基于數(shù)據(jù)挖掘分析極光激酶A在食管癌中的表達(dá)及意義

楊 麗，張孟賢，張 微，熊英友，陳世勇，方呈祥，*

(1．湖北民族大學(xué)附屬民大醫(yī)院腫瘤科，湖北恩施 445000；2．華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院腫瘤中心，湖北 武漢 430030)

食管癌(esophagus cancer，ESCA)是我國(guó)成人消化系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率逐年增加，已躍居我國(guó)癌癥發(fā)病率的第3位，死亡率居第4位，居全球癌癥發(fā)病率和死亡率的第7位[1-2]。食管癌惡性程度高、預(yù)后差，患者5年生存率不足30%[3]。規(guī)范化外科手術(shù)是食管癌的主要治療手段，但對(duì)于局部晚期患者單純手術(shù)往往無法達(dá)到根治效果，而成為局部復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的潛在危險(xiǎn)因素。近年來，有關(guān)食管癌放化療、靶向治療、生物治療的研究不斷展開，以手術(shù)為主的綜合治療使部分患者從中獲益。但臨床約70%的患者就診時(shí)已發(fā)展為晚期，仍有40%患者接受同步放化療后出現(xiàn)局部復(fù)發(fā)，對(duì)于這部分患者的治療顯得尤為棘手。積極開展臨床研究，獲取食管癌的基因譜、尋找有效的靶點(diǎn)、研發(fā)有效的藥物控制腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移是改善食管癌患者預(yù)后的關(guān)鍵所在。

生物信息分析學(xué)是目前腫瘤研究領(lǐng)域中比較熱門的一類研究方法，可以幫助研究者快速挖掘有效的分子靶標(biāo)，為更多的實(shí)驗(yàn)和臨床研究提供思路。極光激酶A(aurora kinase A，AURKA)編碼的蛋白是一種細(xì)胞周期調(diào)節(jié)酶，開始定位于有絲分裂S期，在G2晚期與M期迅速增加，直至下一周期的G1期，在染色體分離過程中參與微管的形成和/或紡錘體極的穩(wěn)定，促進(jìn)中心體的成熟，保證有絲分裂細(xì)胞周期的順利進(jìn)行[4]。目前，有研究報(bào)道AURKA在乳腺癌、胃癌、膀胱癌、頭頸部鱗癌中的表達(dá)升高，通過激活多種信號(hào)通路，加速細(xì)胞周期的進(jìn)程，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的活化與轉(zhuǎn)移[5-7]，而有關(guān)AURKA在食管癌中的表達(dá)及功能機(jī)制研究較少。AURKA一方面可通過在細(xì)胞周期內(nèi)的動(dòng)態(tài)定位模式，影響細(xì)胞的有絲分裂活動(dòng)；同時(shí)，還可通過加速上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化以及調(diào)節(jié)腫瘤血管生成等多種形式促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展[8]。結(jié)合目前食管癌的治療現(xiàn)狀，亟需深入研究驅(qū)動(dòng)其惡性表型的關(guān)鍵基因與信號(hào)通路，探究新的治療靶點(diǎn)。AURKA在前期部分腫瘤中的研究成果使我們了解到其在惡性腫瘤活動(dòng)中的多種作用方式，因而本文通過數(shù)據(jù)挖掘的形式，發(fā)現(xiàn)AURKA在食管癌中的功能學(xué)改變，有望為其在腫瘤中的機(jī)制研究奠定基礎(chǔ)，為臨床以AURKA基因?yàn)榘悬c(diǎn)治療食管癌提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，具有重要的臨床指導(dǎo)意義。

1 材料與方法

1.1 GEPIA數(shù)據(jù)差異表達(dá)分析

GEPIA基因表達(dá)譜動(dòng)態(tài)分析數(shù)據(jù)庫(kù)(Gene Expression Profiling Interactive Analysis，http://gepia.cancer-pku.cn/index.htm)是基于TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析的可視化在線網(wǎng)站，其內(nèi)容包含了單基因、多基因在不同癌癥類型中的表達(dá)，相關(guān)性分析，PCA主成分分析以及生存分析等[9]。在GoPIA檢索界面分析AURKA在人體多種腫瘤組織和正常組織中的表達(dá)差異，并基于TCGA中的數(shù)據(jù)分析ESCA組織與正常組織中AURKA在mRNA水平的表達(dá)差異。

1.2 Oncomine數(shù)據(jù)庫(kù)分析AURKA在食管癌中的表達(dá)

Oncomine(http://www.oncomine.org)是目前腫瘤研究領(lǐng)域中應(yīng)用較廣的數(shù)據(jù)庫(kù)之一，包含了多種基因表達(dá)譜數(shù)據(jù)，同時(shí)提供了分析工具供研究者免費(fèi)使用，如：共表達(dá)分析、基因差異表達(dá)分析、臨床特征分析等。為了研究AURKA在ESCA組織同正常食管組織中的表達(dá)差異，我們按下列參數(shù)設(shè)定數(shù)據(jù)過濾條件。①Gene：AURKA；②Analysis Type：Cancer vs.Normal Analysis；③Cancer Type：Esophageal Cancer；④Data Type：mRNA；⑤Sample Type：Clinical Specimen；⑥調(diào)整臨界值為：矯正后P＜1×10-4，差異倍數(shù)(fold change)為2，gene bank=top 10%。最后，選取Su Esophagus研究結(jié)果，制作箱線圖進(jìn)行分析。

1.3 PPI蛋白互作網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

STRING蛋白互作網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫(kù)(Search Tool for the Retrieval of Interacting Genes STRING，http://string-db.org)存儲(chǔ)了包括2 000多個(gè)物種的900多萬(wàn)種蛋白，其蛋白質(zhì)序列和相互之間的作用關(guān)系可以快速進(jìn)行檢索[10]。設(shè)連接度分值(interaction score)≥0.9、最大交互作用不超過10為篩選條件，隱藏網(wǎng)絡(luò)未連接節(jié)點(diǎn)后的數(shù)據(jù)導(dǎo)入Cytoscape軟件，通過CytoHubba網(wǎng)絡(luò)分析插件、運(yùn)用BottleNeck算法計(jì)算出排名前10的核心基因(hub gene)。核心基因與AURKA關(guān)系作用密切，其編碼的蛋白可能參與了重要生理功能的調(diào)節(jié)。

1.4 相關(guān)性表達(dá)分析

在GEPIA數(shù)據(jù)庫(kù)中，通過TCGA和GTEx數(shù)據(jù)集分析AURKA與CDC20、CCNA2、CCNB1、PLK1、NEK2等核心基因在食管癌中的相關(guān)性表達(dá)。以皮爾森相關(guān)系數(shù)(r)來反映兩個(gè)基因之間的線性相關(guān)程度。參考比較標(biāo)準(zhǔn)：-1＜r＜1，若r＞0，表明兩個(gè)基因之間呈正相關(guān)；若r＜0，表明兩個(gè)基因呈負(fù)相關(guān)，且r的絕對(duì)值越大表明負(fù)相關(guān)性越顯著，但兩者之間不存在因果關(guān)系。若r=0，則兩個(gè)基因間為非線性相關(guān)。

1.5 GO和KEGG通路富集分析

使用DAVID 6.8網(wǎng)絡(luò)在線分析數(shù)據(jù)庫(kù)(https://david.ncifcrf.gov)在基因本體中注釋AURKA及其相關(guān)核心基因的功能，包括生物學(xué)過程(biological process，BP)、分子功能(molecular function，MF)以及細(xì)胞組成(cellular component，CC)；同時(shí)，進(jìn)行KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG)通路富集分析。根據(jù)P＜0.05，及研究?jī)?nèi)容篩選出差異顯著及有意義的功能與信號(hào)通路。

1.6 生存預(yù)后分析

基于R2基因分析可視化平臺(tái)(hgserv-erl.amc.nl/cgi-bin/r2/main.cgi)，檢索TCGA-食管癌基因芯片表達(dá)譜數(shù)據(jù)，通過Kaplan-Meier繪制生存函數(shù)曲線，分析AURKA的表達(dá)與食管癌患者總生存時(shí)間(overall survival，OS)的關(guān)系。

2 結(jié)果

2.1 AURKA mRNA在多種腫瘤組織及對(duì)應(yīng)正常組織中的表達(dá)

通過GEPIA數(shù)據(jù)庫(kù)分析顯示，AURKA mRNA在人體多種腫瘤組織樣本及對(duì)應(yīng)正常組織樣本中的表達(dá)具有差異，如圖1所示，AURKA mRNA在結(jié)直腸腺癌(COAD、READ)、胃腺癌(STAD)、宮頸鱗狀細(xì)胞癌(CESC)、子宮肉瘤(USC)、肺鱗癌(LUSC)等惡性腫瘤中的表達(dá)較正常組織的表達(dá)水平升高。

圖1 人體各腫瘤組織及對(duì)應(yīng)正常組織中AURKA mRNA的表達(dá)差異

2.2 AURKA在食管癌組織及正常食管組織中的表達(dá)差異

在Oncomine數(shù)據(jù)庫(kù)中，根據(jù)篩選條件選取Su Esophagus數(shù)據(jù)集進(jìn)行分析，106例組織樣本中分別包含了53例ESCA組織和53例正常食管組織。研究結(jié)果顯示，AURKA在mRNA水平上的表達(dá)較正常食管組織的表達(dá)顯著升高，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見圖2A。同時(shí)，在GEPIA數(shù)據(jù)庫(kù)中基于TCGA-ESCA數(shù)據(jù)集發(fā)現(xiàn)，AURKA基因在ESCA組織中的表達(dá)明顯高于正常食管組織(P＜0.05)，見圖2B。盡管AURKA在ESCA組織中的表達(dá)升高，但通過GEPIA分析發(fā)現(xiàn)其表達(dá)水平與患者的分期無明顯影響(P＞0.05)，見圖3。

2.3 PPI蛋白互作網(wǎng)絡(luò)

利用STRING蛋白互作網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫(kù)，根據(jù)過濾條件構(gòu)建有關(guān)AURKA的PPI網(wǎng)絡(luò)，包含了31個(gè)節(jié)點(diǎn)和402條邊，見圖4A。將篩選后的結(jié)果導(dǎo)入Cytoscape軟件，基于BottleNeck算法篩選出細(xì)胞周期分裂蛋白20(cell division cycle 20，CDC20)、Polo樣蛋白激酶1(polo like kinase 1，PLK1)、細(xì)胞周期蛋白A2(cyclin A2，CCNA2)、AURKA、細(xì)胞周期蛋白B1(cyclin B1，CCNB1)、有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白1(mitotic arrest deficient 2 like 1，MAD2L1)、周期蛋白依賴激酶1(cyclin dependent kinase 1，CDK1)等10個(gè)核心基因(hub gene)，且基因間的相互作用連接度較高，見圖4B。

2.4 相關(guān)性表達(dá)分析

A：Oncomine數(shù)據(jù)庫(kù)分析顯示，ESCA組織中AURKA mRNA的表達(dá)較正常食管組織的表達(dá)顯著升高(P＜0.05)；B：GEPIA數(shù)據(jù)庫(kù)分析顯示，AURKA mRNA在ESCA組織中顯著高表達(dá)(P＜0.05).圖2 ESCA組織和正常組織中AURKA在mRNA水平的表達(dá)差異

圖3 AURKA在ESCA不同分期中的表達(dá)水平

為進(jìn)一步明確AURKA與CDC20、PLK1、CCNA2、CCNB1、MAD2L1等核心基因的表達(dá)相關(guān)性，通過GEPIA分析發(fā)現(xiàn)，AURKA在mRNA的表達(dá)水平 與CDC20、PLK1、CCNA2、CCNB1、MAD2L1、CDK1、BUB1B、NEK2、UBE2C等核心基因的mRNA表達(dá)呈顯著正相關(guān)，其相關(guān)性系數(shù)(r)分別為0.78、0.83、0.76、0.74、0.75、0.82、0.83、0.79、0.87，見圖5。

2.5 GO功能注釋與KEGG通路富集分析

通過DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)，對(duì)AURKA與核心基因在基因本體中進(jìn)行GO功能注釋，其富集的生物學(xué)功能主要體現(xiàn)在細(xì)胞分裂、有絲分裂G2/M期過渡、DNA損傷檢測(cè)點(diǎn)、有絲分裂細(xì)胞周期檢查點(diǎn)、細(xì)胞增殖、負(fù)性調(diào)控細(xì)胞凋亡進(jìn)程、細(xì)胞周期蛋白依賴的絲氨酸/蘇氨酸激酶活性、泛素蛋白連接酶的結(jié)合等，見表1。通過KEGG數(shù)據(jù)庫(kù)分析發(fā)現(xiàn)，AURKA與核心基因主要參與了細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)胞衰老、P53信號(hào)通路以及FoxO信號(hào)通路的調(diào)節(jié)等，見表1。

2.6 AURKA與食管癌患者生存預(yù)后的關(guān)系

在R2基因分析可視化平臺(tái)中，基于TCGA-ESCA數(shù)據(jù)集中184例樣本，分析AURKA基因的表達(dá)水平與患者生存預(yù)后的關(guān)系，其中1例樣本缺乏生存隨訪數(shù)據(jù)未納入分析。結(jié)果顯示，AURKA高、低表達(dá)組患者2年生存率分別為28%、60%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=2.9×10-3)，見圖6。同時(shí)，本研究一并檢測(cè)了余下核心基因的表達(dá)與食管癌患者總生存時(shí)間的關(guān)系，其中CCNB1、BUB1B、NEK2基因高表達(dá)組食管癌患者的總生存率均顯著低于低表達(dá)組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.027，P=0.038，P=0.048)。

A.PPI蛋白互作網(wǎng)絡(luò)；B.Hub genes(核心基因).根據(jù)每個(gè)基因的連接度排序，以顏色強(qiáng)弱表示，由紅至黃，顏色越深代表其在整個(gè)PPI網(wǎng)絡(luò)中的作用越顯著.圖4 AURKA的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)與核心基因

A：CDC20；B：PLK1；C：CCNA2；D：CCNB1；E：MAD2L1；F：CDK1；G：BUB1B；H：NEK2；I：UBE2C.圖5 AURKA與核心基因mRNA表達(dá)的相關(guān)性

表1 AURKA與核心基因的GO功能注釋與KEGG富集分析

A：AURKA；B：CCNB1；C：BUB1B；D：NEK2.圖6 TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)中183例食管癌AURKA及核心基因的表達(dá)與患者總生存率的關(guān)系

3 討論

食管癌是我國(guó)常見的惡性腫瘤之一，作為食管癌的高發(fā)國(guó)家，其病例數(shù)約全球的一半[11]。目前，新輔助放化療聯(lián)合根治性手術(shù)治療在我國(guó)開展得還比較局限，術(shù)后輔助放化療在我國(guó)應(yīng)用居多。局部晚期患者術(shù)后出現(xiàn)進(jìn)展時(shí)，往往因?yàn)闋I(yíng)養(yǎng)狀況差、放化療后骨髓抑制、食管穿孔、癌因性疲乏等多種腫瘤相關(guān)并發(fā)癥而阻礙了腫瘤的繼續(xù)治療，限制了治療手段的選擇，導(dǎo)致晚期食管癌患者的生活質(zhì)量和生存時(shí)間明顯下降。除了臨床不斷開展的EGFR-TKI類分子靶向治療、PD-1免疫治療藥物等的研究外，還需要我們積極探索有效的新型藥物，為食管的早期篩查、早期診斷及預(yù)后判斷奠定基礎(chǔ)，使更多的患者能從中獲益。

本研究基于生物信息分析學(xué)技術(shù)，利用各大腫瘤相關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)，尋找食管癌與正常組織間差異表達(dá)的基因，并對(duì)基因參與的生物學(xué)功能和信號(hào)通路進(jìn)行注釋，尋找可靠的抗腫瘤治療靶點(diǎn)。還可以通過高通量測(cè)序技術(shù)，研究細(xì)胞的表現(xiàn)與功能，獲得更多表觀遺傳學(xué)信息的改變。腫瘤往往是多基因異常表達(dá)或功能失調(diào)導(dǎo)致的一種基因病。因而，研究腫瘤中某些基因獨(dú)特的改變是明確其發(fā)生發(fā)展分子機(jī)制的關(guān)鍵所在。

AURKA激酶是三種高度同源的絲氨酸/蘇氨酸激酶家族之一，作為細(xì)胞周期調(diào)控激酶在調(diào)節(jié)有絲分裂的諸多環(huán)節(jié)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，尤其在G2向M期過渡期間，AURKA的活性顯著增加。細(xì)胞生命活動(dòng)大部分時(shí)間是在細(xì)胞分裂間期完成，AURKA在整個(gè)細(xì)胞周期中顯示出亞細(xì)胞定位的動(dòng)態(tài)變化，因而AURKA不僅可以參與細(xì)胞分裂間期，甚至包括了整個(gè)細(xì)胞周期中的各種分裂活動(dòng)。有研究報(bào)道，AURKA與子宮內(nèi)膜癌、結(jié)直腸腺癌、口腔癌、喉癌等惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[12-14]。因而，我們推測(cè)AURKA在食管癌中的表達(dá)水平增加。通過GEPIA和Oncomine數(shù)據(jù)庫(kù)分析發(fā)現(xiàn)AURKA在mRNA水平上的表達(dá)較正常食管組織的表達(dá)明顯升高。盡管AURKA在ESCA組織中高表達(dá)，但采用GEPIA分析發(fā)現(xiàn)其表達(dá)水平與患者的分期無明顯相關(guān)性。目前，我們腫瘤研究中心已經(jīng)通過與胸外科和病理科的合作，開展了收集食管癌患者的病理標(biāo)本工作，在獲得100例標(biāo)本時(shí)進(jìn)行免疫組化分析，通過實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)AURKA在食管癌組織中的表達(dá)高于正常食管組織以及AURKA在不同食管癌病理類型中的表達(dá)情況。

腫瘤的發(fā)生是多基因突變或多因素綜合作用的結(jié)果。因而，我們推測(cè)AURKA與多種細(xì)胞周期調(diào)控蛋白共同參與了食管癌的發(fā)生發(fā)展。進(jìn)一步，通過PPI蛋白互作網(wǎng)絡(luò)發(fā)現(xiàn)了與AURKA作用顯著的核心基因，其中CDC20、PLK1、CCNA2等基因與AURKA的表達(dá)呈顯著正相關(guān)。AURKA及核心基因富集的生物學(xué)功能主要包括細(xì)胞分化，細(xì)胞增殖，有絲分裂G2/M期過渡，DNA損傷檢測(cè)點(diǎn)，有絲分裂細(xì)胞周期檢查點(diǎn)，負(fù)性調(diào)控細(xì)胞凋亡進(jìn)程，細(xì)胞周期蛋白依賴的絲氨酸/蘇氨酸激酶活性，泛素蛋白連接酶的結(jié)合等；KEGG數(shù)據(jù)庫(kù)分析發(fā)現(xiàn)，AURKA及核心基因參與了細(xì)胞周期調(diào)控，細(xì)胞衰老，P53以及FoxO信號(hào)通路的調(diào)節(jié)。Yang等[15]研究發(fā)現(xiàn)，AURKA在喉癌中表達(dá)異常升高，通過活化FAK/PI3K/Akt信號(hào)通路激活休眠的腫瘤細(xì)胞，從而促進(jìn)喉癌的侵襲與遷移。Katsha等[16]研究證實(shí)，AURKA可以通過調(diào)控上游酪氨酸激酶JAK2的表達(dá)和磷酸化水平來促進(jìn)信號(hào)傳導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子STAT3的活性，從而廣泛參與細(xì)胞應(yīng)激、增殖、分化和凋亡等生物效應(yīng)，靶向AURKA/JAK2/STAT3通路可作為抗腫瘤治療的重要方向。除了加速細(xì)胞周期，誘導(dǎo)細(xì)胞分化增殖外，AURKA還可以通過誘導(dǎo)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化促進(jìn)腫瘤的形成與轉(zhuǎn)移[17]。Katayama等[18]研究表明，AURKA作為P53通路的關(guān)鍵調(diào)控元件，其表達(dá)升高可調(diào)節(jié)P53蛋白的磷酸化水平，促使P53通過Mdm2泛素化和蛋白降解增加，導(dǎo)致檢查點(diǎn)反應(yīng)通路下調(diào)，促進(jìn)細(xì)胞的致癌轉(zhuǎn)化；沉默AURKA激酶可以降低p53在Ser315位點(diǎn)的磷酸化，增強(qiáng)p53蛋白的穩(wěn)定性，并在G2-M位點(diǎn)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞周期阻滯；在腫瘤組織中，缺乏AURKA的細(xì)胞對(duì)順鉑誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡更加敏感。同時(shí)，抑制AURKA激酶可誘導(dǎo)合成致死率，克服腫瘤細(xì)胞化療耐藥，改善MYC陽(yáng)性淋巴瘤的預(yù)后[19]。通過R2平臺(tái)分析發(fā)現(xiàn)，AURKA高表達(dá)組食管癌患者的生存預(yù)后較差，可作為用于評(píng)估患者預(yù)后的生物標(biāo)志。目前，已有研究顯示出AURKA小分子抑制劑，如ZM447439、VX680等可作為惡性腫瘤靶向治療的潛在藥物[20]。AURKA調(diào)節(jié)細(xì)胞周期進(jìn)程、促進(jìn)腫瘤血管生成、參與腫瘤復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移的重要功能，為臨床進(jìn)一步使用AURKA選擇性抑制劑治療食管癌提供了新的策略。

細(xì)胞周期蛋白B1(cyclin B1，CCNB1)是參與有絲分裂細(xì)胞周期的調(diào)控蛋白，與CDC2蛋白形成M期促進(jìn)因子(M-phase promoting factor，MPF)，完成細(xì)胞G2/M期的過渡。CCNB1的表達(dá)異常升高，一方面促進(jìn)MPF的增高，逃避細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)的監(jiān)控，加快有絲分裂的進(jìn)程，導(dǎo)致細(xì)胞的加速增殖；還可以使受損DNA逃避檢測(cè)而繼續(xù)完成復(fù)制，從而促進(jìn)惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展[21]。CCNB1在多種腫瘤組織中高表達(dá)，沉默CCNB1的表達(dá)可以通過激活P53信號(hào)通路，抑制細(xì)胞增殖、促進(jìn)衰老等[22]。紡錘體檢測(cè)蛋白BUB1B定位于著絲粒，確保姐妹染色單體的正確分離，在多種腫瘤組織中發(fā)現(xiàn)BUB1B的表達(dá)升高、紡錘體檢查點(diǎn)的功能受損[23]。本研究發(fā)現(xiàn)，BUB1B高表達(dá)組食管癌患者的預(yù)后差于低表達(dá)組，因而BUB1B也可作為評(píng)估食管癌患者生存預(yù)后的分子標(biāo)記。中心體相關(guān)激酶2(NIMA related kinase 2，NEK2)定位于中心體，編碼參與有絲分裂調(diào)控的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，在G2末期達(dá)到最高水平[24]。NEK2通過NDC80磷酸化調(diào)控著絲粒微管在有絲分裂中的附著穩(wěn)定性；還通過參與CDC20和MAD2L1磷酸化調(diào)控有絲分裂檢查點(diǎn)蛋白復(fù)合物，在細(xì)胞周期調(diào)控活動(dòng)中起著積極的作用[25]。有研究證實(shí)NEK2在多種癌癥類型及腫瘤細(xì)胞株中高表達(dá)，沉默NEK2可在體內(nèi)、體外多種腫瘤中產(chǎn)生抗癌作用[26]。細(xì)胞周期蛋白的異?；顒?dòng)被認(rèn)為與惡性腫瘤細(xì)胞的增殖失控、侵襲和耐藥密切相關(guān)，其抑制劑體現(xiàn)了靶向治療惡性腫瘤的優(yōu)勢(shì)。

綜上，AURKA在食管癌等多種惡性腫瘤中顯著高表達(dá)，且提示患者預(yù)后不良?；谏镄畔W(xué)快速篩選有意義的生物靶標(biāo)，并分析其主要功能及相關(guān)的信號(hào)通路，為腫瘤發(fā)生發(fā)展的機(jī)制研究奠定理論基礎(chǔ)。當(dāng)然，也需要我們更多的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行佐證，從而為實(shí)現(xiàn)抗腫瘤治療提供更大的臨床價(jià)值。