廣西規(guī)?；i場(chǎng)呼吸道病原菌調(diào)查及耐藥性分析

馮建遠(yuǎn)吳廷瑛郭 旋*陳 瓊周天武黃 強(qiáng)謝寶陽(yáng)張 寧

（1廣西農(nóng)墾永新畜牧集團(tuán)金光有限公司，廣西南寧 530023；2南寧諸福萊動(dòng)物健康管理有限公司，廣西南寧 530005）

近幾年，由于規(guī)?；i場(chǎng)飼養(yǎng)密度增加，天氣復(fù)雜多變且溫差較大，豬群呼吸道疾病發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，導(dǎo)致豬只的死亡，影響豬只生長(zhǎng)，降低飼料報(bào)酬，造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失，是規(guī)?；i場(chǎng)中重點(diǎn)防治而又難以防治的疾病之一[1-2]。而豬場(chǎng)亂用、濫用藥物導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性增加，肉產(chǎn)品中藥物殘留、抗生素社會(huì)環(huán)境污染公眾關(guān)注度提高等一系列問(wèn)題，使豬細(xì)菌疾病防治形勢(shì)越來(lái)越嚴(yán)峻[3-6]。為了解廣西地區(qū)豬場(chǎng)呼吸道常見(jiàn)病原菌的流行情況，特對(duì)廣西的規(guī)?；i場(chǎng)中豬群的呼吸道病原菌進(jìn)行分離鑒定和藥物敏感性分析，用于指導(dǎo)豬場(chǎng)選擇敏感藥物進(jìn)行預(yù)防與治療。

1 材料和方法

1.1 培養(yǎng)基

購(gòu)自北京陸橋生物技術(shù)有限責(zé)任公司，包括TSA、巧克力、KF、MHA培養(yǎng)基等。

1.2 藥敏紙片

22種豬場(chǎng)常用藥物的藥敏紙片，購(gòu)自杭州天和微生物試劑有限公司。

1.3 細(xì)菌分離

2018—2019年來(lái)自廣西規(guī)模豬場(chǎng)精神不振、呼吸困難的發(fā)病豬病料，取肺臟、腎臟、脾臟無(wú)菌劃線接種于TSA（含1‰NAD＋5%馬血清）培養(yǎng)基。

1.4 細(xì)菌鑒定

革蘭氏或瑞氏染色鏡檢可疑細(xì)菌，根據(jù)細(xì)菌形態(tài)、染色鏡檢結(jié)果，選擇TSA（含1‰NAD＋5%馬血清）、巧克力或KF培養(yǎng)基等劃線純培養(yǎng)，純培養(yǎng)的細(xì)菌通過(guò)PCR進(jìn)行鑒定。

1.5 藥敏試驗(yàn)

將分離純化后的細(xì)菌用L型棒涂布于TSA或MHA平板上，用無(wú)菌鑷子貼上藥敏紙片，37℃培養(yǎng)24～36 h，觀察結(jié)果。

2 結(jié)果與分析

2.1 細(xì)菌分離的情況

2018—2019年共采集了廣西11個(gè)地級(jí)市的55份有呼吸道癥狀的發(fā)病豬病料，主要取病豬的肺臟、腎臟、脾臟、胸腔積液進(jìn)行細(xì)菌分離，其中49份病料分離出病原菌，病料的細(xì)菌分離率為89.09%（表1、圖1）。

2.2 呼吸道病原菌流行情況

由表1可見(jiàn)，從送檢的肺臟、肝臟、腎臟、腦等病料組織中分離出的細(xì)菌包括豬鏈球菌、副豬嗜血桿菌、豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌、巴氏桿菌、波氏桿菌和肺炎克雷伯桿菌，細(xì)菌呈現(xiàn)單一感染或混合感染（感染比率見(jiàn)圖2），單一感染率為85.4%，其中鏈球菌的感染比率最大，為33.3%，其次是副豬嗜血桿菌，為27.1%，豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌為8.3%，巴氏桿菌為6.3%；在混合感染中，副豬嗜血桿菌和鏈球菌的混合感染率最高。

2.3 呼吸道病原菌藥敏情況

對(duì)分離率較高的豬鏈球菌、副豬嗜血桿菌、豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌和巴氏桿菌進(jìn)行耐藥性分析，所選的藥物是豬場(chǎng)常用的藥物，主要有青霉素、氨芐西林、阿莫西林、阿莫西林克拉維酸鉀、頭孢拉定、鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素、阿米卡星、林可霉素、強(qiáng)力霉素、四環(huán)素、多黏菌素B、磺胺間甲氧嘧啶、洛美沙星、氟苯尼考、替米考星、泰樂(lè)菌素、氧氟沙星、恩諾沙星、環(huán)丙沙星和諾氟沙星22種藥物。

表1 廣西感染呼吸道病原菌病豬病料的采集與分離情況

4種細(xì)菌對(duì)22種豬場(chǎng)常用藥物表現(xiàn)出不同程度的耐藥性，耐藥程度最嚴(yán)重的是巴氏桿菌，均耐藥率達(dá)到65%，其次是副豬嗜血桿菌、豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌、鏈球菌（圖3）；而對(duì)4種細(xì)菌均產(chǎn)生嚴(yán)重耐藥性的藥物為卡那霉素、慶大霉素、鏈霉素、林可霉素、強(qiáng)力霉素、四環(huán)素、多黏菌素B、磺胺間甲氧嘧啶、洛美沙星，敏感率均低于30%（表2）。

表2 主要呼吸道病原菌的耐藥率和敏感率

3 小結(jié)

3.1 呼吸道病原菌流行特點(diǎn)

通過(guò)調(diào)查近2年廣西規(guī)模化豬場(chǎng)呼吸道疾病的流行情況，從送檢的肺臟、脾臟、腎臟、淋巴結(jié)等病料中分離出的病原菌包括豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌、副豬嗜血桿菌、巴氏桿菌、豬鏈球菌，波氏桿菌和肺炎克雷伯桿菌，病料的細(xì)菌分離率為89.09%，這說(shuō)明在規(guī)?；i場(chǎng)呼吸道細(xì)菌疾病的發(fā)生頻率很高。通過(guò)細(xì)菌分離鑒定后發(fā)現(xiàn)，豬場(chǎng)主要是單一種細(xì)菌的感染，其中鏈球菌的感染比率為33.3%，副豬嗜血桿菌為27.1%；混合感染的比率較低，主要是副豬嗜血桿菌和鏈球菌的混合感染。

3.2 藥物耐藥性情況

耐藥性分析發(fā)現(xiàn)，鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素、林可霉素、泰樂(lè)菌素、四環(huán)素、磺胺間甲氧嘧啶、多黏菌素B對(duì)4種常見(jiàn)分離菌的耐藥率達(dá)到了50%以上，青霉素、氟苯尼考、強(qiáng)力霉素、諾氟沙星、環(huán)丙沙星、替米考星也表現(xiàn)出嚴(yán)重的耐藥性，這些都是在豬場(chǎng)臨床上廣泛且頻繁使用的藥物，說(shuō)明藥物的耐藥性可能是豬場(chǎng)長(zhǎng)期或單一使用某種抗菌藥物而誘導(dǎo)產(chǎn)生的。以下是本文通過(guò)細(xì)菌藥敏分析，篩選的對(duì)主要呼吸道病原菌敏感性較高的藥物（表4）。

表4 針對(duì)4種常見(jiàn)呼吸道細(xì)菌的敏感藥物

藥物耐藥性的上升趨勢(shì)令人擔(dān)憂，為了避免耐藥菌株的出現(xiàn)，豬場(chǎng)應(yīng)該嚴(yán)格篩選敏感性較高的藥物進(jìn)行預(yù)防和治療，同時(shí)注重輪換用藥和聯(lián)合用藥；并定期對(duì)豬場(chǎng)的病原菌做藥敏試驗(yàn)，指導(dǎo)臨床正確用藥。在豬場(chǎng)日常管理中，加強(qiáng)豬場(chǎng)生物安全的防控工作，監(jiān)管好豬群免疫，提高豬群特異性免疫力，降低病毒性疾病的流行，可以有效減少細(xì)菌性疾病的繼發(fā)感染，降低經(jīng)濟(jì)損失。