血清25-(OH)D3水平對(duì)卵巢反應(yīng)性及凍融胚胎移植臨床結(jié)局的影響

尹佳倩，許孝鳳，張雅夢(mèng)， 鄒慧娟，曹云霞

維生素D(vitaminD, VitD)在人體內(nèi)可促進(jìn)鈣磷吸收和骨鹽代謝，調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖分化，改善胰島素抵抗，調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫，并可通過影響卵巢功能和增強(qiáng)子宮內(nèi)膜容受性影響女性的內(nèi)分泌功能以及生殖過程[1]。人體內(nèi)的VitD主要來源于皮膚光照，少部分來源于胃腸道吸收。VitD吸收入血后，與VitD結(jié)合蛋白結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)至肝臟，在肝臟內(nèi)經(jīng)25羥化酶轉(zhuǎn)化成25羥維生素D3[25-(OH)D3]，是血液循環(huán)中VitD的主要存在形式[2]，也是診斷體內(nèi)VitD是否不足的可靠指標(biāo)。有研究[3-6]顯示，由于女性戶外活動(dòng)的減少，缺少光照，部分女性VitD缺乏，并且低水平的VitD對(duì)卵泡發(fā)育、子宮內(nèi)膜容受性均有負(fù)面影響。但VitD水平與體外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryos transfer, IVF)結(jié)局相關(guān)性的報(bào)道尚少，該研究旨在探討血清25-(OH)D3水平對(duì)不孕患者卵子質(zhì)量及凍融胚胎移植(frozen-thawed embryo transfer, FET)臨床結(jié)局的影響。

1 材料與方法

1.1 病例資料回顧性分析2017年6～12月在安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院生殖中心因單純輸卵管因素行IVF治療并在復(fù)蘇周期移植優(yōu)質(zhì)囊胚的157例患者臨床資料?；颊吣挲g26～34(29.9±3.97)歲，均簽署知情同意書，并于IVF治療前1個(gè)月經(jīng)周期檢測(cè)血清25-(OH)D3水平，根據(jù)最新WHO標(biāo)準(zhǔn)[7]，分為VitD不足組(< 20 μg/L)，共101例；VitD充足組(≥20 μg/L)，共56例。排除標(biāo)準(zhǔn)：① 男方因素就診；② 女方多囊卵巢綜合征、糖尿病、甲狀腺功能異常等內(nèi)分泌疾病；③ 子宮內(nèi)膜異位癥；④生殖道畸形及宮頸異常。

1.2 研究方法

1.2.1VitD測(cè)定 IVF治療前1個(gè)月經(jīng)周期留取患者靜脈血5 ml，采用化學(xué)發(fā)光法測(cè)定血清25-(OH)D3水平。

1.2.2超促排卵及IVF 所有患者均于前1個(gè)月經(jīng)周期黃體中期皮下注射長效促性腺激素釋放激素激動(dòng)劑(達(dá)菲林，法國益普生公司)1.33 mg進(jìn)行垂體降調(diào)節(jié)，2周后采用卵泡刺激素(普麗康，美國默沙東公司)促排卵，當(dāng)3個(gè)卵泡直徑達(dá)到18 mm時(shí)肌肉注射人絨毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin, HCG，麗珠醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司)10 000 U。36 h后在陰道B超引導(dǎo)下穿刺取卵，體外培養(yǎng)4 h左右加精，受精后14～20 h觀察到原核為正常受精，選擇5 d或6 d可冷凍的囊胚行玻璃化冷凍保存。由于新鮮周期胚胎移植對(duì)患者的獲卵數(shù)、HCG、注射日孕酮值及內(nèi)膜厚度等具有一定要求，同時(shí)，隨著冷凍技術(shù)的發(fā)展，復(fù)蘇周期相比與新鮮周期移植具有更好的臨床結(jié)局[8]，因此本研究中所有患者為復(fù)蘇周期行凍融囊胚移植。

1.2.3胚胎質(zhì)量評(píng)估 按Gardner標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行囊胚評(píng)分[9]，將3期含A級(jí)不含B、C級(jí)的囊胚，4、5、6期不含C級(jí)的囊胚定義為優(yōu)質(zhì)囊胚。

2 結(jié)果

2.1 2組患者一般資料比較由表1可見，2組間患者年齡、體質(zhì)量指數(shù)(body mass index, BMI)、不孕年限、基礎(chǔ)促卵泡生成激素(follicle-stimulating hormone, FSH)、基礎(chǔ)促黃體生成激素(luteinizing hormone, LH)、基礎(chǔ)雌二醇 (estradiol, E2)水平、基礎(chǔ)竇卵數(shù)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 兩組患者一般資料比較

2.2 2組IVF-ET臨床結(jié)局比較由表2可見，2組間獲卵數(shù)、MⅡ數(shù)、受精率、Gn總量、促排天數(shù)、優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)，移植胚胎數(shù)、移植日子宮內(nèi)膜厚度、HCG日E2值均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；VitD充足組的臨床妊娠率(64.2%)顯著高于VitD不足組(45.5%),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表2 兩組患者臨床結(jié)局比較

與VitD不足組比較：*P<0.05

3 討論

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，缺乏VitD會(huì)導(dǎo)致小鼠子宮發(fā)育不全以及黃體功能不足，缺乏VitD與IVF妊娠率下降有一定相關(guān)性[10]。本研究的結(jié)果顯示，VitD不足組的獲卵數(shù)、MⅡ數(shù)、受精率、Gn總量、促排天數(shù)、優(yōu)質(zhì)胚胎率與Vit D充足組間均無顯著性差異，但FET的臨床妊娠率顯著低于Vit D充足組，表明VitD不足并不會(huì)影響卵巢的反應(yīng)性及卵子質(zhì)量，但對(duì)臨床妊娠率有負(fù)面影響。此外，本研究157例不孕癥患者中，VitD不足患者占64.3%，提示VitD缺乏在不孕患者中普遍存在。不孕患者就診時(shí)有必要將檢測(cè)血清VitD水平作為常規(guī)檢查，并對(duì)VitD不足患者在胚胎移植前給予VitD補(bǔ)充以改善其臨床結(jié)局。

充足VitD水平可改善妊娠率的機(jī)制可能與其能夠提高子宮內(nèi)膜容受性有關(guān)。有研究[11]顯示，25-(OH)D3可通過與VitD受體結(jié)合增加HOXA10的mRNA轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)，改善子宮內(nèi)膜容受性，并通過刺激卵巢內(nèi)胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-1的分泌，改善黃體功能[12]。此外，VitD可抑制Th1細(xì)胞的增殖，限制其產(chǎn)生殺傷性細(xì)胞因子如干擾素、白細(xì)胞介素-2和腫瘤壞死因子-α等，并誘導(dǎo)T輔助細(xì)胞2產(chǎn)生大量維持免疫耐受的細(xì)胞因子如IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10和IL-13，維持TH1/TH2間的平衡，提高胚胎著床率[13]。

綜上所述，不孕患者大部分存在VitD不足的問題，血清低水平VitD可能與妊娠率下降有關(guān)。