ICP-MS法測定聚明膠肽注射液中銅、砷、鎘、汞、鉛元素的含量

袁 林，冉麗娟

（重慶市萬州食品藥品檢驗所，重慶 404100）

聚明膠肽注射液是由健康的牛骨或豬骨明膠水解制成的一種滅菌水溶液，主要用于外傷引起的失血性休克，嚴重?zé)齻?、敗血癥、胰腺炎等引起的失體液性休克者。其生產(chǎn)過程中加入了多種輔料，例如氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、氫氧化鈉等。目前執(zhí)行的檢驗標準中，僅對其中的鉀、鈉、鈣重金屬元素進行了定量研究，本文采用電感耦合等離子體質(zhì)譜法（ICP-MS法），將樣品微波消解后同時測定其中的銅、砷、鎘、汞、鉛5種常見有害金屬元素的含量，該方法操作簡便快捷，結(jié)果準確可靠，專屬性強，可豐富該制劑的質(zhì)量控制，提供更加全面、快捷、準確的測定方法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

ICAQ-Qc電感耦合等離子體質(zhì)譜儀（美國Thermo-Fisher公司）、AB204S電子天平（美國Sartorius公司，分度值0.1mg）、CEM Mars6微波消解儀（美國PyNN公司），純水機（圣德利SDL A-B-1101）。

1.2 試藥

鉛 （Pb）、鎘 （Cd）、汞 （Hg）、砷 （As）、銅（Cu）、金（Au） 標準溶液（國家有色金屬及電子材料分析測試研究中心，質(zhì)量濃度均為1000μg/mL）；鍺（Ge）、銦（In）、鉍（Bi）作為內(nèi)標溶液（中國計量科學(xué)研究院，質(zhì)量濃度均為100μg/mL），水為超純水；其他試劑均為優(yōu)級純。

2 方法與結(jié)果

2.1 方法

2.1.1 試驗條件

KED掃描模式；射頻功率：1550W；采樣深度：8.0mm；真空度：5×10-6Pa；采樣錐孔徑：1.0mm；截取錐孔徑：0.5mm；霧化室溫度：2.7℃；數(shù)據(jù)采集重復(fù)次數(shù)：3次。

2.1.2 標準溶液的制備

取“1.2”項下標準溶液鉛（Pb） 0.05mL、鎘（Cd） 0.025mL、砷 （As） 0.05mL置同一50mL容量瓶中，加10%硝酸稀釋至刻度，搖勻，作為混合標準溶液1；取“1.2”項下標準溶液銅（Cu）0.5mL，置50mL容量瓶中，加10%硝酸稀釋至刻度，作為標準溶液2。分別精密量取混合標準溶液1各0.05、0.25、0.5、1.0、2.0mL與標準溶液2各0.25、0.5、1.0、2.0、2.5mL置同一50mL容量瓶中，得到鉛（Pb）標準溶液的濃度分別為1、5、10、20、40ng/mL，鎘 （Cd） 標準溶液的濃度分別為 0.5、2.5、5、10、20ng/mL，砷 （As）標準溶液的濃度分別為1、5、10、20、40ng/mL，銅 （Cu） 標準溶液的濃度分別為 50、2.5、5、10、20ng/mL。

取“1.2”項下標準溶液汞（Hg） 0.25mL置50mL容量瓶中，加10%硝酸溶液稀釋至刻度，搖勻，再精密量取0.5mL，置50mL容量瓶中，加10%硝酸溶液稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取0.2、0.5、1.0、1.5、2.0mL置50mL容量瓶中，各加200μl金（Au） （用10%硝酸溶液稀釋至濃度為1μg/mL） 溶液，加10%硝酸溶液稀釋至刻度，搖勻，得到汞（Hg）標準溶液的濃度分別為0.2、0.5、1.0、1.5、2.0ng/mL。

2.1.3 混合內(nèi)標溶液的制備

精密量取鍺（Ge）、銦（In）、鉍（Bi）標準溶液適量，用10%硝酸溶液稀釋制成濃度為20ng/mL的混合內(nèi)標溶液。

2.1.4 供試品溶液的制備

精密量取待測樣品3mL，置微波消解罐中，加硝酸8.0mL，消解。消解完畢后冷卻至室溫，置于電熱板上110℃加熱至紅棕色蒸氣揮盡，濃縮至約0.5mL，用水洗滌消解罐，定容至50mL容量瓶中，搖勻，即得。

2.1.5 陰性對照溶液的制備

按“2.1.4”項下從 “加硝酸8.0mL，消解”起，同法制備空白對照溶液。

2.2 線性關(guān)系考察

以質(zhì)量濃度（ng/mL）為橫坐標，儀器響應(yīng)值（y）為縱坐標，進行線性回歸，得到回歸方程與相應(yīng)的線性范圍，結(jié)果見表1。

表1 回歸方程、線性范圍Tab1 Regression equations，linearranges

2.3 精密度試驗

取“2.1.2”項下各混合班組溶液1，標準溶液2，汞（Hg）標準溶液使用液各適量，按相同的試驗條件，連續(xù)進樣6次，記錄儀器響應(yīng)值，結(jié)果RSD分別為鉛（Pb） 為2.31%、鎘（Cd） 為2.42%、汞 （Hg） 2.07%、砷 （As） 1.62%、銅（Cu）1.39%，結(jié)果表明儀器精密度良好。

2.4 重復(fù)性試驗

取同一批次樣品（批號19011702） 6份，按“2.1.4”項下方法制備供試品溶液，在同一條件下測定，計算，結(jié)果樣品中的鉛（Pb）、鎘（Cd）、汞 （Hg）、砷 （As）、銅 （Cu） RSD 值分別為1.32%、2.09%、1.86%、2.08%、1.27%（n=6），結(jié)果表明該方法重現(xiàn)性良好。

表2 回收率試驗結(jié)果（n=6）Table 2 Results of recovery tests（n=6）

2.5 穩(wěn)定性試驗

取“2.1.4”項下的1份供試品溶液于室溫放置，分別在 0，2，4，6，8，12，24h后測定。結(jié)果鉛 （Pb）、鎘 （Cd）、汞 （Hg）、砷 （As）、銅（Cu） 的儀器響應(yīng)值RSD分別為1.68%、1.91%、1.43%、1.50%、1.47%（n=6），這表明供試品在24h內(nèi)各成分的含量是穩(wěn)定的。

2.6 回收率試驗

精密量取已知含量樣品各適量，共6份，分別精密加入鉛 （Pb）、鎘 （Cd）、汞 （Hg）、砷（As）、銅（Cu） 一定量，按“2.1.4”項下方法制備供試品溶液，再按“2.1.1”項下方法進行測定，計算含量，得到回收率。結(jié)果見表2。

2.7 樣品含量的測定

取同一生產(chǎn)廠家3批次正常生產(chǎn)的產(chǎn)品進行檢驗，計算每批次樣品中鉛（Pb）、鎘（Cd）、汞（Hg）、砷 （As）、銅 （Cu） 含量。三批次樣品中，各重金屬的含量均較低，均符合《中國藥典》2015年版四部通則項下對注射劑中重金屬含量的要求，測定結(jié)果表明，3批次樣品均符合通則規(guī)定。

3 討論

3.1 本方法的意義

本文采用電感耦合等離子體質(zhì)譜法（ICP-MS法），同時對聚明膠肽注射液中鉛（Pb）、鎘（Cd）、汞 （Hg）、砷 （As）、銅 （Cu） 五種重金屬的含量進行了測定，方法簡便快捷，結(jié)果準確可靠，為聚明膠肽注射液質(zhì)量標準的提高提供了一定的參考。

3.2 供試品溶液制備方法的選擇

供試品溶液的制備參考了相關(guān)的文獻[1-2]，分別對加入硝酸的量、加熱板的溫度、定容體積進行了一定的考察，最后經(jīng)過比較確定了使用硝酸8.0mL作為微波消解溶劑，加熱板溫度為110℃，定容體積為50mL，該方法具有操作簡單快捷，結(jié)果準確度高的特點。

3.3 內(nèi)標溶液的選擇

以質(zhì)量數(shù)相近的原則，選取了鍺（Ge）、銦（In）、鉍（Bi）作為內(nèi)標液，其中鍺（Ge）作為銅 （Cu） 和砷 （As） 的內(nèi)標，銦 （In） 作為鎘（Cd）的內(nèi)標，鉍（Bi）作為汞（Hg）和鉛（Pb）的內(nèi)標。

4 小結(jié)

利用電感耦合等離子體質(zhì)譜法（ICP-MS法），同時對聚明膠肽注射液中鉛（Pb）、鎘（Cd）、汞 （Hg）、砷 （As）、銅 （Cu） 五種重金屬的含量進行了測定，對樣品前處理，微波消解條件均做了一定的考察，結(jié)果表明其重金屬含量均未超過國家標準，樣品基質(zhì)復(fù)雜，使用本方法，結(jié)果準確可靠，可為該制劑的質(zhì)量控制提供一種相對較好的方法。