集落刺激因子治療終末期酒精性肝病的臨床對照研究

周培 于淙 渠淑云

失代償性酒精性肝病有很高的短期死亡率，Maddrey得分>32分、MELD積分>18分、Glasgow酒精性肝炎評分>8分、ABIC評分>9分均提示預(yù)后不良[1]。近些年研究發(fā)現(xiàn)，粒細(xì)胞集落刺激因子能夠有效動員骨髓干細(xì)胞至受損肝細(xì)胞，促進(jìn)肝干細(xì)胞的增殖和分化，G-CSF還可以通過調(diào)控肝臟內(nèi)各種免疫細(xì)胞的能，起到免疫調(diào)控作用來改善終末期肝病的肝臟功能，降低其短期死亡率，如它可以使骨髓CD34+干細(xì)胞向肝內(nèi)轉(zhuǎn)移，達(dá)到修復(fù)受損肝細(xì)胞的目的[2]。最近研究表明G-CSF的應(yīng)用能夠改善慢加急性肝衰竭(ACLF)患者的生化學(xué)及組織學(xué)指標(biāo)[3]。然而，另Spahr等對失代償性酒精性肝病的研究表明G-CSF單用或聯(lián)合骨髓干細(xì)胞移植的治療均沒能改善患者肝功能(P>0.05)[4]。因此，我們對G-CSF治療失代償性酒精性肝病的安全性及療效做了相關(guān)臨床研究。

資料與方法

一、臨床資料

收集了2015年10月—2018年12月西藏民族大學(xué)附屬醫(yī)院、核工業(yè)二一五醫(yī)院和威海市中心醫(yī)院感染科住院診治的36例酒精性肝病患者，所有患者符合酒精性肝病防治指南(2018更新版)診斷標(biāo)準(zhǔn)：①年齡在18～75歲，男女比36:0。②3個(gè)月內(nèi)每天酒精攝取量>100 g/d。③Maddrey得分>32分。④簽署了知情同意書的患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①惡性腫瘤患者或有門靜脈血栓的患者。②嚴(yán)重的血液系統(tǒng)疾病的患者。③10 d內(nèi)有糖皮質(zhì)激素治療的患者。④10 d內(nèi)出現(xiàn)了肝腎綜合征，3或4級肝性腦病或上消化道出血嚴(yán)重并發(fā)癥患者。⑤合并其他感染：無法控制的細(xì)菌感染、HIV感染、HBV感染、HCV感染。⑥自身免疫性肝病或代謝性肝病。⑦妊娠或哺乳期婦女。⑧既往對G-CSF 過敏。⑨精神病患者或正在參加其他臨床試驗(yàn)者。本臨床研究通過了上述三家醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。按照上述標(biāo)準(zhǔn)本研究用數(shù)字表法隨機(jī)分配到試驗(yàn)組和對照組，試驗(yàn)組18例，對照組18例。對照組給予綜合治療，試驗(yàn)組在綜合治療的同時(shí)給予G-CSF治療。

二、治療方法

對照組給予保肝、退黃、抗感染、營養(yǎng)支持、限鹽等綜合治療(使用多烯磷脂酰膽堿、還原型谷胱甘肽、腺苷蛋氨酸、前列地爾、利尿、白蛋白、血漿等藥物)；試驗(yàn)組在內(nèi)科綜合治療的基礎(chǔ)上加用G-CSF(齊魯制藥有限公司 國藥準(zhǔn)號：S19990049)治療，劑量為5 μg/kg，用法： 1次/12 h，皮下注射，連續(xù)7 d。2組治療過程中均未進(jìn)行人工肝治療。

三、觀察指標(biāo)

記錄治療前后患者的一般情況、癥狀體征、藥物副作用、生化指標(biāo)、CD34+細(xì)胞計(jì)數(shù)、有無出現(xiàn)并發(fā)癥及生存率等。入院時(shí)、治療后第8 d、1個(gè)月、2個(gè)月及3個(gè)月分別對患者進(jìn)行MDF、MELD評分并觀察3個(gè)月生存率。

四、 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

結(jié) 果

一、肝功能和肝功能評分

1、治療后第8 d試驗(yàn)組治療前后對比：ALP升高，ALT、AST下降，Alb無明顯變化；CD34+計(jì)數(shù)無明顯變化；PT及INR無明顯變化；MELD及MDF評分無明顯變化。2、治療后第8 d對照組治療前后對比：ALP無明顯變化，ALT、AST下降，Alb下降；PT及INR無明顯變化；CD34+計(jì)數(shù)無明顯變化；MELD及MDF評分無明顯變化。3、試驗(yàn)組和對照組第8 d治療后相比較：ALP無明顯變化；ALT、AST下降；CD34+細(xì)胞計(jì)數(shù)下降；PT及INR無明顯變化；MELD及MDF評分無明顯變化。4、試驗(yàn)組對比對照組MDF及MELD評分在1、2、3個(gè)月均有顯著降低(P<0.05)。見表1、表2。

表1 試驗(yàn)組和對照組治療前后對比

表2 試驗(yàn)組和對照組肝病評分對比

二、生存率和并發(fā)癥

試驗(yàn)組和對照組90 d內(nèi)死亡人數(shù)分別為3例和14例，試驗(yàn)組中，并發(fā)上消化道出血者死亡1例；并發(fā)自發(fā)性腹膜炎、敗血癥及腎功能衰竭者死亡1例；并發(fā)自發(fā)性腹膜炎，肺炎者死亡1例。對照組中，并發(fā)上消化道出血者、敗血癥和肝腎綜合征死亡3例；并發(fā)肺部感染、敗血癥及肝腎綜合征者死亡4例；并發(fā)泌尿系感染及腎功能衰竭者3例；并發(fā)敗血癥休克死亡者4例。用Kaplan-Meier法計(jì)算生存率，經(jīng)log-rank檢驗(yàn)，試驗(yàn)組和對照組生存率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=14.995，P=0.000)，90 d內(nèi)試驗(yàn)組生存率顯著高于對照組。

三、藥物不良反應(yīng)

試驗(yàn)組中耐受性均很好，未出現(xiàn)嚴(yán)重藥物不良反應(yīng)，2例(11.1%)患者出現(xiàn)骨痛，2例(11.1%)患者出現(xiàn)頭痛，3例患者(16.6%)在用藥后前3 d出現(xiàn)發(fā)熱，未經(jīng)處理后體溫可自行恢復(fù)正常。治療過程中并未有患者出現(xiàn)血小板減少，治療7 d后未有患者出現(xiàn)脾大。雖然用G-CSF治療后白細(xì)胞總數(shù)升高，但并未增加感染風(fēng)險(xiǎn)，也并沒有增加抗菌素的應(yīng)用率。

討 論

本研究結(jié)果顯示，在內(nèi)科治療的基礎(chǔ)上加用G-CSF治療能夠提高患者生存率。有研究表明，糖皮質(zhì)激素能夠改善終末期酒精性肝病患者28 d的生存率，但對改善90 d及半年的生存率效果不佳[5]。目前對終末期酒精性肝病患者應(yīng)用糖皮質(zhì)激素治療尚存爭議，對于酒精性肝病終末期患者可能存在隱匿性感染和加重消化道出血等風(fēng)險(xiǎn)，故本研究內(nèi)科治療方案中并未采用糖皮質(zhì)激素治療[6]。雖有報(bào)道稱己酮可可堿可以改善酒精性肝病的生化學(xué)指標(biāo)，但有文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)己酮可可堿在治療慢加急肝衰竭患者中有71%的酒精性肝病患者死亡，本研究中患者M(jìn)DF評分均數(shù)為86.3，并發(fā)癥多，故本研究未應(yīng)用己酮可可堿作為常規(guī)治療[7]。雖有報(bào)道對終末期酒精性肝病肝移植治療可改善患者生存率，但由于費(fèi)用較高，供體缺乏，無其他臟器嚴(yán)重?fù)p害及移植前需戒酒等條件限定，故本研究患者中在短期內(nèi)并沒有采用肝移植治療[8]。

2006年，Gaia等首次將G-CSF應(yīng)用于終末期肝病患者并表示了其治療的可行性[9]。Cho等[10]研究表明G-CSF能夠改善終末期酒精性肝病患者生化指標(biāo)和生存率，且安全性較好。有研究表明G-CSF能夠提高患者CD34+細(xì)胞數(shù)(CD34+細(xì)胞選擇性黏附于造血干細(xì)胞表面，隨著細(xì)胞成熟而減少直至消失，計(jì)數(shù)增多表明造血干細(xì)胞數(shù)增多)，降低C-X-C趨化因子受體4的表達(dá)，促使干細(xì)胞在肝細(xì)胞中增殖，改善患者肝功能[11]。多數(shù)研究也表明G-CSF能夠促進(jìn)骨髓干細(xì)胞定植與肝臟，促進(jìn)肝卵圓細(xì)胞增殖，使得肝細(xì)胞再生，從而減輕肝臟損害，同時(shí)有免疫調(diào)節(jié)作用[12-13]。但Spahr等對終末期酒精性肝病患者給予G-CSF 治療并未發(fā)現(xiàn)肝功能的改善，他們推測可能與患者繼續(xù)攝入酒精和糖皮質(zhì)激素治療4周有關(guān)[14]。雖然有報(bào)道稱G-CSF能夠使患者中性粒細(xì)胞數(shù)升高，能提高患者抗感染能力，但本研究中，試驗(yàn)組和對照組感染例數(shù)接近，感染情況復(fù)雜，并不能斷定G-CSF能提高患者抗感染能力[15]。研究報(bào)道G-CSF治療的副作用，骨痛的發(fā)生率為62%～84%，但本研究骨痛發(fā)生者僅為2例患者，可能于G-CSF劑量低有關(guān)(5 μg/kg)，國外常用劑量為12～20 μg·bg-1·d-1[16]。本研究在應(yīng)用G-CSF過程中有3例患者出現(xiàn)低熱，都在用藥后前3 d，發(fā)熱在給藥后4～6 h內(nèi)，持續(xù)數(shù)小時(shí)后不經(jīng)處理可降至正常，考慮為藥物熱所致，但終末期肝病患者往往合并細(xì)菌感染，故需要進(jìn)一步鑒別發(fā)熱原因。

本研究表明，短期應(yīng)用G-CSF治療終末期酒精性肝病患者，能夠很好改善其肝功能，提高生存率，安全性較高，但其長期安全性需要大樣本長期隨訪來明確。