蝦青素對人體抗氧化功能的實(shí)驗(yàn)研究

諸曉波　吳健　虞利東　祝雷強(qiáng)　王如偉

摘? 要：目的? 研究蝦青素對人體抗氧化能力的作用。方法? 采用自身對照和組間對照法，選取120例受試者，試食者60例，對照組60例。試食者服用蝦青素軟膠囊（折合成蝦青素9mg/d），連續(xù)服用90d，對照者服用安慰劑，試食前后分別檢測安全性指標(biāo)和功效指標(biāo)。結(jié)果? 試食前兩組間過氧化脂質(zhì)（MDA）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）活力無顯著差異，具有可比性;試食組試食前后自身配對比較MDA、GSH-Px、SOD活力差異均具有顯著性意義（P<0.01）;試食后試食組與對照組組間比較MDA、GSH-Px、SOD活力差異均具有顯著性意義（P<0.05或P<0.01）。結(jié)論? 該研究表明日服用9mg蝦青素能明顯提高人體抗氧化功能，且對服用者身體健康無影響，為蝦青素的開發(fā)應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：蝦青素? 抗氧化? 過氧化脂質(zhì)? 谷胱甘肽過氧化物酶? 超氧化物歧化酶

中圖分類號：R151 ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1672-3791（2020）04（c）-0206-04

Abstract： To study the antioxidant ability of Astaxanthin soft capsule. Taking 120 subjects divided into two groups at random with self-control and inter- control methods. The subjects in the test group took Astaxanthin soft capsules （with Astaxanthin 9mg/d）， the other group took placebo. Safety index and efficacy index were detected before and after trial. The activities of lipid peroxide （MDA）， glutathione peroxidase （GSH-Px） and superoxide dismutase （SOD） were not significantly different between the two groups before the trial. There was a significant difference between the test group before and after the trail（P<0.01）. There was also a significant difference between the test group and control group after the trail （P<0.05或P<0.01）. It meant taking 9 mg Astaxanthin/d can significantly improve the bodys antioxidant ability and no side-effects.

Key Words： Astaxanthin; Antioxidation; MDA; GSH-Px; SOD

蝦青素Astaxanthin又名蝦黃素、龍蝦殼色素，是一種類胡蘿卜素，最早在蝦體內(nèi)被發(fā)現(xiàn)，是自然界中最強(qiáng)的抗氧化劑，其抗氧化能力是維生素E的550倍，被稱為“超級抗氧化劑”，在食品、醫(yī)藥、日化等領(lǐng)域具有重要作用。蝦青素不僅具有很強(qiáng)的抗氧化活性，還是自然界中最有潛力的抗氧化色素[1]，在抗炎[2]、心血管[3]、神經(jīng)保護(hù)[4]等方便具有顯著的功效。雨生紅球藻是已知生物中蝦青素積累量最高的物種[5]，根據(jù)衛(wèi)生部2010年第17號公告，雨生紅球藻被批準(zhǔn)為新食品原料，正式可用于保健食品中，開啟蝦青素應(yīng)用的新大門。

蝦青素的抗氧化功能評價集中在體外[6-7]和動物試驗(yàn)[8-9]，極少有人體試驗(yàn)。為明確蝦青素用量對人體抗氧化能力的影響，該研究采用蝦青素軟膠囊，聯(lián)合山東中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院按國家食品藥品監(jiān)督管理局（國食藥監(jiān)保化[2012]107號）附件1要求進(jìn)行人體抗氧試食試驗(yàn)，探索蝦青素具體用量達(dá)到抗氧化效果，為蝦青素相關(guān)產(chǎn)品的研制提供理論基礎(chǔ)。

1? 資料與方法

1.1 試劑與材料

蝦青素軟膠囊（由康恩貝研究院實(shí)驗(yàn)室提供，批號190220，0.5g/粒，每粒含蝦青素2.25mg）;安慰劑（由康恩貝研究院實(shí)驗(yàn)室提供，批號190220，不含蝦青素）。

1.2 主要儀器

全自動血液分析儀XT-1800i（日本希森美康）;尿液分析儀Uritest-500B（桂林優(yōu)利特）;全自動生化分析儀7600-110（日立）;X光機(jī)XR/D（美國GE）;ECG-1350P（日本光電）;B超PREIRUS（二郎神，日立）;便常規(guī)LJ-2000 Olympus CHC 212（日立）。

1.3 服用方法

120例受試者，隨機(jī)分為兩組，試食者60例，對照組60例，連續(xù)服用90d，試食者服用蝦青素軟膠囊，每日2次，每次2粒;對照組服用同等劑量的安慰劑，連續(xù)服用90d。

1.4 受試者服用前情況比較

試驗(yàn)前對受試者進(jìn)行心率、血壓、血象、大小便、肝腎功能、胸透、心電圖、B超等檢查。

1.5 安全性指標(biāo)

各項(xiàng)指標(biāo)試驗(yàn)前和試驗(yàn)后分別檢測。一般狀況：受試者在試食期間的精神、睡眠、飲食、大小便、心率、血壓、體重;血、尿、便常規(guī)檢查;生化指標(biāo)檢查：血清總蛋白、血清白蛋白、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、尿素氮、肌酐、血糖、總膽固醇、甘油三酯;胸透、心電圖、腹部B超檢查;血液常規(guī)檢查。

1.6 功效性指標(biāo)

過氧化脂質(zhì)（MDA）含量的變化及下降百分率;超氧化物歧化酶（SOD）的變化及升高百分率;谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）的變化及升高百分率。

1.7 數(shù)據(jù)處理

自身對照采用配對t檢驗(yàn)，兩種均數(shù)比較采用成組t檢驗(yàn)，后者進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，對非正太分布或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)方差齊后，用轉(zhuǎn)換的數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn);若轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)仍不能滿足正態(tài)方差齊要求，改用t，檢驗(yàn)或秩和檢驗(yàn);但變異系數(shù)太大（如CV>50%）的資料用秩和檢驗(yàn)。在試驗(yàn)前組間比較差異無顯著性的前提下，進(jìn)行試驗(yàn)后組間比較。

1.8 抗氧化作用判定

各功效觀察指標(biāo)試驗(yàn)前后自身比較和試食后組間比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，方可判定該指標(biāo)陽性。過氧化脂質(zhì)含量、超氧化物岐化酶、谷胱甘肽過氧化物酶三項(xiàng)試驗(yàn)中任二項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果陽性，可判定具有抗氧化功能。

2? 結(jié)果

2.1 受試者服用前情況比較

該研究共納入120例受試者，受試者服用前情況比較見表1。

試食前兩組受試者的年齡、性別、MDA含量、SOD、 GSH-Px活力比較，差別均無顯著性意義（P>0.05），均衡性較好，具有可比性。

2.2 對過氧化脂質(zhì)（MDA）含量的影響

由表2可知，試食組試食前后自身配對比較MDA含量差異具有顯著性意義（P<0.01）;對照組試食前后自身配對比較MDA含量差異無顯著性意義（P>0.05）;試食后試食組與對照組組間比較MDA含量差異具有顯著性意義（P< 0.01）;試食后試食組MDA含量下降百分率（8.52±14.78）%顯著高于對照組（-1.05±12.18）%（P<0.01）。過氧化脂質(zhì)含量試驗(yàn)結(jié)果呈陽性。

2.3 對谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活力的影響

由表3可知，試食組試食前后自身配對比較GSH-Px活力差異具有顯著性意義（P<0.01）;對照組試食前后自身配對比較GSH-Px活力差異無顯著性意義（P>0.05）;試食后試食組與對照組組間比較GSH-Px活力差異具有顯著性意義（P<0.05）;試食后試食組GSH-Px活力升高百分率（3.39±6.58）%顯著高于對照組0.34±2.71（P<0.01）。谷胱甘肽過氧化物酶試驗(yàn)結(jié)果呈陽性。

2.4 對超氧化物歧化酶（SOD）活力的影響

由表4可知，試食組試食前后自身配對比較SOD活力差異具有顯著性意義（P<0.01）;對照組試食前后自身配對比較SOD活力差異無顯著性意義（P>0.05）;試食后試食組與對照組組間比較SOD活力差異具有顯著性意義（P<0.01）;試食后試食組SOD活力升高百分率（10.26±17.06）%顯著高于對照組0.36±2.76（P<0.01）。超氧化物歧化酶試驗(yàn)結(jié)果呈陽性。

2.5 安全性檢查

試食后受試者的精神、睡眠、飲食、大小便、心率、血壓未見異常。胸透、心電圖、腹B超檢查（肝、膽、脾、雙腎）檢查均未見異常。心率、血壓、血常規(guī)及生化指標(biāo)見表 。

由表5可知，除血壓略高于正常值外，雖然與對照組比較，部分指標(biāo)的差異存在顯著性意義（P<0.05或P<0.01），但均在醫(yī)院正常參考范圍內(nèi)，差異無生物學(xué)意義。

2.6 尿及便常規(guī)

受試期間，受試者的尿常規(guī)和便常規(guī)檢查均未見異常改變。

3? 結(jié)語

該試驗(yàn)共120例受試者，分為試食組60例，對照組60例，試食組按要求服用蝦青素軟膠囊，對照組服用安慰劑，90d后獲得有效病例120例。試驗(yàn)結(jié)果表明，試食前兩組間MDA含量、GSH-Px及SOD活力無顯著差異，具有可比性;試食組試食前后自身配對比較MDA含量、GSH-Px及SOD活力差異具有顯著性意義（P<0.01）;對照組試食前后自身配對比較MDA含量、GSH-Px及SOD活力差異無顯著性意義（P>0.05）;試食后試食組與對照組組間比較MDA含量、GSH-Px及SOD活力差異均具有顯著性意義（P<0.05或P<0.01）。根據(jù)判定原則，以上人體試食結(jié)果表明，蝦青素軟膠囊具有抗氧化的功能。

在試食蝦青素軟膠囊前后，受試者血、尿、大便常規(guī)及肝腎功能各項(xiàng)檢測指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)。胸透、腹部B超、心電圖均未見異常，說明服用蝦青素軟膠囊對試食者身體健康無不良影響。該試驗(yàn)中蝦青素人體服用量為9mg/d，表明在此劑量下蝦青素對人體具有抗氧化功能且安全無毒。該試驗(yàn)未設(shè)計(jì)低中高劑量組，對蝦青素的起效最低劑量未進(jìn)行探索，后續(xù)可進(jìn)行劑量的考察。

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作者簡介：諸曉波（1993，1—），女，漢族，浙江衢州人，碩士研究生，主要從事保健食品及功能性食品開發(fā)。

通訊作者：王如偉（1967，12—），男，漢族，浙江杭州人，博士，博士生導(dǎo)師，教授級高級工程師，主要從事中藥新藥開發(fā)工作，E-mail：wangrw@conbagroup.com。