兩種蟲(chóng)蛹冷藏存活率及其作為配對(duì)期食物對(duì)蠋蝽產(chǎn)卵的影響

黃勇 任曉紅 夏鵬亮 解曉菲 李錫宏 喬保明 全琳 王瑞

摘 ?要：針對(duì)蠋蝽規(guī)?；庇谐上x(chóng)配對(duì)期食物的優(yōu)化，研究了黏蟲(chóng)蛹和黃粉蟲(chóng)蛹低溫保藏后的存活率及其作為配對(duì)期食物對(duì)蠋蝽產(chǎn)卵的影響。結(jié)果表明，黃粉蟲(chóng)蛹和黏蟲(chóng)蛹在6 ℃保藏30 d后的存活率分別為89.33%、22.67%;蠋蝽配對(duì)期以冷藏黃粉蟲(chóng)蛹為食物，其總產(chǎn)卵量、單次平均產(chǎn)卵量、孵化率均顯著高于以冷藏黏蟲(chóng)蛹為食物;蠋蝽對(duì)冷藏黃粉蟲(chóng)蛹的捕食偏好高于冷藏黏蟲(chóng)蛹。以冷藏的黃粉蟲(chóng)蛹作為配對(duì)期食物對(duì)提高蠋蝽人工擴(kuò)繁效率具有重要意義。

關(guān)鍵詞：黏蟲(chóng);黃粉蟲(chóng);蠋蝽;產(chǎn)卵;冷藏

Survival Rate of Two Pupae after Cryopreservation and their Influence on Oviposition as the Diet of Armachinensis during Its Mating Period

HUANG Yong1， REN Xiaohong1， XIA Pengliang1， XIE Xiaofei1，LI Xihong2，

QIAO Baoming1， QUAN Lin1， WANG Rui1*

（1. Enshi Tobacco Company of Hubei Province， Enshi， Hubei 445000， China; 2. Tobacco Research Institute of Hubei Province， Wuhan 430030， China）

Abstract： In order to optimize the diet of Armachinensis during its mating period in large-scale breeding， the oviposition of Armachinensis when provided with pupa of Mythimna separate and Tenebriomolitor as diet was evaluated. In addition， the pupa survival rate of M. separate and T.molitor after cryopreservation was investigated. The results showed that after cryopreservation at 6 ℃ for 30 days， the pupa survival rates of M. separate and T.molitor were 89.33% and 22.67%， respectively. The total and average oviposition amount， and the hatchability of A.chinensis fed on refrigerated T.molitor pupae were significantly higher than those fed on refrigerated M. separate pupae during mating period. Armachinensis had higher predation preference for refrigerated pupae of T.molitor than M.separata. The pupae of T.molitor stored at low temperature could be an important diet to improve the efficiency of artificial propagation for A. chinensis during its mating period.

Keywords： Mythimnaseparate; Tenebriomolitor; Armachinensis; oviposition; cryopreservation

蠋蝽Armachinensis（Fallou）是優(yōu)良的天敵昆蟲(chóng)，屬半翅目Hemiptera，蝽科Pentatomidae，益蝽亞科Asopinae，蠋蝽屬Arma。蠋蝽能夠捕食鱗翅目Lepidoptera、鞘翅目Coleoptera、膜翅目Hymenoptera等40多種農(nóng)林害蟲(chóng)的卵、幼蟲(chóng)、蛹和成蟲(chóng)等。有關(guān)蠋蝽的人工飼養(yǎng)，前人做了很多研究，包括蠋蝽的獵物篩選[1]、人工飼料[2-3]、飼養(yǎng)溫度[4]、飼養(yǎng)密度與性比[5]、捕食能力[6-7]等。成蟲(chóng)期的食物營(yíng)養(yǎng)對(duì)昆蟲(chóng)的產(chǎn)卵繁殖影響大[8-10]，但關(guān)于蠋蝽配對(duì)產(chǎn)卵期的食物選擇方面還未見(jiàn)報(bào)道。

當(dāng)前蠋蝽人工飼料尚不成熟，規(guī)模化繁育中若

蟲(chóng)期主要以黏蟲(chóng)幼蟲(chóng)作為食物，成蟲(chóng)配對(duì)期主要以黏蟲(chóng)Mythimnaseparata（Walker）蛹作為食物提供營(yíng)養(yǎng)。蠋蝽配對(duì)產(chǎn)卵期長(zhǎng)，在蠋蝽擴(kuò)繁特別是冬季保種后種群擴(kuò)繁時(shí)，需要消耗大量蛹為成蟲(chóng)配對(duì)產(chǎn)卵提供營(yíng)養(yǎng)，而常溫下寄主的蛹期短易發(fā)育為成蟲(chóng)，規(guī)?；瘮U(kuò)繁時(shí)常受到寄主蛹匱乏的限制。為此，需在蠋蝽擴(kuò)繁時(shí)儲(chǔ)備有足量的寄主蛹，而低溫保存是蛹的一種簡(jiǎn)單易行的長(zhǎng)時(shí)間保鮮方法。前人研究表明，蛹齡48 h的桑蠶蛹在2 ℃冷藏64 d的存活比例達(dá)70%[11]，僵化3 d的僵蚜在5 ℃冷藏30 d后煙蚜繭蜂平均羽化率達(dá)72.33%[12]。

基于此，本試驗(yàn)探索了黏蟲(chóng)蛹和黃粉蟲(chóng)Tenebriomolitor蛹的低溫保藏存活率，及其作為配對(duì)期食物對(duì)蠋蝽產(chǎn)卵擴(kuò)繁的影響，以期為解決蠋蝽規(guī)?；瘮U(kuò)繁配對(duì)期寄主蛹匱乏的問(wèn)題提供理論參考。

1 ?材料與方法

1.1 ?供試蟲(chóng)源

試驗(yàn)于2019年3—10月進(jìn)行。黏蟲(chóng)經(jīng)實(shí)驗(yàn)室多代（>5代）飼養(yǎng)，以玉米葉為食物。黃粉蟲(chóng)經(jīng)實(shí)驗(yàn)室多代（>10代）飼養(yǎng)，以麥麩、白菜葉等為食物喂養(yǎng)。蠋蝽種源為貴州省煙草公司遵義市公司連續(xù)多代飼養(yǎng)后的蠋蝽卵，引種至湖北恩施進(jìn)行繁育后產(chǎn)下第3代蠋蝽卵，孵化后以5%蜂蜜水飼養(yǎng)至2齡，再以黏蟲(chóng)幼蟲(chóng)為食物飼養(yǎng)至成蟲(chóng)。

1.2 ?試驗(yàn)處理

1.2.1 ?蟲(chóng)蛹冷藏處理 ?分別挑選1～2日齡的黏蟲(chóng)蛹和黃粉蟲(chóng)蛹各30頭放入培養(yǎng)皿中，然后將培養(yǎng)皿置于（6±1） ℃的低溫環(huán)境下保存。8次重復(fù)。于第15、30、60 d將培養(yǎng)皿保存的試蟲(chóng)從低溫環(huán)境下取出，置于溫度（26±1） ℃、濕度（65±5）%、光周期L16∶D8的環(huán)境中，12 h后觀察蟲(chóng)體存活情況。結(jié)合蟲(chóng)蛹體色及碰觸反應(yīng)判定，蛹體黑色多為已死亡，輕觸試蟲(chóng)后，試蟲(chóng)有反應(yīng)則視為存活。觀察并統(tǒng)計(jì)蟲(chóng)蛹存活率。

1.2.2 ?配對(duì)期蠋蝽喂食處理 ?挑選大小均勻一致的同一批次蠋蝽成蟲(chóng)，將1雌1雄置于塑料杯中進(jìn)行配對(duì)，杯內(nèi)放有折疊的紙張供其攀爬棲息，杯口用100目紗網(wǎng)覆蓋，紗網(wǎng)上放有浸濕的脫脂棉提供水分。塑料杯統(tǒng)一置于溫度（26±1） ℃、濕度（65±5）%、光周期L16∶D8的人工氣候箱中。以未冷藏的黏蟲(chóng)蛹作配對(duì)期食物為對(duì)照，分別于杯中投放經(jīng)低溫[（6±1） ℃]保存（30±5） d后的同一批次的活體黏蟲(chóng)蛹或黃粉蟲(chóng)蛹各2頭，作為配對(duì)期蠋蝽的食物。每天根據(jù)取食情況更換食物和添加清水，并收集卵粒置于墊有濾紙的培養(yǎng)皿中，用注射器定時(shí)定量加水以保持濾紙濕潤(rùn)。每日定時(shí)10：00觀察統(tǒng)計(jì)產(chǎn)卵及孵化情況，根據(jù)蠋蝽產(chǎn)卵習(xí)慣（每2～3 d產(chǎn)卵一次，每次產(chǎn)10～30粒堆聚）其產(chǎn)卵次數(shù)以有收集到卵的天數(shù)表示，直至蠋蝽雌蟲(chóng)死亡（若雄蟲(chóng)死亡則更換1頭新的雄蟲(chóng)）。重復(fù)次數(shù)5次。

1.2.3 ?蠋蝽捕食偏好處理 ?成蟲(chóng)捕食偏好處理：將兩種冷藏[（6±1） ℃]保存30 d的蟲(chóng)蛹恢復(fù)活性后，兩種蛹各取1粒分別置于培養(yǎng)皿內(nèi)相對(duì)的兩邊緣處，每皿投放蠋蝽成蟲(chóng)10頭（5對(duì)），8次重復(fù)。

若蟲(chóng)捕食偏好處理：孵化后的蠋蝽以5%蜂蜜水喂養(yǎng)至2齡。將兩種冷藏[（6±1） ℃]保存30 d的蟲(chóng)蛹恢復(fù)活性后，兩種蛹各取一粒分別置于培養(yǎng)皿內(nèi)相對(duì)的兩邊緣處，每皿投放2齡蠋蝽18頭，8次重復(fù)。

24 h后觀察統(tǒng)計(jì)蠋蝽成蟲(chóng)、若蟲(chóng)對(duì)兩種低溫保存蟲(chóng)蛹的捕食偏好。捕食偏好度以蟲(chóng)蛹周?chē)奂∈车南庲頂?shù)量占培養(yǎng)皿內(nèi)蠋蝽總數(shù)的百分比表示。

1.2.4 ?數(shù)據(jù)分析 ?使用Excel和SPSS 20.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)法分析比較兩種蟲(chóng)蛹的冷藏后存活率、蠋蝽捕食偏好;單因素方差分析和Duncan多重比較測(cè)驗(yàn)蠋蝽總產(chǎn)卵量、產(chǎn)卵次數(shù)、均次產(chǎn)卵量、產(chǎn)卵期、孵化率等指標(biāo)。統(tǒng)計(jì)分析前進(jìn)行l(wèi)evene方差齊性檢驗(yàn)。

2 ?結(jié) ?果

2.1 ?低溫保存不同時(shí)間后的兩種蟲(chóng)蛹存活率差異

由表1可知，兩種蟲(chóng)蛹在（6±1） ℃下分別保存15、30、60 d后的存活率有差異，在保存同樣的時(shí)間后均表現(xiàn)為黃粉蟲(chóng)蛹明顯高于黏蟲(chóng)蛹，且在統(tǒng)計(jì)學(xué)上表現(xiàn)為差異極顯著。這說(shuō)明黃粉蟲(chóng)蛹相比黏蟲(chóng)蛹具有更強(qiáng)抗寒性，更耐低溫保存。

2.2 ?配對(duì)期取食兩種冷藏蟲(chóng)蛹后的蠋蝽產(chǎn)卵差異

如表2所示，蠋蝽配對(duì)期以兩種冷藏保存30 d的蟲(chóng)蛹為食物，其產(chǎn)卵情況有差異。與以冷藏黏蟲(chóng)蛹為食的蠋蝽相比，以冷藏黃粉蟲(chóng)蛹為食物的蠋蝽，其總產(chǎn)卵量、產(chǎn)卵次數(shù)、平均每次產(chǎn)卵量、產(chǎn)卵期、卵的孵化率都有提升，并且總產(chǎn)卵量、產(chǎn)卵次數(shù)、平均每次產(chǎn)卵量、孵化率的差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上達(dá)顯著水平;與對(duì)照（未冷藏黏蟲(chóng)蛹）相比，以冷藏黃粉蟲(chóng)蛹為食物的蠋蝽其產(chǎn)卵情況各指標(biāo)無(wú)顯著差異，而以冷藏黏蟲(chóng)蛹為食物的蠋蝽其總產(chǎn)卵量、產(chǎn)卵次數(shù)、均次產(chǎn)卵量、卵孵化率均明顯降低，且差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上達(dá)顯著水平。

2.3 ?蠋蝽對(duì)兩種冷藏蟲(chóng)蛹的捕食偏好

如表3所示，蠋蝽成蟲(chóng)和若蟲(chóng)對(duì)冷藏保存的黏蟲(chóng)蛹和黃粉蟲(chóng)蛹都表現(xiàn)出明顯的捕食偏好差異，且二者的差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上達(dá)顯著水平。蠋蝽成蟲(chóng)中偏好捕食黃粉蟲(chóng)蛹的要比偏好捕食黏蟲(chóng)的多12個(gè)百分點(diǎn)，蠋蝽若蟲(chóng)中偏好捕食黃粉蟲(chóng)蛹的要比偏好捕食黏蟲(chóng)的多40個(gè)百分點(diǎn)。圖1為所觀察拍攝到的蠋蝽成蟲(chóng)與若蟲(chóng)取食偏好情況。蠋蝽成蟲(chóng)與若蟲(chóng)在同一寄主蟲(chóng)蛹上的捕食偏好指標(biāo)差異可能與其捕食效率有關(guān)，成蟲(chóng)捕食效率高，用時(shí)相對(duì)較若蟲(chóng)短，從而在同一時(shí)間點(diǎn)上所能觀測(cè)到正在取食的蠋蝽成蟲(chóng)較少。

3 ?討 ?論

蠋蝽是農(nóng)林業(yè)中重要的捕食性天敵，它的人工繁育技術(shù)直接影響其作為生物防治技術(shù)的可推廣性。研究配對(duì)期食物對(duì)蠋蝽產(chǎn)卵的影響有利于提高蠋蝽的保種與擴(kuò)繁效率，為其產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用[13]提供理論支撐。

葉興乾[14]研究表明，黃粉蟲(chóng)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，蛹的蛋白質(zhì)、脂肪含量分別達(dá)56.7%、36.2%，還含有較高的維生素B1和一定的維生素A、E，鐵和鋅。陳倩等[15]研究了以?4℃下貯存1～60 d黃粉蟲(chóng)蛹為寄主的管氏硬皮腫腿蜂繁育情況，發(fā)現(xiàn)以貯存20、30 d蛹的出蜂情況為最佳。在本試驗(yàn)中，黃粉蟲(chóng)蛹低溫（6℃）保存30 d后的存活率可達(dá)89.33%，其作為蠋蝽食物有著較長(zhǎng)的貨架期可供選擇;并且在蠋蝽產(chǎn)卵繁殖效率和捕食偏好上，取食冷藏30 d黃粉蟲(chóng)蛹的要明顯高于取食冷藏30 d黏蟲(chóng)蛹的，但與取食未冷藏黏蟲(chóng)蛹的各指標(biāo)差異不大。這表明通過(guò)冷藏黃粉蟲(chóng)蛹來(lái)延長(zhǎng)寄主貨架期，從而提升蠋蝽規(guī)模化擴(kuò)繁效率具有可行性，但什么溫度下冷藏最適宜用于擴(kuò)繁蠋蝽還需進(jìn)一步研究。

本試驗(yàn)結(jié)果可為蠋蝽成蟲(chóng)配對(duì)期食物選擇、蠋蝽人工繁育技術(shù)提升提供理論參考。本試驗(yàn)明確了冷藏黃粉蟲(chóng)蛹可作為蠋蝽配對(duì)期的食物之一，并具有耐儲(chǔ)存、高擴(kuò)繁效率的特點(diǎn)，加之黃粉蟲(chóng)飼養(yǎng)簡(jiǎn)單、成本經(jīng)濟(jì)[16]，有利于蠋蝽人工飼養(yǎng)成本的降低，為人工繁育蠋蝽進(jìn)行生物防治提供參考。

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作者簡(jiǎn)介：黃 ?勇（1985-），男，農(nóng)藝師，碩士，主要從事煙草栽培和植保方面的研究。E-mail：heiyingsiyu@163.com

*通信作者，E-mail：wangrui2999@126.com

收稿日期：2019-10-12 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?修回日期：2020-01-20