丹紅注射液聯(lián)合丁苯酞注射液對急性腦梗死病人BDNF、NPY和NSE的影響

李清華，侯雙興，楊化蘭，宿 映，涂志蘭，畢慶國，肖偉忠，陳 陽，葉 軍，潘丹紅，包 紅

急性腦梗死具有起病急、發(fā)展快、致殘率高等特點，并且其發(fā)病率有逐年升高的趨勢，尋找一種安全有效的治療方式已經(jīng)成為臨床研究的熱點。急性腦梗死發(fā)生時，神經(jīng)功能出現(xiàn)明顯損傷，腦血管的儲備功能明顯降低，腦血管儲備功能和神經(jīng)功能受損。丁苯酞注射液具有明顯改善腦神經(jīng)和重構(gòu)腦微循環(huán)作用，中醫(yī)藥治療能夠清除體內(nèi)的氧自由基，已經(jīng)有文獻(xiàn)報道，腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)是神經(jīng)營養(yǎng)因子家族的重要成員之一，對神經(jīng)元具有重要促進(jìn)分化、增殖和營養(yǎng)作用，并參與急性腦梗死的病理生理過程[1]。神經(jīng)肽Y(NPY)是胰多肽家族成員，主要作用于心腦血管系統(tǒng)，具有較強(qiáng)的縮血管作用，對腦血管功能具有重要的影響[2]。神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)主要由神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞分泌，急性腦梗死時大量的NSE通過血腦屏障進(jìn)入血液中，是急性腦梗死嚴(yán)重程度的生物學(xué)標(biāo)記物[3]。本研究觀察丹紅注射液聯(lián)合丁苯酞注射液治療急性腦梗死的療效，及其對BDNF、NPY和NSE的影響，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2012年1月—2017年12月在我院就診的急性腦梗死病人104例，采用隨機(jī)數(shù)字表法將病人分為觀察組和對照組，每組52例。觀察組，男29例，女23例；年齡60～79(68.34±5.64)歲；病程2～48(19.38±10.65) h；梗死發(fā)生部位：腦基底節(jié)31例，腦中葉13例，腦多發(fā)腦梗死8例；合并疾?。焊哐獕?8例，冠心病16例，糖尿病12例。對照組，男26例，女26例；年齡60～79(68.58±4.68)歲；病程(2～48)19.51±9.34 h；腦梗死發(fā)生部位：腦基底節(jié)33例，腦中葉12例，多發(fā)腦梗死7例；合并疾病：高血壓37例，冠心病18例，糖尿病9例。納入標(biāo)準(zhǔn)：均行頭顱CT和磁共振(MRI)檢測符合急性腦梗死的診斷；均經(jīng)醫(yī)院倫理委員會通過；均為首次發(fā)病。排除標(biāo)準(zhǔn)：對治療藥物過敏者；心、肝、腎等重要臟器功能障礙者；血液系統(tǒng)疾病和惡性腫瘤；痛風(fēng)和免疫學(xué)疾病。兩組年齡、性別、病程和發(fā)生部位等一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 兩組均予以常規(guī)治療，根據(jù)基礎(chǔ)疾病癥狀和體征予以吸氧，口服阿司匹林和他汀類藥物，對于有高血壓者予以口服降壓藥物，對于有糖尿病病人予以胰島素治療，同時予以護(hù)腦、降脂等治療。根據(jù)病情可以予以脫水等治療，并予以丁苯酞注射液100 mL加生理鹽水250 mL 靜脈輸注，每日2次，14 d為1個療程。觀察組在此基礎(chǔ)上予以丹紅注射液30 mL加入生理鹽水250 mL靜脈輸注，每日1次，14 d為1個療程。

1.2.2 療效評定標(biāo)準(zhǔn) 參照全國第四屆腦血管病會議制定的神經(jīng)功能缺損程度進(jìn)行評價。基本痊愈：神經(jīng)功能評分減少90%以上，傷殘程度為0級；顯著進(jìn)步：神經(jīng)功能缺損評分減少46%～90%，病殘程度為1～3級；進(jìn)步：神經(jīng)功能缺損減少18%～45%；無變化：神經(jīng)功能缺損低于18%下；惡化：神經(jīng)功能損傷評分增加18%以上。

1.2.3 腦血管功能測定 采用德國EME公司生產(chǎn)的經(jīng)顱內(nèi)多普勒儀對病人治療前后腦血管儲備功能(CVR)進(jìn)行測定，包括大腦中動脈(MCV)血流速度和脈動指數(shù)(PI)。

1.2.4 BDNF、NPY和NSE指標(biāo)測定 入院第一天和療程結(jié)束后，取空腹靜脈血10 mL，采用離心機(jī)2 500 r/min，離心半徑6 cm，離心約10 min，分離出上清液放置在-80 ℃的冰箱中保存。采用電化學(xué)發(fā)光儀(瑞士羅氏公司)及BDNF、NPY和NSE檢測試劑盒(瑞士羅氏公司)，靈敏度0.05 ng/mL。采用雙抗體夾心化學(xué)發(fā)光法檢測BDNF、NPY和NSE水平，用生物素化單克隆BDNF、NPY和NSE特異性抗體與血清混合，形成抗原抗體復(fù)合物，然后加入鏈霉素磁珠微粒進(jìn)行二次孵育，通過生物素和鏈霉素親和素作用結(jié)合，通過電磁效應(yīng)將磁珠吸附在電極表面，通過電極的電壓促進(jìn)復(fù)合物化學(xué)發(fā)光，測定發(fā)光強(qiáng)度，采用Elecsys軟件自動通過定標(biāo)曲線計算出BDNF、NPY和NSE含量。

1.2.5 觀察指標(biāo) 觀察兩組治療后臨床療效，治療前后血液流變學(xué)、美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表(NIHSS)評分、CVR，血清BDNF、NPY和NSE水平的變化。

2 結(jié) 果

2.1 兩組臨床療效比較 觀察組總有效率為94.23%，對照組總有效率為76.92%，觀察組總有效率明顯高于對照組(χ2=4.986，P<0.05)。詳見表1。

表1 兩組臨床療效比較

2.2 兩組治療前后血液流變學(xué)指標(biāo)比較 兩組治療前纖維蛋白原、血漿黏度、紅細(xì)胞比容和血小板聚集率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，治療后上述指標(biāo)均較治療前明顯降低(P<0.01)，觀察組纖維蛋白原、血漿黏度和血小板聚集率較對照組降低更加明顯(P<0.01)，兩組紅細(xì)胞比容比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。詳見表2。

表2 兩組治療前后血液流變學(xué)指標(biāo)比較(±s)

2.3 兩組治療前后NIHSS評分和CVR的變化 治療前兩組NIHSS評分、MCV血流速度、PI和CVR水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，治療后兩組NIHSS評分、PI較治療前明顯降低(P<0.01)，而MCV血流速度和CVR較治療前明顯升高(P<0.01)，觀察組的降低或者升高水平較對照組更加明顯(P<0.01)。詳見表3。

表3 兩組治療前后NIHSS評分和腦血管儲備能力的變化(±s)

2.4 兩組治療前后血清BDNF、NPY和NSE水平的變化 兩組治療前血清BDNF、NPY和NSE水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，治療后兩組血清BDNF較治療前明顯升高，NPY和NSE水平較治療前明顯降低(P<0.01)，而觀察組升高或降低水平較對照組更加明顯(P<0.01)。詳見表4。

表4 兩組治療前后血清BDNF、NPY和NSE水平的變化(±s) 單位：μg/L

3 討 論

丁苯酞注射液治療急性腦梗死得到廣泛運用，并且與其他治療具有明顯優(yōu)勢，丁苯酞注射液治療后能夠明顯提高腦血管一氧化氮和前列環(huán)素水平，降低細(xì)胞內(nèi)鈣離子的濃度，抑制氧自由基的釋放，改善缺血區(qū)腦毛細(xì)血管的數(shù)量和改善微循環(huán)區(qū)域的血液流量，達(dá)到保護(hù)線粒體功能，改善能量代謝，抑制細(xì)胞凋亡和縮小腦梗死面積[4]。丹紅注射液主要由紅花和丹參組成，紅花主要成分為黃酮類、脂肪酸、揮發(fā)油和紅花多糖等，具有抗凝抗血栓，抑制血小板聚集、鎮(zhèn)痛、降脂、擴(kuò)張血管和改善微循環(huán)、抗腦血管缺血、對神經(jīng)元的損傷具有明顯的保護(hù)作用[5]。丹參的主要化學(xué)成分由水溶性和脂溶性化學(xué)成分組成，具有清除機(jī)體氧自由基，保護(hù)線粒體和改善能量代謝，減輕鈣負(fù)荷和調(diào)節(jié)鈣穩(wěn)定，調(diào)節(jié)炎性因子代謝平衡，具有免疫調(diào)節(jié)和抗感染作用[6]。

本研究結(jié)果表明，丹紅注射液聯(lián)合丁苯酞注射液治療急性腦梗死較單純丁苯酞注射液治療可升高機(jī)體血清BDNF水平。BDNF屬于神經(jīng)營養(yǎng)因子家族成員，對腦缺血損傷具有明顯保護(hù)作用，有助于神經(jīng)元生長、分化及損傷后的修復(fù)，且具有營養(yǎng)作用，具有預(yù)防運動神經(jīng)元凋亡作用[7]。實驗研究表明，腦梗死后靜脈注射BDNF能夠明顯減少腦梗死的面積，促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)[8]。在正常情況下，BDNF不能通過血腦屏障，只有在腦損傷和血腦屏障通透性增加時，BDNF透過血腦屏障進(jìn)入血液循環(huán)，且很快被降解，血清BDNF水平明顯降低。本研究通過丁苯酞注射液和丹紅注射液治療后，能夠明顯提高機(jī)體BDNF水平，從而達(dá)到營養(yǎng)損傷部位的神經(jīng)，減少神經(jīng)細(xì)胞的凋亡作用，可提高療效。觀察組病人血清NPY水平較對照組降低更加明顯。NPY是神經(jīng)活性肽，是神經(jīng)活性物質(zhì)，在急性腦梗死時血清NPY水平明顯升高[9]。NPY的生物學(xué)活性主要通過結(jié)合Y1受體，促進(jìn)腦動脈血管收縮[10]，腦梗死導(dǎo)致腦組織缺血缺氧，反射性引起交感-兒茶酚胺系統(tǒng)出現(xiàn)興奮，促使副交感神經(jīng)釋放NPY[11]；急性腦梗死引起顱內(nèi)壓升高，致丘腦-垂體-腎上腺素系統(tǒng)損害，應(yīng)激激素升高，血漿NPY水平升高[12]。丁苯酞注射液聯(lián)合丹紅注射液后能夠明顯增加大腦血供，改善腦組織缺氧狀態(tài)，降低機(jī)體NPY水平。NSE主要存在于神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞中并參與糖酵解，是腦神經(jīng)元損傷和嚴(yán)重程度的特異性指標(biāo)[13]。急性腦梗死病人血清NSE水平越高，腦組織損傷程度越重，神經(jīng)功能恢復(fù)越差，臨床預(yù)后越差。丁苯酞注射液聯(lián)合丹紅治療急性腦梗死可能促進(jìn)腦部的側(cè)支循環(huán)，增加腦組織中的血液供應(yīng)，達(dá)到抑制神經(jīng)元凋亡，從而降低NSE的釋放；聯(lián)合治療后能促進(jìn)保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞因子的分泌，穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)環(huán)境，促進(jìn)損傷神經(jīng)細(xì)胞的修復(fù)[14]。說明丁苯酞注射液聯(lián)合丹紅注射液治療急性腦梗死通過提高BDNF水平、降低NPY、NSE水平，從而達(dá)到治療目的。

本研究發(fā)現(xiàn)，觀察組總有效率明顯優(yōu)于對照組，觀察組對血液流變指標(biāo)具有明顯改善作用，主要包括降低纖維蛋白原、血液黏度和血小板聚集率，降低NIHSS評分和PI水平，提高M(jìn)CV血流速度和CVR水平，丹紅注射液聯(lián)合丁苯酞注射液能夠提高治療效果，改善血液流變學(xué)指標(biāo)和腦部血管供血情況，可能與丁苯酞注射液和丹紅注射液成分具有明顯的相關(guān)性。

丹紅注射液聯(lián)合丁苯酞注射液治療急性腦梗死療效顯著，具有改善血液流變學(xué)作用，其機(jī)制可能與糾正機(jī)體神經(jīng)相關(guān)的細(xì)胞因子紊亂有關(guān)。