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    空氣濕度對(duì)注射用重組人干擾素α2b水分測(cè)定的影響

    2020-05-18 07:03:46馮雪李帥李野曹宇楊紅育
    生物化工 2020年2期

    馮雪,李帥,李野,曹宇,楊紅育

    (長(zhǎng)春生物制品研究所有限責(zé)任公司,吉林長(zhǎng)春 130012)

    注射用重組人干擾素α2b是由高效表達(dá)該干擾素基因的大腸桿菌經(jīng)發(fā)酵、分離和高度純化后獲得的重組人干擾素α2b凍干制成,含適宜穩(wěn)定劑,不含防腐劑和抗生素[1]。水分是注射用重組人干擾素α2b的一項(xiàng)重要指標(biāo),需要對(duì)其進(jìn)行準(zhǔn)確測(cè)定。測(cè)定水分的方法有很多,卡爾·費(fèi)休法自Karl Fischer于1935年發(fā)明后,已成為世界公認(rèn)的水分測(cè)定的經(jīng)典方法之一[2-5]。有文獻(xiàn)表明[6-8],卡爾·費(fèi)休容量滴定法的影響因素較多,其中環(huán)境濕度是導(dǎo)致費(fèi)休氏法滴定出現(xiàn)誤差的常見(jiàn)因素之一。當(dāng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境中空氣相對(duì)濕度低于40%時(shí),水分測(cè)定儀漂移值基本穩(wěn)定,但隨著實(shí)驗(yàn)環(huán)境中空氣濕度的不斷增大,測(cè)定結(jié)果也隨之增大。注射用重組人干擾素α2b為水溶性凍干制劑,在測(cè)定水分過(guò)程中,樣品的前處理過(guò)程也會(huì)受到環(huán)境濕度的影響。本文通過(guò)稱量法和卡爾·費(fèi)休容量滴定法測(cè)定該藥品在不同相對(duì)濕度下增的水分含量,對(duì)該藥品水分測(cè)定過(guò)程中空氣相對(duì)濕度的影響進(jìn)行研究。

    1 材料與方法

    1.1 材料和儀器

    乙酸鉀(分析純;含量≥92.0%)、氯化鎂(分析純;含量≥98.0%)、碳酸鉀(分析純;含量≥99.0%)、溴化鈉(分析純;含量≥99.0%)、氯化鈉(分析純;含量≥99.5%)均購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

    XS205型電子天平、V30水分測(cè)定儀和Stromboli卡氏干燥爐均購(gòu)自梅特勒-托利多。

    1.2 實(shí)驗(yàn)樣品

    注射用重組人干擾素α2b由長(zhǎng)春生物制品研究所有限責(zé)任公司生產(chǎn),批號(hào)為B20190501、B20190502、B20190503。

    1.3 實(shí)驗(yàn)方法

    1.3.1 稱量法

    取5個(gè)玻璃干燥器,配制5種無(wú)機(jī)鹽的飽和溶液[9-10],鹽的種類及其在25 ℃和30 ℃下的濕度見(jiàn)表1。為避免卡氏樣品瓶在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中吸濕對(duì)測(cè)定產(chǎn)生影響,放置樣品前先將卡氏樣品瓶分別放入干燥器中干燥至恒重。

    將樣品搗碎,倒入已恒重的卡氏樣品瓶中,精密稱量(精確至0.01 mg),記錄樣品和卡氏樣品瓶的總質(zhì)量。再將其分別放置于上述干燥器中10 min,精密稱定(精確至0.01mg),記錄總質(zhì)量。兩次稱量之差即為樣品增加的水含量。

    表1 飽和無(wú)機(jī)鹽溶液濕度對(duì)照表

    1.3.2 卡爾·費(fèi)休容量滴定法

    1.3.2.1 操作條件

    卡氏干燥爐加熱溫度:(150±2)℃;卡氏干燥爐加熱時(shí)間:10 min;費(fèi)休氏試液滴定度:1 mg/mL;載氣:高純氮。

    1.3.2.2 測(cè)定方法

    分別在環(huán)境濕度為27%及42%條件下測(cè)定樣品,每批樣品連續(xù)測(cè)定6次。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 不同濕度下稱量法測(cè)定樣品增加水含量的差異

    如圖1所示,通過(guò)測(cè)定不同相對(duì)濕度下樣品增加的水含量,觀察到樣品在飽和溴化鈉溶液(55.6%~58.0%)和飽和氯化鈉溶液(74.9%~75.5%)中水含量增加較多,在飽和乙酸鉀溶液(21.0%~22.9%)中增加最少,在飽和氯化鎂溶液(32.2%~33.0%)及飽和碳酸鉀溶液(42.7%~43.6%)中增加量幾乎相同。樣品水分含量隨著空氣濕度的增大而增大。

    圖1 不同相對(duì)濕度下稱量法測(cè)定樣品增加的水含量

    2.2 不同濕度下卡爾·費(fèi)休容量滴定法測(cè)定樣品水分的差異

    如表2所示,通過(guò)平均值比較,同一批號(hào)的樣品采用卡爾·費(fèi)休容量滴定法在環(huán)境濕度為27%及42%條件下,測(cè)得水分含量無(wú)顯著差異,這說(shuō)明環(huán)境濕度對(duì)卡爾·費(fèi)休容量滴定法測(cè)定樣品水分沒(méi)有明顯影響。

    3 結(jié)論

    采用稱量法和卡爾·費(fèi)休法測(cè)定不同濕度條件下注射用重組人干擾素α2b樣品中的水分含量。發(fā)現(xiàn)使用稱量法時(shí),隨著空氣濕度的增大,樣品含水量也隨之增大,空氣濕度對(duì)水分含量的影響較大;使用卡爾·費(fèi)休法時(shí),不同濕度條件下測(cè)得的水分含量無(wú)明顯差別。說(shuō)明卡爾·費(fèi)休法可以更為準(zhǔn)確地測(cè)定重組人干擾素α2b樣品中的水分含量。

    表2 不同環(huán)境濕度下卡爾·費(fèi)休容量法測(cè)定樣品水分含量

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