在樣品表面和探頭底部之間預(yù)留大約20 mm的間隙,以確保探頭返回期間探頭樣品界面可完全斷開(kāi)不連接,方便評(píng)估產(chǎn)品的黏附性質(zhì)。酸奶質(zhì)構(gòu)測(cè)試參數(shù):測(cè)定模式為壓縮測(cè)試,測(cè)試速度1 mm/s,提升速度1 mm/s,測(cè)試深度20 mm,觸發(fā)點(diǎn)0.044 N,數(shù)據(jù)采集頻率100 Hz。

    1.3.6感官性質(zhì)的評(píng)價(jià)

    評(píng)定指標(biāo)為酸奶的口感、色澤、爽滑度、組織狀態(tài)及穩(wěn)定性(見(jiàn)表1),10人參與評(píng)定,取平均分作為感官評(píng)價(jià)的結(jié)果[11-12]。

    1.3.7Reb-M替代蔗糖的單因素實(shí)驗(yàn)

    酸奶中蔗糖質(zhì)量濃度為70 g/L。Reb-M相對(duì)甜度為蔗糖300倍,分別用Reb-M替代0、20%、40%、60%、80%、100%的蔗糖制作酸奶,替代方案見(jiàn)表2。于4 ℃保存1 d后對(duì)樣品進(jìn)行感官評(píng)價(jià)及質(zhì)構(gòu)分析。

    1.3.8無(wú)糖酸奶單因素實(shí)驗(yàn)

    按照1.3.1節(jié)進(jìn)行酸奶制作,考察不同濃度的Reb-M、三氯蔗糖和羅漢果甜苷對(duì)酸奶品質(zhì)的影響,以酸奶的pH值、持水率、黏附性、黏稠度和感官評(píng)價(jià)為考核指標(biāo)。

    酸奶的基礎(chǔ)配方為100 mL 鮮牛奶,發(fā)酵時(shí)間6 h、發(fā)酵溫度42 ℃ 的基礎(chǔ)上,改變其中一個(gè)因素的量,研究其對(duì)酸奶質(zhì)量的影響,并使用感官評(píng)分為評(píng)價(jià)指標(biāo),以確定各因素的較適添加量。

    1.3.9酸奶發(fā)酵工藝的響應(yīng)面優(yōu)化

    通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定3個(gè)因素和3個(gè)水平的較佳參數(shù),并且通過(guò)感官評(píng)價(jià)得分進(jìn)行響應(yīng)面分析,響應(yīng)面因素水平見(jiàn)表3。

    表1 酸奶感官評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

    表2 Reb-M替代蔗糖的單因素實(shí)驗(yàn)條件

    表3 響應(yīng)面試驗(yàn)因素水平

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    使用SPSS 23軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理以進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,不同組間比較采用鄧肯顯著性分析,P<0.05為差異顯著,P<0.01為差異極顯著,響應(yīng)面分析結(jié)果用Design-Expert V8.0.6軟件進(jìn)行。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 Reb-M替代蔗糖對(duì)酸奶品質(zhì)的影響

    按照1.3.7節(jié)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),使用Reb-M替代不同比例蔗糖對(duì)酸奶硬度、黏附性、持水率、pH值、感官評(píng)分、黏稠度的影響見(jiàn)圖2。

    圖2 Reb-M替代蔗糖對(duì)酸奶理化性質(zhì)的影響Fig.2 Effects of Reb-M replacing sucrose on physical and chemical properties of yogurt

    由圖2可知,隨著Reb-M替代量的增加,酸奶的硬度和黏稠度呈下降趨勢(shì),這與酸奶中固形物含量下降有關(guān),但總體變化較小,所以Reb-M的替代對(duì)酸奶硬度和黏稠度的影響較弱。隨著Reb-M替代量的增加,酸奶的黏附性先上升后下降,替代比為60%時(shí)達(dá)到最大,隨后減小。隨著Reb-M替代量的增加,酸奶的pH值逐漸升高,推測(cè)Reb-M可能會(huì)輕微抑制乳酸菌發(fā)酵。隨著Reb-M替代量的增加,酸奶的持水率不斷下降,與其固形物含量下降相關(guān)。隨著Reb-M替代量的增加,酸奶的感官評(píng)分先上升后下降。當(dāng)替代量較小時(shí),Reb-M能夠彌補(bǔ)蔗糖的不足,使酸奶有更適口的酸甜感,替代量大于60%時(shí),酸奶的感官評(píng)分出現(xiàn)顯著下降,主要原因是Reb-M相比蔗糖后味較持久。隨著Reb-M替代量的增加,酸奶色澤越來(lái)越白,推測(cè)其與美拉德反應(yīng)相關(guān)[13]。

    由于Reb-M替代量達(dá)到100%時(shí),酸奶感官評(píng)分較低,為了提升酸奶的感官評(píng)分,需同其他甜味劑復(fù)配,規(guī)避單一甜味劑使用的缺點(diǎn)。

    2.2 Reb-M對(duì)無(wú)糖酸奶品質(zhì)的影響

    將不同濃度的Reb-M添加到無(wú)糖酸奶中,測(cè)定酸奶的pH值、持水率、黏附性、黏稠度,結(jié)果見(jiàn)表4。Reb-M濃度對(duì)酸奶的pH值以及黏附性影響較小,兩者都沒(méi)有顯著變化。隨著Reb-M濃度的增加,酸奶的持水率與黏稠度降低,這可能是由于添加的Reb-M在乳酸菌發(fā)酵的凝膠化過(guò)程中與乳中的酪蛋

    白分子之間互斥,從而抑制酪蛋白的相互聚集,導(dǎo)致了發(fā)酵后的酸奶持水率和黏稠度下降。隨著Reb-M濃度升高,其與酪蛋白的這種相斥作用越強(qiáng),所以乳酸菌發(fā)酵后的酸奶黏稠度和持水率隨Reb-M濃度的升高而變得越來(lái)越小[14-15]。由表5可知,Reb-M的濃度對(duì)酸奶的色澤、組織狀態(tài)以及穩(wěn)定性基本無(wú)影響,隨著Reb-M濃度的升高,酸奶的口感與爽滑度評(píng)分先上升再下降,在240 mg·L-1時(shí),評(píng)分最高,酸甜可口。Reb-M濃度較低時(shí),酸奶酸味較突出,濃度較高時(shí),酸奶過(guò)甜,酸味與甜味不協(xié)調(diào),導(dǎo)致感官評(píng)分下降。

    表4 Reb-M對(duì)無(wú)糖酸奶品質(zhì)的影響

    不同字母表示經(jīng)Duncan檢驗(yàn)數(shù)據(jù)之間的差異顯著(P<0.05)。

    2.3 三氯蔗糖對(duì)酸奶品質(zhì)的影響

    將不同濃度的三氯蔗糖添加到無(wú)糖酸奶中,測(cè)定酸奶的pH值、持水率、黏附性、黏稠度,結(jié)果見(jiàn)表6。

    從表6中可看出,三氯蔗糖濃度對(duì)酸奶的pH值影響較小,并且酸奶持水能力隨著三氯蔗糖濃度的升高,呈下降趨勢(shì),黏附性和黏稠度隨三氯蔗糖濃度的升高,總體呈上升趨勢(shì)。隨著三氯蔗糖濃度的升高,酸奶的感官評(píng)分先上升再下降,在添加量為90 mg·L-1時(shí),感官評(píng)分最高。

    表5 Reb-M添加量對(duì)無(wú)糖酸奶感官品質(zhì)的影響

    不同字母表示經(jīng)Duncan 檢驗(yàn)數(shù)據(jù)之間的差異顯著(P<0.05)。

    表6 三氯蔗糖對(duì)無(wú)糖酸奶品質(zhì)的影響

    不同字母表示經(jīng)Duncan 檢驗(yàn)數(shù)據(jù)之間的差異顯著(P<0.05)。

    2.4 羅漢果甜苷對(duì)酸奶品質(zhì)的影響

    將不同濃度的羅漢果甜苷添加到無(wú)糖酸奶中,測(cè)定酸奶的pH值、持水率、黏附性、黏稠度,結(jié)果見(jiàn)表7。

    表7 羅漢果甜苷對(duì)無(wú)糖酸奶品質(zhì)的影響

    不同字母表示經(jīng)Duncan檢驗(yàn)數(shù)據(jù)之間的差異顯著(P<0.05)。

    由表7可知,羅漢果甜苷的濃度對(duì)酸奶的黏附性和pH值影響較小,酸奶持水率隨著羅漢果甜苷濃度的升高,呈下降趨勢(shì),黏稠度隨羅漢果甜苷濃度的升高,總體呈上升趨勢(shì)。隨著羅漢果甜苷濃度的升高,酸奶的感官評(píng)分先上升再下降,在添加量為400 mg·L-1時(shí),感官評(píng)分最高。

    2.5 響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果分析

    分析測(cè)試數(shù)據(jù)以獲得響應(yīng)面回歸模擬方程:

    R1=92.44-0.20A-0.20B+0.49C-2.62AB+
    0.13AC+1.63BC-2.78A2-4.19B2-1.36C2。

    由響應(yīng)面試驗(yàn)的分析結(jié)果可知,建立的數(shù)學(xué)模型P<0.01,說(shuō)明該數(shù)學(xué)模型非常顯著,失擬項(xiàng)0.303 0>0.05,不顯著,表明該實(shí)驗(yàn)?zāi)芎芎玫剡m應(yīng)實(shí)驗(yàn)的真實(shí)情況,可用于優(yōu)化無(wú)糖酸奶發(fā)酵過(guò)程。此外,相互關(guān)聯(lián)項(xiàng)AB極顯著,表明ρ(Reb-M)和ρ(三氯蔗糖)這兩個(gè)因素對(duì)酸奶感官品質(zhì)影響存在著交互作用,相互項(xiàng)BC顯著,說(shuō)明三氯蔗糖濃度和羅漢果甜苷濃度這兩個(gè)因素對(duì)酸奶感官品質(zhì)影響存在著交互作用。

    Reb-M與三氯蔗糖的交互作用見(jiàn)圖3,由圖3可知,Reb-M和三氯蔗糖的響應(yīng)面圖呈鐘形,說(shuō)明感官評(píng)分存在最大值,等高線圖呈橢圓形說(shuō)明兩者交互作用明顯。當(dāng)三氯蔗糖濃度較低時(shí),酸奶的感官評(píng)分隨著Reb-M濃度的升高而增加,當(dāng)三氯蔗糖濃度較高時(shí),酸奶的感官評(píng)分隨著Reb-M濃度的升高總體呈下降趨勢(shì),當(dāng)Reb-M濃度為80 mg·L-1,三氯蔗糖濃度為30 mg·L-1時(shí)感官評(píng)分最高。

    圖3 Reb-M與三氯蔗糖的交互作用Fig.3 Interaction of Reb-M with sucralose

    圖4 Reb-M與羅漢果甜苷的交互作用Fig.4 Interaction of Reb-M with mogroside

    Reb-M與羅漢果甜苷的交互作用見(jiàn)圖4,由圖4可知,當(dāng)羅漢果甜苷濃度一定時(shí),酸奶的感官評(píng)分隨著Reb-M濃度的升高,先升高后下降。當(dāng)Reb-M濃度一定時(shí),隨著羅漢果甜苷濃度的升高,酸奶感官評(píng)分有細(xì)微的上升。當(dāng)Reb-M濃度為80 mg·L-1,羅漢果甜苷濃度為130 mg·L-1時(shí)感官評(píng)分最高。

    圖5 三氯蔗糖與羅漢果甜苷的交互作用Fig.5 Interaction of sucralose with mogrosides

    三氯蔗糖與羅漢果甜苷的交互作用見(jiàn)圖5,由圖5可知,當(dāng)羅漢果甜苷濃度一定時(shí), 酸奶的感官評(píng)分隨著三氯蔗糖的濃度的升高先上升后下降。當(dāng)三氯蔗糖的濃度較低時(shí),酸奶的感官評(píng)分隨著羅漢果甜苷濃度的升高,沒(méi)有顯著變化,當(dāng)三氯蔗糖的濃度較高時(shí),酸奶的感官評(píng)分隨著羅漢果甜苷濃度的升高而增加,由圖5可知,等高線圖呈橢圓形說(shuō)明兩者交互作用明顯。當(dāng)三氯蔗糖的濃度為30 mg·L-1,羅漢果甜苷濃度為130 mg·L-1時(shí),感官評(píng)分最高。

    2.6 較佳配方的預(yù)測(cè)和驗(yàn)證

    利用Design-Expert軟件進(jìn)行回歸模型預(yù)測(cè)無(wú)糖酸奶較佳配方為:每100 mL牛奶中添加Reb-M 7.91 mg、三氯蔗糖3.03 mg和羅漢果甜苷13.62 mg,在此條件下進(jìn)行3次驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn),無(wú)糖酸奶的感官評(píng)分的均值為92.00,與理論預(yù)測(cè)值92.49較為接近,說(shuō)明模型的擬合程度較好,回歸方程可以有效地對(duì)無(wú)糖酸奶配方進(jìn)行分析和預(yù)測(cè)。

    3 結(jié) 論

    Reb-M替代酸奶中60%蔗糖時(shí),酸奶感官品質(zhì)良好,完全替代蔗糖時(shí)風(fēng)味不佳,因此需要同其他甜味劑復(fù)配。Reb-M、三氯蔗糖和羅漢果甜苷3者可以在酸奶中互相起協(xié)同作用,彌補(bǔ)單一甜味劑的甜味性能不足,使酸奶風(fēng)味更佳。以牛奶為原料,通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)以及響應(yīng)面分析得到了酸奶感官品質(zhì)同Reb-M濃度、三氯蔗糖濃度和羅漢果甜苷濃度的回歸模型,優(yōu)化的工藝參數(shù)為每100 mL牛奶中添加Reb-M 7.91 mg、羅漢果甜苷13.62 mg、三氯蔗糖3.03 mg。在此條件下的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中,無(wú)糖酸奶的感官評(píng)分為92.00,理論值為92.49,實(shí)驗(yàn)值與理論值的相對(duì)偏差是0.53%,此時(shí)感官品質(zhì)最佳。

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